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一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提...(二)

三、结果1、无苯酚/氯仿的CTAB / PVP / SDS-based RNA提取在下面介绍的第一批实验中,我们开发并测试了一种使用40-60 mg牛油果、夏威夷果和芒果成熟叶片的冷冻叶组织提取RNA的方法。在发表的文献中,用于困难树种开发的大多数RNA提取方法,通过使用CTAB / PVP裂解缓冲液中调高盐(NaCl)浓度,可以提高RNA产量和质量。因此,我们使用该缓冲液裂解我们的样品。大多数提取方法都使用此缓冲液来提取RNA,同时联合使用苯酚/氯仿法从蛋白质中分离出核酸。但是,我们不使用苯酚和氯仿,因为它们具有毒性,同时它们不可能在96孔板中实现高通量。因此,我们决定通过加入一定量的异丙醇,并在裂解步骤后离心样品,来得到RNA沉淀(图1)。在这个阶段,蛋白质和不需要的化合物(如多糖和多酚)会溶解在上清液中,并且很容易可以除去。用乙醇洗涤沉淀后,将核酸重悬,并进行DNase处理,然后在异丙醇中进行另一轮沉淀并洗脱以回收......阅读全文

一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提...(二)

三、结果1、无苯酚/氯仿的CTAB / PVP / SDS-based RNA提取在下面介绍的第一批实验中,我们开发并测试了一种使用40-60 mg牛油果、夏威夷果和芒果成熟叶片的冷冻叶组织提取RNA的方法。在发表的文献中,用于困难树种开发的大多数RNA提取方法,通过使用CTAB / PVP

一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提...(一)

一种无酚/无氯仿组织研磨从热带木本植物中提取核酸的方法概述:木本热带植物中含有大量复杂的有机化合物,这些有机化合物会抑制提取RNA或DNA所需的化学程序,从而不利于后续研究及应用,如RNA测序和基因表达分析。为了克服这个问题,研究人员必须使用CTAB / PVP缓冲液的提取方案,而不能使用市售的

木本植物蛋白质提取实验

实验材料树皮                                         &nb

木本植物蛋白质提取实验

实验材料 树皮试剂、试剂盒 沉淀缓冲液漂洗缓冲液溶解缓冲液仪器、耗材 离心管实验步骤 3.1 提取总蛋白质 (见注释 5)( 1 ) 将去塞的 10 ml 空离心管称重。我们选用韧性好的聚碳酸酯旋盖圆底高速离心管。( 2 ) 细胞碎裂:500 mg 新鲜组织(保存在 -

亚热带双子叶木本植物果实内部繁殖分配研究取得进展

  资源分配理论认为,在有限的资源条件下,有机体必须在生长、储存或是繁殖之间作出权衡;繁殖分配是一个物种繁殖生态对策进化的重要组成部分。果实是被子植物特有的繁殖器官,果实内部包括了果皮和种子,果皮对种子起着营养、保护和传播功能。因此,分析繁殖器官(果实)内部营养与繁殖分配格局,也是理解

木本植物蛋白质提取实验

实验材料树皮试剂、试剂盒沉淀缓冲液漂洗缓冲液溶解缓冲液仪器、耗材离心管实验步骤3.1 提取总蛋白质 (见注释 5)( 1 ) 将去塞的 10 ml 空离心管称重。我们选用韧性好的聚碳酸酯旋盖圆底高速离心管。( 2 ) 细胞碎裂:500 mg 新鲜组织(保存在 -80°C ) 在液氮中用研钵和杵捣成粉

(WPM)木本植物培养基成份表-Duchefa Biochemie

WPM培养基是1981年由Lloyd和 McCown为山月桂茎尖培养专业设计,根据MS培养基改良而来,相对MS培养基而言,使用了硫酸钾替换了硝酸钾,硝酸铵的含量也降低到了MS培养基的1/4,氮盐也主要以硝酸钙的形式供应。木本植物在维持生态平衡、荒漠土壤改造及城市居民区绿化等起着很重要的作用,随着植物

合肥研究院揭示木本植物抗逆性作用机制

  近期,中国科学院合肥物质科学研究院技术生物与农业工程研究所研究员吴丽芳课题组研究发现一种植物源新型小分子化合物卡里金(Karrikins),能够显著提高木本植物乌桕对干旱和盐碱的抗性,为开发新型作物生长调节剂提供了新思路。相关研究成果发表于植物学期刊Frontiers in Plant Scie

植物无糖组织培养技术

植物无糖组培快繁技术(Sugar-free micropropagation)又称为光自养微繁殖技术(Photoautotrophic micropropagation)是指在植物组织培养中改变碳源的种类,以CO2代替糖作为植物体的碳源,通过输入CO2气体作为碳源,并控制影响试管苗生长发育的环境因子

植物无糖组织培养技术

植物无糖组培快繁技术(Sugar-free micropropagation)又称为光自养微繁殖技术(Photoautotrophic micropropagation)是指在植物组织培养中改变碳源的种类,以CO2代替糖作为植物体的碳源,通过输入CO2气体作为碳源,并控制影响试管苗生长发育的环境因子