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一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提...(一)

一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提取核酸的方法概述:木本热带植物中含有大量复杂的有机化合物,这些有机化合物会抑制提取RNA或DNA所需的化学程序,从而不利于后续研究及应用,如RNA测序和基因表达分析。为了克服这个问题,研究人员必须使用CTAB / PVP缓冲液的提取方案,而不能使用市售的DNA / RNA提取试剂盒。但是,这种提取方式耗时长、需使用有毒化学品(例如苯酚和氯仿),并且一次只能处理少量样品。为了克服这些问题,我们开发了一种基于CTAB / PVP的新方法,用于RNA或DNA提取,去掉了传统方法中的苯酚/氯仿步骤。此外,该方法同样适用于96孔深孔板,使用SPEX高通量组织研磨仪,一次研磨6块深孔板,同时处理576个样品,大大加快了处理速度。我们的新方法,能够从夏威夷果、牛油果和芒果组织中,成功提取RNA,这些组织使用传统方法很难提取到RNA。而后我们还验证了,该方法提取的RNA成功地合成cDNA......阅读全文

一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提...(一)

一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提取核酸的方法 概述: 木本热带植物中含有大量复杂的有机化合物,这些有机化合物会抑制提取RNA或DNA所需的化学程序,从而不利于后续研究及应用,如RNA测序和基因表达分析。为了克服这个问题,研究人员必须使用CTAB / PVP缓冲液的提取方案,而不能

一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提...(二)

三、结果 1、无苯酚/氯仿的CTAB / PVP / SDS-based RNA提取 在下面介绍的第一批实验中,我们开发并测试了一种使用40-60 mg牛油果、夏威夷果和芒果成熟叶片的冷冻叶组织提取RNA的方法。在发表的文献中,用于困难树种开发的大多数RNA提取方法,通过使用CTAB /

如何从组织中提取蛋白

很简单 先把组织冻到液氮里面 然后再拿出来研磨成粉 边磨要边加液氮哦 不然磨不碎 然后再按照细胞提取蛋白一样的操作 加裂解液 高温煮啊什么的 只要很小很小一块的组织就可以提出很多蛋白了 千万别搞太大了

如何从组织中提取蛋白

很简单 先把组织冻到液氮里面 然后再拿出来研磨成粉 边磨要边加液氮哦 不然磨不碎 然后再按照细胞提取蛋白一样的操作 加裂解液 高温煮啊什么的 只要很小很小一块的组织就可以提出很多蛋白了 千万别搞太大了

CsCl法从组织中提取RNA

            试剂、试剂盒 液氮 组织胍溶液 十二烷基肌氨酸钠 CsCl 组织重悬液   乙酸钠 酚

CsCl法从组织中提取RNA

试剂、试剂盒 液氮 组织胍溶液 十二烷基肌氨酸钠 CsCl 组织重悬液 乙酸钠酚 氯仿 异戊醇 异戊醇 无水乙醇 仪器、耗材 组织捣碎机 离心机 实验步骤 一 材料与设备 1)液氮 2)组织胍溶液:590.8 g 异硫氰酸胍溶于 400ulDEPC 处理的水中,加入 2

2.1.6 CsCl法从组织中提取RNA

由于一些组织(如胰脏和睥脏)含有高浓度的内源性 RNA 酶,因此纯化源于组织的 RNA 须更加小心。 试剂、试剂盒 液氮组织胍溶液十二烷基肌氨酸钠CsCl组织重悬液乙酸钠酚氯仿异戊醇异戊醇无水乙醇 仪器、耗材 组织捣碎机离心机 实验步骤 一 材料与设备 1

用于PCR的模板DNA制备实验——酚-氯仿法提取石蜡组织中DNA

模板 DNA 质量直接影响 PCR 结果,是 PCR 成功的关键之一。根据其检测对象(组织细胞材料)的不同,有不同的制备方法,常用的材料有石蜡切片、冰冻切片、血细胞、胸腹水等。 实验步骤 1. 10 mm 厚石蜡切片 10~15 张,置入消毒后的 1.5 ml Eppendorf

植物无糖组织培养技术

植物无糖组培快繁技术(Sugar-free micropropagation)又称为光自养微繁殖技术(Photoautotrophic micropropagation)是指在植物组织培养中改变碳源的种类,以CO2代替糖作为植物体的碳源,通过输入CO2气体作为碳源,并控制影响试管苗生长发育的环境因

植物无糖组织培养技术

植物无糖组培快繁技术(Sugar-free micropropagation)又称为光自养微繁殖技术(Photoautotrophic micropropagation)是指在植物组织培养中改变碳源的种类,以CO2代替糖作为植物体的碳源,通过输入CO2气体作为碳源,并控制影响试管苗生长发育的环境因子