细菌赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶（LYSGINGIPAIN）活性比色法

主要用途

  细菌赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶（LYS-GINGIPAIN）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过单肽化合物底物acetyl-Lys-pNA，受到赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶的水解，释放出黄色对硝基苯胺，即采用比色法来测定样品中酶活性的*而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种牙周炎细菌裂解萃取液、培养上清、牙周缝隙液体等样品赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶的特异活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。

技术背景

牙龈卟啉菌蛋白酶（gingipain）是一种胰蛋白酶类半胱氨酸蛋白酶（cysteine proteinase），常见于细菌表面、细胞外基质囊泡内以及细菌培养上清，为膜结合型和细胞外分泌型，有2个类型：精氨酸依赖特异性（arginine specific；Rgp）和赖氨酸依赖特异性（lysine specific；Kgp）。前者有2个同工酶：RgpA和RgpB：RgpA又分成HRgpA、RgpA（cat）和mtRgpA；RgpB又分成RgpB和mtRgpB。牙龈卟啉菌蛋白酶也是一种毒力因子，为革兰氏阴性厌氧细菌牙龈卟啉单胞菌（Porphyromonas gingivalis）、等多种细菌生长提供营养，使血液凝结和纤维溶解（fibrinolytic）通路，以及免疫系统失调，激活激肽释放酶（kallikerin）和激肽（kinin）通路，调节宿主细胞因子网络，活化基质金属蛋白酶和血小板，切离层粘连蛋白（laminin）、纤连蛋白（fibronectin）、胶原蛋白等，间接促成牙周组织浸入和破坏，诱导细胞凋亡、CAM分子分解和细胞脱离（失巢凋亡anoikis），导致牙周病发生，甚至心血管疾病、风湿性关节炎和阿茨罕默症等。牙龈卟啉菌蛋白酶成为药物靶标。基于人工合成的单肽化合物底物acetyl-Lys-p-Nitroaniline；乙酰赖氨酰对硝基苯胺），受到赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶的水解，释放出黄色对硝基苯胺（405nm 波长），来定量测定赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶的特异活性。赖氨酸牙龈卟啉菌蛋白酶反应系统为：