活体电穿孔法与其他活体基因导入方法的比较
到目前为止,非病毒载体的活体基因导入方法有直接注射法、脂质体法、基因枪法、电穿孔法等。每一种方法都有其各自的特殊性,因此很难将这几种方法进行简单的比较。 1、直接注射法 可将外源基因直接注射到靶位点或血管中,但此种方法不适合以肌肉作为靶器官,它的外源基因表达效率极低,仅为电穿孔法的百分之一。 2、脂质体法 活体基因转移法中脂质体法更适宜较大面积组织的基因导入,但无法避免DNA浓度变低,在出血的情况下会使本来不高的DNA浓度更加降低,往往造成基因导入效率低。 3、基因枪法 适合于DNA较易接触到的质地较坚韧的组织如皮肤,而视网膜、胚胎和禽类的胚盘等组织会由于机械刺激和出血造成器质性损伤或发育停滞,因而不能用基因枪法完成。DNA包裹的金属颗粒从基因枪发出到达组织表面大多只几百微米的距离,较深层的组织不易操作, 表达效率也较低。 Muramatsu报道在材料一致的情况下,电穿孔法的基因导入和表达效率明显高于其它方法,......阅读全文
活体电穿孔法与其他活体基因导入方法的比较
到目前为止,非病毒载体的活体基因导入方法有直接注射法、脂质体法、基因枪法、电穿孔法等。每一种方法都有其各自的特殊性,因此很难将这几种方法进行简单的比较。 1、直接注射法 可将外源基因直接注射到靶位点或血管中,但此种方法不适合以肌肉作为靶器官,它的外源基因表达效率极低,仅为电穿孔法的百分之一。
知识课堂之活体电穿孔法其他活体基因导入方法的比较
活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～115μm ,这种通道
活体电穿孔法介绍
1、什么是活体电穿孔 活体电穿孔法（in vivo electroporation）是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用，并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单，在直流电场作用的瞬间，细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～115
活体电穿孔法介绍
1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～115
活体电穿孔法介绍
1、什么是活体电穿孔 活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用，并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单，在直流电场作用的瞬间，细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通
活体电穿孔法介绍-3
肝 脏由于肝脏的生理代谢十分旺盛，因此外源基因在肝脏中的表达时间往往很短暂，而且表达产物的水平也较低。为减少出血，可从小静脉注入，然后在肝脏上施加电场，能显著增强基因的表达。睾 丸相对于其他的转基因方法，活体电穿孔法可使外源基因在睾丸中产生大量和持久的表达。此外，很多研究人员希望利用活体电穿孔法将外
活体电穿孔法介绍-1
1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用，并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单，在直流电场作用的瞬间，细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～1
活体电穿孔法介绍（一）
1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～1
活体电穿孔法介绍（二）
电 压电穿孔时在能量导入一定的情况下设计施加电压的值。电压过低或过高都会影响外源基因的表达。电压过低时,无法造成细胞膜表面状态的改变,因而外源D不能进入细胞内。电压过高时,局部组织积聚过多热量,造成细胞的死亡或组织失去功能,即使外源基因导入细胞,也无法进行正常的表达。哺乳动物常用的活体电压大多为20
活体电穿孔法介绍-2
电 压电穿孔时在能量导入一定的情况下设计施加电压的值。电压过低或过高都会影响外源基因的表达。电压过低时，无法造成细胞膜表面状态的改变，因而外源D 不能进入细胞内。电压过高时，局部组织积聚过多热量，造成细胞的死亡或组织失去功能，即使外源基因导入细胞，也无法进行正常的表达。哺乳动物常用的活体电压大多
概述活体电穿孔的法的特点
活体电穿孔法基因导入和表达效率较高,它的特点主要在以下几个方面: 1、首先,靶器官的选择面广 理论上任何组织和器官都可以作为活体电穿孔的靶器官。 在用于基因治疗方面，要考虑到靶器官组织生理特性。如果所选择的局部组织细胞不能把所转移基因的表达产物分泌到外周血液循环中,则在某种意义上说已失去了
关于活体电穿孔法的基本介绍
活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～115μm ,这种通道
WJ-2005活体基因导入仪
在当今世界DNA疫苗和基因治疗的研究中，一个十分重要的技术难关是如何提高将基因导入动物活体细胞内的效率。研究和开发能将外源性DNA安全高效地导入组织细胞中的仪器是解决这个问题的关键。采用特定的电场使活体细胞处于脉冲电场之中，能显著地增强细胞膜的通透性，从而使DNA分子能大量的进入细胞内，提高DNA疫
活体电穿孔法在基因治疗方面的应用
活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用，导入动物目标组织或器官。这种方法能有效导入外源基因，可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105～115μm ,这种
活体电穿孔法的基本信息介绍
近年来活体电穿孔法用于转基因研究的报道不断增多,在基因治疗方面的优势也日趋显著,是一种很好的活体基因导入方法。 活体电穿孔法可用于检测瞬时表达系统中载体的表达状况。大量的研究表明活体电穿孔法在基因治疗方面有非常好的应用前景。因此目国内外对活体电穿孔法介导外源基因转移的研究越来越多。
概述活体电穿孔法在基因治疗方面的应用
原来在基因治疗中利用活体电穿孔法将抗体或化疗药物导入肿瘤中,促进抗体和化疗药物的运送来进行治疗,现在则以特异的外源基因替代了抗体的应用,简化操作步骤同时降低了费用。 首先,在皮肤瘤和脑瘤的治疗中,电穿孔法可有效地将药物基因导入治疗部位。电穿孔法导入人单核细胞趋化物蛋白基因到大鼠脑瘤后,该蛋白在
概述活体电穿孔法在不同组织上的应用
肌肉组织 在肌肉组织中最初进行外源基因活体导入是采用电穿孔法。选择肌肉组织作为靶组织是因为肌肉组织在体内所占比例很大,约占40 % ,而且外源基因可在肌肉中长期表达、分泌,在基因治疗中经常会用到。此外,外源基因也不会因肌细胞的分裂而丢失。 皮肤 皮肤组织相对于其他组织较难进行电穿孔法的基因
小动物活体成像系统比较
分子影像产品的研究与发展，是伴随着分子影像成像理论和成像算法的发展而逐步发展的。在荧光标记的分子成像方面，目前世界上仅有少数实验室研制成功可以对小动物进行跟踪性在体荧光断层分子影像的系统，并接连在Nature/Science上发表一系列突破性研究进展。 近年来，国外某些公司改进了现有的体外荧光成像
基因枪活体植物基因转染
本实验所用基因传递系统（基因枪）原理：低压基因递送系统（GDS-80 基因枪 U.S. Patent Number: 6,436,709 B1），根据火箭喷嘴原理和空气动力学原理设计，是用于传递生物微粒进入靶细胞的一种新型系统。如图1中所示，当左侧出现输入气体压力时（如：氦气），两个腔室之间将形成巨
活体染料
中文名称活体染料英文名称vital stain;vital dye定 义可使活细胞呈染色反应的物质。如中性红、尼罗兰。某些染色剂对细胞器染色的具有选择性，如詹纳斯绿可专一性地使线粒体着色。应用学科细胞生物学（一级学科），细胞生物学技术（二级学科）
基因电转染系统的技术革新
经过近30年的发展革新，电转染已成为基因的功能研究领域中不可或缺的技术手段。下文不仅是一篇新上市的转染仪器的介绍，更是电转染仪技术革新的介绍，因为： NEPA21高效基因转染系统 ------拥有全球领先的ZL电脉冲芯片技术和
荧光免疫法与其他方法的比较
荧光免疫法按反应体系及定量方法不同，还可进一步分做若干种。与放射免疫法相比，荧光免疫法无放射性污染，并且大多操作简便，便于推广。国外生产的TDM用试剂盒，有相当一部分即属于此类，并且还有专供TDM荧光偏振免疫分析用的自动分析仪生产。由于一般荧光测定中的成本底较高等问题，荧光免疫技术用于定量测定有一定
如何选择BTX转基因仪（电转仪）？
1、确定目标对象：也就是你所有转的目的物是什么东西？ 细胞系和细胞类型 细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等 细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato，Tr
如何选择BTX转基因仪（电转仪）？（一）
1、确定目标对象：也就是你所有转的目的物是什么东西？ 细胞系和细胞类型 细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等 细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyces Tobacco, Corn, Rice, Tomato
用CRISPR实现基因转录活体成像
最近，日本的一个研究小组开发出一种实时成像方法，用于内源基因转录活性和核定位的同步测量。研究人员用该方法来检测亚基因组范围的流动性变化，这取决于小鼠胚胎干细胞中多能性相关基因的活性。 Hiroshi Ochiai博士和他的同事Takeshi Sugawara博士、Takashi Yamamoto
活体成像概述
一、引子 自从Roentgen发现了X光的用途，动物活体成像就走进了科学家的视野。活体成像有很多种模式，除了X光的离子辐射成像，还有声音、磁铁甚至光光成像。每种都有缺点和优点，举例来说，要确定解剖结构的位置和形状，CT扫描、MRI、超声波可能是较好的选择，但涉及到肿瘤细胞的注射位置、表达层面，他们
活体染色定义
因此活染技术通常可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。根据所用染色剂的性质和染色方法的不同，通常把活体染色分为体内活染与体外活染两类。体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内，染料的胶粒固定、堆积在细胞内某些特殊结构里，达到易于识别的目的。它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小块
基因转染技术的非病毒方法运载介绍
1、化学转染法 （1）DEAE-葡聚糖和polybrene聚阳离子法：带正电的DEAE-葡聚糖或polybrene多聚体复合物和带负电的DNA分子使得DNA可以结合在细胞表面。通过使用DMSO或甘油获得的渗透休克将DNA复合体导入。DEAE－葡聚糖仅限于瞬时转染。 （2）磷酸钙共沉淀法 ：将
活体染色的定义
因此活染技术通常可用来研究生活状态下的细胞形态结构和生理、病理状态。根据所用染色剂的性质和染色方法的不同，通常把活体染色分为体内活染与体外活染两类。体内活染是以胶体状的染料溶液注入动、植物体内，染料的胶粒固定、堆积在细胞内某些特殊结构里，达到易于识别的目的。它是由活的动、植物分离出部分细胞或组织小块
植物细胞的活体染色与死活鉴定
活体染色可用于：（1）利用某些无毒或毒性很小的染料来显示细胞内某些天然结构；（2）不影响细胞的生命活动或产生任何物理、化学变化以致引起细胞的死亡。实验方法原理活体染色是利用某种对植物无害的染料溶液对活细胞进行染色的技术。中性红是常用的活体染料之一，它是一种弱碱性pH指示剂，变色范围在pH6.4-8.