可溶性抗原的制备及鉴定2

1、超速离心法 此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内,达到彼此分离的目的。常用的密度梯度介质有蔗糖、甘油、CsCl等。 用超速离心或梯度密度离心分离和纯化抗原时,除个别成分外,极难将某一抗原成分分离出来,故只用于少数大分子抗原的分离,如IgM、C1q,甲状腺球蛋白等,以及一些比重较轻的抗原物质如载脂蛋白A、B等。多数的中、小分子量蛋白质采用此种方法很难纯化。 2、选择性沉淀法 其原理多根据各蛋白质理化特性的差异,采用各种沉淀剂或改变某些条件促使蛋白质抗原成分沉淀,从而达到纯化的目的。最常用的方法是盐析沉淀法。 盐析法的原理 蛋白质在水溶液中的溶解度取决于蛋白质分子表面离子周围的水分子数目,亦即主要是由蛋白质分子外周亲水基团与水形成水化膜的程度以及蛋白质分子带有电荷的情况决定的。蛋白质溶液中加入中性盐后......阅读全文

可溶性抗原的提纯和纯化

1. 超速离心法:适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原,不适用于大多数中小分子抗原。2. 选择性沉淀法:(1)核酸去除法:核糖核酸降解法更简便。(2)盐析法:常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。(3)有机溶剂沉淀法:常采用乙醇或丙酮。(4)聚合物沉淀法:常用非离子型聚合物,如聚

关于可溶性抗原的基本介绍

  在病毒的抗原抗体反应中,并不是整个的病毒粒子,而是有更小的粒子的抗原参与反应,这种更小的粒子的抗原称为可溶性抗原。例如流行性感冒感染时,细胞中可出现10纳米大小的可溶性抗原。可溶性抗原虽然是在感染过程中于细胞内产生的,但是在病毒粒子的组分中有时也包含它。

简述可溶性抗原的基本作用

  可溶性抗原(solubleantigen)存在于宿主组织或体液中游离的抗原物质。它们可能是寄生虫的代谢产物;或死亡虫体释放的体内物质;或由于寄生生活所改变的宿主物质。可溶性抗原在抗寄生方面,感染的病理学方面以及寄生虫的免疫逃避上起重要作用。  可溶性抗原是最易诱导免疫耐受的抗原。

可溶性抗原的制备及鉴定2

1、超速离心法 此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内,达到彼此分离的目的。常用的密度梯度介质有蔗糖、甘油、CsCl等。 用超速离心或梯度密度离心分离和纯化抗原时,除个别成分外,极难将某一抗原成分分离出来,故只用于少数大分子抗原的分

可溶性抗原的制备及鉴定1

蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、补体、脂多糖、细菌外毒素和核酸等均为可溶性抗原,它们有相当部分来源于组织和细胞,成分复杂。制备这类免疫原时,首先须将组织和细胞破碎,然后再从组织和细胞匀浆中提取目的蛋白或其他抗原,提纯的抗原需鉴定后才能用做免疫原。 一、组织匀浆的制备 用于制备免疫原的材料必须是新鲜或低

亲和层析实验_可溶性抗原或膜结合抗原的分离

实验材料蛋白质试剂、试剂盒TrisTSA裂解缓冲液脱氧胆酸钠洗涤缓冲液三乙醇氨缓冲液仪器、耗材层析柱离心管离心机实验步骤1.  准备一支活化后被淬灭的Sepharose预柱(5 ml 柱床)和一支Ab-Spharose免疫亲和层析柱,并将它们串联起来。2.  以冰冷TSA溶液重悬50 g 细胞至1~

可溶性抗原的提纯和纯化是什么?

  1. 超速离心法:适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原,不适用于大多数中小分子抗原。  2. 选择性沉淀法:  (1)核酸去除法:核糖核酸降解法更简便。  (2)盐析法:常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。  (3)有机溶剂沉淀法:常采用乙醇或丙酮。  (4)聚合物沉淀法:

可溶性抗原的提纯和纯化是什么?

  1. 超速离心法:适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原,不适用于大多数中小分子抗原。  2. 选择性沉淀法:  (1)核酸去除法:核糖核酸降解法更简便。  (2)盐析法:常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。  (3)有机溶剂沉淀法:常采用乙醇或丙酮。  (4)聚合物沉淀法:

抗可溶性肝抗原抗体(sla)的介绍

  抗可溶性肝抗原抗体是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清学标记,对于自身免疫性肝炎的诊断和鉴别诊断均具有重要价值。一般用间接免疫荧光法测定。间接免疫荧光法实验原理是将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗

关于抗可溶性肝抗原抗体的简介

  抗可溶性肝抗原抗体(抗-SLA抗体)是自身免疫性肝炎(AIH)的自身抗体,其靶抗原是相对分子量为50 000的一种细胞溶质分子,被称为UGA抑制物tRNA相关蛋白。抗-SLA抗体仅在AIH及AIH与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的重叠综合征患者检测阳性,在病毒性肝炎和其他肝病检测阴性,故对AIH具

可溶性抗原(soluble-antigen)的制备及鉴定

蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、补体、脂多糖、细菌外毒素和核酸等均为可溶性抗原,它们有相当部分来源于组织和细胞,成分复杂。制备这类免疫原时,首先须将组织和细胞破碎,然后再从组织和细胞匀浆中提取目的蛋白或其他抗原,提纯的抗原需鉴定后才能用做免疫原。 一、组织匀浆的制备用于制备免疫原的材料必须是新鲜或低温

简述抗可溶性肝抗原抗体的适应症

  进行抗可溶性肝抗原抗体检测的指征有:  ①黄疸、发热、皮疹、关节炎等各种全身症状。  ②肝功能异常:转氨酶和胆红素水平较高。  ③黄疸、纳差、腹胀等病毒性肝炎症状。  ④呕血和(或)黑便等失代偿期肝硬化,肝衰竭。

免疫学抗可溶性肝抗原抗体(SLA)介绍

抗可溶性肝抗原抗体是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清学标记,对于自身免疫性肝炎的诊断和鉴别诊断均具有重要价值。一般用间接免疫荧光法测定。  间接免疫荧光法实验原理:将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。  第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗

抗可溶性肝抗原抗体(sla)抽血后注意事项

  1、抽血后,需在针孔处进行局部按压3-5分钟,进行止血。注意:不要揉,以免造成皮下血肿。  2、按压时间应充分。各人的凝血时间有差异,有的人需要稍长的时间方可凝血。所以当皮肤表层看似未出血就马上停止压迫,可能会因未完全止血,而使血液渗至皮下造成青淤。因此按压时间长些,才能完全止血。如有出血倾向,

关于抗可溶性肝抗原抗体的临床意义介绍

  抗-SLA抗体是一种公认的为数不多的对AIH具有高度特异性的自身抗体,特异性甚至达到了100%。但其检出阳性率率较低.抗SLA/LP在AIH中的阳性检出率在10%~30%之间。抗-SLA仅出现在AIH以及AIH/PBC患者中。对AIH的诊断有良好的特异性。  抗-SLA抗体不但对AIH具有高度特

免疫学实验抗可溶性肝抗原抗体(SLA)介绍

  抗可溶性肝抗原抗体(SLA)介绍:  抗可溶性肝抗原抗体是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清学标记,对于自身免疫性肝炎的诊断和鉴别诊断均具有重要价值。一般用间接免疫荧光法测定。  间接免疫荧光法实验原理:将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。  第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原

抗可溶性肝抗原抗体(sla)抽血前的注意事项

  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。  3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。

免疫学抗可溶性肝抗原抗体(SLA)注意事项

一、抽血前的注意事项  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。  3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。  二、抽血后应注意  1、抽血后,需在针孔处进

小鼠免疫实验_-制备免疫脾细胞:用可溶性抗原致敏

实验材料任意品系小鼠(6~8 周)试剂、试剂盒PBS完全和不完全弗氏佐剂抗原仪器、耗材22-G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1. 准备等体积 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐剂的乳化液(200~400 μl/鼠)。用双头带塞

抗可溶性肝抗原抗体(sla)的临床意义是什么

  阳性见于自身免疫性肝病,大约25%的自身免疫性肝炎仅该项抗体阳性。

临床化学检查方法介绍抗可溶性肝抗原抗体(SLA)介绍

抗可溶性肝抗原抗体(SLA)介绍:  抗可溶性肝抗原抗体是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清学标记,对于自身免疫性肝炎的诊断和鉴别诊断均具有重要价值。一般用间接免疫荧光法测定。  间接免疫荧光法实验原理:将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。  第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本

人可溶性白细胞抗原G(sHLAG)ELISA试剂盒

人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)ELISA试剂盒  (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)   原理 本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 sHLA-G 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 sHLA-G与单抗结合,加入生物素化的抗人sHLA-G,形成免疫复合

人可溶性白细胞抗原I(sHLAI)ELISA试剂盒

人可溶性白细胞抗原I(sHLA-I)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内) 原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 sHLA-I 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 sHLA-I与单抗结合,加入生物素化的抗人sHLA-I,形成免疫复合物连接在板上,辣根

抗可溶性肝抗原抗体(sla)的注意事项及检查过程

  注意事项  一、抽血前的注意事项:  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。  3、抽血时应放松心情,避免因恐惧造成血管的收缩,增加采血的困难。  二、抽血后应注意:  1、

人可溶性白细胞抗原G(sHLAG)酶联免疫分析(ELISA)

人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)含量。实验原理:    本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人可溶性白细胞抗原G(sHLA-G)水平。用纯化

抗可溶性肝抗原抗体(sla)的临床意义及注意事项

  临床意义  阳性见于自身免疫性肝病,大约25%的自身免疫性肝炎仅该项抗体阳性。  注意事项  一、抽血前的注意事项:  1、抽血前一天不吃过于油腻、高蛋白食物,避免大量饮酒。血液中的酒精成分会直接影响检验结果。  2、体检前一天的晚八时以后,应开始禁食12小时,以免影响检测结果。  3、抽血时应

酶联免疫吸附实验——直-接-竞-争ELISA-法检测可溶性抗原

实验步骤直 接 竞 争ELISA 法检测可溶性抗原该检测方法是使用特异性抗体和毫克级纯化或半纯化抗原来定性或定量测定可溶性抗原的最有效的方法(图 1.1. 2)。用抗体替换特异性的酶标抗体,就可转为间接方法,以种属特异性或同种型特异性酶结合物作为第三种试剂即可检测结合的特异性抗体的量。附 加 材 料

抗可溶性肝抗原抗体(sla)的正常值及临床意义

  正常值  间接免疫荧光法阴性。  临床意义  阳性见于自身免疫性肝病,大约25%的自身免疫性肝炎仅该项抗体阳性。

小鼠可溶性白细胞分化抗原30配体ELISA试剂盒实验条件

小鼠可溶性白细胞分化抗原30配体ELISA试剂盒在进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括: (1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在

小鼠可溶性白细胞分化抗原30配体ELISA试剂盒实验条件

小鼠可溶性白细胞分化抗原30配体ELISA试剂盒在进行各项实验条件的选择是很重要的,其中包括: (1)固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,聚苯乙烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在