流式细胞术的检测误差主要来源于哪些方面？

流式细胞术的检测误差主要来源于以下几个方面：

1. 样本制备：

• 细胞悬液的质量：如细胞团聚、碎片过多、细胞活性低等，可能导致检测结果不准确。

• 样本采集和处理过程中的操作不当：例如样本的污染、细胞的损伤等。

2. 荧光染料和抗体：

• 荧光染料的稳定性和光漂白性：可能影响荧光信号的强度和准确性。

• 抗体的特异性和亲和力：非特异性结合或亲和力不足可能导致错误的检测结果。

• 抗体的标记效率和荧光强度不一致：造成检测信号的偏差。

3. 仪器校准和设置：

• 激光光路未校准：影响散射光和荧光检测的准确性。

• 光电倍增管（PMT）电压设置不当：导致信号采集的偏差。

4. 数据分析：

• 设门策略不合理：可能错误地包含或排除目标细胞群体。

• 补偿调节不当：在多色分析中，不同荧光通道之间的串色补偿不准确会影响结果。

5. 实验操作的重复性：

• 操作人员技术水平和操作的一致性：不同人员或同一人员不同次操作的差异可能引入误差。

6. 细胞自发荧光：

• 某些细胞本身具有一定的自发荧光，可能干扰对标记荧光的检测。

7. 环境因素：

• 温度、湿度等环境条件的变化可能影响仪器的性能和试剂的稳定性。

8. 统计学因素：

• 样本量不足：可能无法准确反映总体的真实情况。