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小鼠免疫实验_制备免疫脾细胞:用可溶性抗原致敏

实验材料任意品系小鼠(6~8 周)试剂、试剂盒PBS完全和不完全弗氏佐剂抗原仪器、耗材22-G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1. 准备等体积 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐剂的乳化液(200~400 μl/鼠)。用双头带塞的连接器连接两个注射器,一个注射器装抗原,另一个装佐剂。来回推压注射器,使得其内容物从一侧到另一侧注射器,推压 5~10 min 直到得到稳定的乳化液。2. 用 22-G 的针给小鼠腹腔注射(每一个抗原 3~5 只小鼠)。3. 3 周后,用等体积的含 10~50 μg 抗原的 PBS 和不完全弗氏佐剂配制成(200~400 μl)的乳化液再次腹腔注射。4. 第二次免疫后 7 天,用无菌剪刀或剃毛刀片切掉小鼠尾巴 0.5 cm 采血。收集 100~200 μl 血装于 1.5 ml 的微量离心管。将小鼠放在产热灯下 30~60 s 保暖......阅读全文

小鼠免疫实验_ 制备免疫脾细胞:用可溶性抗原致敏

实验材料任意品系小鼠(6~8 周)试剂、试剂盒PBS完全和不完全弗氏佐剂抗原仪器、耗材22-G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1. 准备等体积 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐剂的乳化液(200~400 μl/鼠)。用双头带塞

杂交瘤细胞免疫小鼠和脾细胞的制备介绍

  免疫小鼠:取 6~8 周龄 Balb/C 雌鼠,基础免疫 2 周,静脉再加强免疫一次,3~5 天后用于融合。  脾细胞制备:  1.引颈处死小鼠,用酒精消毒表体。  2.无菌条件下取出脾脏,剃除结缔组织和脂肪,用 5ml 无血清培养液冲洗一次。  3.把脾脏置于已消毒的 90~100 目不锈钢网

小鼠免疫实验_ 用电泳分离的抗原进行免疫

实验材料任意品系小鼠6~8 周试剂、试剂盒冷的 0.1 mol L KClPBS抗原完全和不完全弗氏佐剂仪器、耗材组织研磨机22-G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1. 将含 10~50 μg 目的蛋白抗原的蛋白质混合物上样于适当的 SDS

细 胞 毒 性 T 淋 巴 细 胞 的 诱 导 及 检 测

实验步骤基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意:反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源:未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源:未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培

细胞毒性T淋巴细胞的诱导及检测

基 本 方 案 1 从 C TL 前体中诱导细胞毒性注意:反应细胞应根据抗原的种类选择是否需要进行体内致敏。材 料反应细胞来源:未致敏的或者体内致敏的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 1 和 2致敏培养基刺激细胞来源:未修饰或半抗原修饰的小鼠脾脏细胞(见辅助方案 3)R P M I -1 0 完全培养基H

间接凝集实验及致敏红细胞制备方法

将可溶性抗原吸附于一种与免疫无关的颗粒载体上,然后与相应的抗体结合,也可出现颗粒载体的凝集现象,称为间接凝集反应。间接凝集反应比直接凝集反应敏感性为高,可用于微量抗体或抗原的检查。一、 间接血球凝集实验间接血球凝集实验是根据红血球表面的吸附作用而建立起来的。将细菌可溶性抗原提出使之吸附于红血球表面,

淋巴细胞杂交瘤(hybridoma)单克隆抗体技术-1

1975年,Kohler和Milstein发现将小鼠骨髓瘤细胞和绵羊红细胞免疫的小鼠脾细胞进行融合,形成的杂交细胞既可产生抗体,又可无限增殖,从而创立了单克隆抗体杂交瘤技术。这一技术上的突破不仅为医学与生物学基础研究开创了新纪元,也为临床疾病的诊、防、治提供了新的工具。  制备单克隆抗体包括动物免疫

抗原与免疫血清的制备实验

将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。

抗原与免疫血清的制备实验

将抗原注射于动物体,可刺激动物的 B 淋巴细胞转化为浆细胞而产生特异性抗体,待动物血清中累积大量抗体时,采集其血液,分离析出血清,此即含抗体的免疫血清,或称抗血清。制备特异性强、效价高的免疫血清对于微生物的鉴定,传染病的诊断与治疗,抗原分析,免疫球蛋白的鉴定及其他蛋白质的鉴定与研究均有很大的用途。实

抗原和免疫血清的制备实验

实验材料 家兔试剂、试剂盒 普通培养基甲醛盐水石灰酸盐水生理盐水仪器、耗材 标准比浊管离心机实验步骤 1. 抗原的制备:标准菌株的选择:所用的菌种伤寒杆菌H901和伤寒杆菌O901应具有典型形态菌落及生化反应。在生理盐水中不发生自身凝集,与特异血清有高度凝集者可作为菌种。2. 菌液的制备(1)原液制