可溶性抗原(solubleantigen)的制备及鉴定

蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、补体、脂多糖、细菌外毒素和核酸等均为可溶性抗原,它们有相当部分来源于组织和细胞,成分复杂。制备这类免疫原时,首先须将组织和细胞破碎,然后再从组织和细胞匀浆中提取目的蛋白或其他抗原,提纯的抗原需鉴定后才能用做免疫原。 一、组织匀浆的制备用于制备免疫原的材料必须是新鲜或低温保存的。材料获得后立即去除包膜或结缔组织,脏器应进行灌洗,去除血管内残留的血液,用含0.5g/L NaN3的生理盐水洗去血迹及污物;在4℃水浴或冰浴中将洗净的组织剪成0.3~0.5cm3小块,加入适量生理盐水,放入用组织研磨机(OMNIBead Ruptor 24 多样品研磨珠均质仪)制成组织匀浆。组织匀浆经3000r/min离心10min后,上清液作为提取可溶性抗原的材料。上清液在提取前还必须进行离心去除细胞碎片及微小的组织。 二、细胞破碎提取细胞的可溶性抗原,需将细胞破碎。根据细胞类型不同,选择破碎的方......阅读全文

可溶性抗原(soluble-antigen)的制备及鉴定

蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、补体、脂多糖、细菌外毒素和核酸等均为可溶性抗原,它们有相当部分来源于组织和细胞,成分复杂。制备这类免疫原时,首先须将组织和细胞破碎,然后再从组织和细胞匀浆中提取目的蛋白或其他抗原,提纯的抗原需鉴定后才能用做免疫原。 一、组织匀浆的制备用于制备免疫原的材料必须是新鲜或低温

可溶性抗原的制备及鉴定2

1、超速离心法 此法分离和纯化抗原的原理是利用各颗粒在梯度液中沉降速度的不同,使具有不同沉降速度的颗粒处于不同密度梯度层内,达到彼此分离的目的。常用的密度梯度介质有蔗糖、甘油、CsCl等。 用超速离心或梯度密度离心分离和纯化抗原时,除个别成分外,极难将某一抗原成分分离出来,故只用于少数大分子抗原的分

可溶性抗原的制备及鉴定1

蛋白质、糖蛋白、脂蛋白、酶类、补体、脂多糖、细菌外毒素和核酸等均为可溶性抗原,它们有相当部分来源于组织和细胞,成分复杂。制备这类免疫原时,首先须将组织和细胞破碎,然后再从组织和细胞匀浆中提取目的蛋白或其他抗原,提纯的抗原需鉴定后才能用做免疫原。 一、组织匀浆的制备 用于制备免疫原的材料必须是新鲜或低

什么是抗原(Antigen)-?

凡能刺激机体产生抗体,并能与抗体发生特异性结合的物质称为抗原。物质所具有的这种特性称为抗原性。抗原的物质可以是机体自身的成分如蛋白、酶、多肽或者多糖。也有外来的抗原(如病毒、污染物)。 抗原的特异性:各种抗原物质的化学组成虽然很复杂,但能刺激机体产生抗体并与抗体反应相结合的化学组成,仅仅是抗原物质表

癌胚抗原(Carcinombryonic-antigen-,CEA)

自1965年Gotel等从结肠癌分离出一种肿瘤的相关抗原后,经过进一步的研究后发现,它存在于胎儿的肠里,由于人们将其称为癌胚抗原。在实际应用 中,CEA是一种广谱的标记物。经实验证明,它对胃癌,肠癌,肺癌,乳腺癌,胰腺癌,子宫颈癌,子宫体腺癌,卵巢癌,皮肤鳞状细胞癌,膀胱移行上皮癌,食 道癌

创伤弧菌的制备及鉴定

创伤弧菌属革兰氏阴性弧菌。在液体培养基中菌体大小为0.7*2-3μm,稍弯曲。在固体培养基中呈多样性。有极端单鞭毛。培养特性:营养要求一般,最适生长温度为30℃,兼性厌氧。在无NaCl及超过8%NaCl的培养基中不生长,可在0.5%NaCl及3%NaCl的蛋白胨水中生长,在含6%NaCl的蛋白胨水中

创伤弧菌的制备及鉴定

   创伤弧菌属革兰氏阴性弧菌。在液体培养基中菌体大小为0.7*2-3μm,稍弯曲。在固体培养基中呈多样性。有极端单鞭毛。培养特性:营养要求一般,最适生长温度为30℃,兼性厌氧。在无NaCl及超过8%NaCl的培养基中不生长,可在0.5%NaCl及3%NaCl的蛋白胨水中生长,在含6%NaCl的蛋白

小鼠免疫实验_-制备免疫脾细胞:用可溶性抗原致敏

实验材料任意品系小鼠(6~8 周)试剂、试剂盒PBS完全和不完全弗氏佐剂抗原仪器、耗材22-G 注射针头带塞的 3 ml 注射器双头带塞的连接器无菌剪刀剃须刀片解剖刀片木制涂棒实验步骤1. 准备等体积 PBS 含 25~100 μg 抗原和弗氏完全佐剂的乳化液(200~400 μl/鼠)。用双头带塞

抗原制备

不管是制备单抗还是多抗,抗原的设计与制备都是一个非常重要的问题,设计或者制备得不好的抗原有可能完全不能免疫出抗体来。一个良好的抗原必须具体的条件:(1)分子足够大。对于多肽或蛋白质类的抗原来说,一个抗原决定簇(又叫表位,epitope),通常由6-8个氨基酸残基组成。而平均每5-10kD才有一个表位

Antigen-Retrieval

实验概要Formalin fixed paraffin embedded tissue is a very common preparation for a wide variety of tissue types used in immunohistochemistry. Unfortun

Antigen-Retrieval

实验概要Formalin  fixed paraffin embedded tissue is a very common preparation for a wide  variety of tissue types used in immunohistochemistry. Unfortunat

关于可溶性抗原的基本介绍

  在病毒的抗原抗体反应中,并不是整个的病毒粒子,而是有更小的粒子的抗原参与反应,这种更小的粒子的抗原称为可溶性抗原。例如流行性感冒感染时,细胞中可出现10纳米大小的可溶性抗原。可溶性抗原虽然是在感染过程中于细胞内产生的,但是在病毒粒子的组分中有时也包含它。

简述可溶性抗原的基本作用

  可溶性抗原(solubleantigen)存在于宿主组织或体液中游离的抗原物质。它们可能是寄生虫的代谢产物;或死亡虫体释放的体内物质;或由于寄生生活所改变的宿主物质。可溶性抗原在抗寄生方面,感染的病理学方面以及寄生虫的免疫逃避上起重要作用。  可溶性抗原是最易诱导免疫耐受的抗原。

可溶性抗原的提纯和纯化

1. 超速离心法:适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原,不适用于大多数中小分子抗原。2. 选择性沉淀法:(1)核酸去除法:核糖核酸降解法更简便。(2)盐析法:常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。(3)有机溶剂沉淀法:常采用乙醇或丙酮。(4)聚合物沉淀法:常用非离子型聚合物,如聚

抗原的制备1

抗原的制备  除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。  一、抗原的提取 

抗原的制备方法

实验概要除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。实验步骤一、抗原的提取  

抗原的制备2

 2.核酸的分离纯化  从细胞中提取核酸后,仍混杂着蛋白质、多糖和各种大小分子核酸同类物。除去这些“杂质”的过程,也就是核酸提纯过程。在核酸的分离纯化时,为防止核酸大分子的变性降解,必须在0~4℃的低温条件下操作。核酸酶的水解作用,是过去制备具有活性核酸大分子的严重障碍,现普遍采用加入去污剂或加入E

抗原的制备方法

实验步骤一、抗原的提取抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中,如

抗原的制备方法

抗原的制备  除完整的细胞可作为抗原外,各种不同的细胞内存在的各种分子量不同的物质,也都具有全抗原或半抗原的性质,某种抗原物质可能是某一类细胞所特有的,可作为这种细胞的一个标志。由于细胞存在着许多性质不同的抗原物质,有时要从这众多的物质中提取、纯化某种抗原物质,以供科学研究之用。  一、抗原的提取 

抗原的制备方法

实验步骤一、抗原的提取  抗原的制备是一件十分细致的工作,要制备一个高纯度的抗原,需要付出艰巨的努力,制备工作涉及物理学、化学和生理学等许多领域的知识。根据物理或化学特性建立起来的分离、纯化方法的主要原理不外乎科二个方面:①利用混合物中几个组分分配率的差别将他们分配到可用机械方法分离的两或几个物相中

自身免疫性肝病抗体测定的简介

  自身免疫性肝病抗体测定:包含抗线粒体抗体2型抗体IgG、抗肝肾微粒体抗体-1型抗体、抗可溶性肝抗原/肝胰抗原抗体、抗平滑肌抗体、抗核抗体检测、抗线粒体抗体、抗肝细胞胞质Ⅰ型抗原抗体。  自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis,AIH)是一种病因不明的肝脏慢性炎症,与自身免疫反应

Antigen-Processing-and-Presentation

Invariant chain (Ii) associates with newly synthesized class II molecules in the endoplasmic reticulum (ER), an interaction that has been shown to int

亲和层析实验_可溶性抗原或膜结合抗原的分离

实验材料蛋白质试剂、试剂盒TrisTSA裂解缓冲液脱氧胆酸钠洗涤缓冲液三乙醇氨缓冲液仪器、耗材层析柱离心管离心机实验步骤1.  准备一支活化后被淬灭的Sepharose预柱(5 ml 柱床)和一支Ab-Spharose免疫亲和层析柱,并将它们串联起来。2.  以冰冷TSA溶液重悬50 g 细胞至1~

免疫核糖核酸的制备及鉴定实验

实验概要本实验通过免疫动物,制备了免疫核糖核酸(iRNA),并进行了鉴定。实验原理iRNA是用某种抗原免疫动物后,从免疫动物的免疫活性细胞中提取出来的RNA。它具有传递相应抗原特异性免疫信息的能力,因而注入体内后,可发挥对该抗原的免疫清除作用。iRNA的免疫学作用机理目前尚无定论,一般认为iRNA具

免疫核糖核酸的制备及鉴定实验

实验概要本实验通过免疫动物,制备了免疫核糖核酸(iRNA),并进行了鉴定。实验原理iRNA是用某种抗原免疫动物后,从免疫动物的免疫活性细胞中提取出来的RNA。它具有传递相应抗原特异性免疫信息的能力,因而注入体内后,可发挥对该抗原的免疫清除作用。iRNA的免疫学作用机理目前尚无定论,一般认为iRNA具

抗原的制备方法2

表2-1 室温下由S1提高到S2时每升加固体硫酸铵的克数  0.10 0.20 0.25 0.30 0.35 0.40 0.45 0.50 0.55 0.60 0.65 0.70 0.75 0.80 0.85 0.90 0.95 1.00 0 55 113 114 175 209 242 278 3

可溶性抗原的提纯和纯化是什么?

  1. 超速离心法:适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原,不适用于大多数中小分子抗原。  2. 选择性沉淀法:  (1)核酸去除法:核糖核酸降解法更简便。  (2)盐析法:常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。  (3)有机溶剂沉淀法:常采用乙醇或丙酮。  (4)聚合物沉淀法:

可溶性抗原的提纯和纯化是什么?

  1. 超速离心法:适用于少数大分子抗原或比重较轻的抗原,不适用于大多数中小分子抗原。  2. 选择性沉淀法:  (1)核酸去除法:核糖核酸降解法更简便。  (2)盐析法:常采用硫酸铵使蛋白抗原进行粗筛、提取丙种球蛋白及抗原浓缩。  (3)有机溶剂沉淀法:常采用乙醇或丙酮。  (4)聚合物沉淀法:

关于抗可溶性肝抗原抗体的简介

  抗可溶性肝抗原抗体(抗-SLA抗体)是自身免疫性肝炎(AIH)的自身抗体,其靶抗原是相对分子量为50 000的一种细胞溶质分子,被称为UGA抑制物tRNA相关蛋白。抗-SLA抗体仅在AIH及AIH与原发性胆汁性肝硬化(PBC)的重叠综合征患者检测阳性,在病毒性肝炎和其他肝病检测阴性,故对AIH具

抗可溶性肝抗原抗体(sla)的介绍

  抗可溶性肝抗原抗体是自身免疫性肝炎Ⅲ型的血清学标记,对于自身免疫性肝炎的诊断和鉴别诊断均具有重要价值。一般用间接免疫荧光法测定。间接免疫荧光法实验原理是将荧光素标记在相应的抗体上,直接与相应抗原反应。第一步,用未知未标记的抗体(待检标本)加到已知抗原标本上,在湿盒中37℃保温30min,使抗原抗