实验方法原理 | 使用聚二乙醇(PEG ) 将抗原免疫过的小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(P3. 653 )进行融合。用 HAT 选择性培养基筛选杂合的克隆株(杂交瘤细胞)。融合后 10~14 天用 ELISA 对上清液进行筛査(ELISA 筛査方法必须在融合前就已掌握),然后对理想的杂交瘤细胞加以扩增、冷冻和亚克隆,以确保其单克隆特性。 |
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实验材料 | 小鼠 P3.653骨髓瘤细胞 抗原 D-PBSA SFM PEG |
试剂、试剂盒 | 佐剂 TCD(T细胞耗竭)缓冲液 抗小鼠Thyl.2抗体 使用液 家兔补体 HAT储存液 HAT培养基 SCM 8-氮杂鸟嘌呤备用液 MEM HT储存液 HT培养基 台盼蓝 |
仪器、耗材 | 注射器 组织分离器 培养皿 离心管 多孔培养瓶 Nalgene试剂瓶 吸头 盛液池 多道加样器 倒置相差显微镜 Unopette 微收集系统 血细胞计数仪 |
实验步骤 |
免疫动物 展开 |
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