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PRIMO冷冻电镜在标准化细胞观察的应用(一)

(一) 总述:冷冻电镜( Cryo-EM)是观察细胞内分子构造的有力工具。然而,用冷冻电镜观察细胞样本是具有挑战性的,细胞经常粘附在金属网格框架上,影响最终的成像质量。用法国 Alveole 公司的 PRIMO“定制化细胞微环境制备系统”,其无掩模、非接触式的微图案( micropatterning)功能能为您的 TEM( Transmission Electron Microscopy,透射电子显微术)和 cryo-ET( Cryogenic Electron Tomography,冷冻电子扫描断层成像术)实验提供更好的细胞样本【 1】 :( 1) 自动化细胞定位: 在电镜网格( EM grids)的网眼( mesh)中央进行精准的自动化细胞定位;( 2) 标准化细胞模型: 微图案化设计可重复,可进行力学生物学研究;( 3) 电镜网格表面无损伤: 微图案化为非接触式 UV 投射,可保护电镜网格的表面完整性。(二) 自动化细胞定......阅读全文

PRIMO冷冻电镜在标准化细胞观察的应用(一)

(一) 总述:冷冻电镜( Cryo-EM)是观察细胞内分子构造的有力工具。然而,用冷冻电镜观察细胞样本是具有挑战性的,细胞经常粘附在金属网格框架上,影响最终的成像质量。用法国 Alveole 公司的 PRIMO“定制化细胞微环境制备系统”,其无掩模、非接触式的微图案( micropatterning

PRIMO冷冻电镜在标准化细胞观察的应用(二)

图 4. ( j-k 图):冷冻电镜图像:分别是(图 3, h 图)中 P1 和 P2 两个位置的断层扫描切片。根据十字弓形状的 RPE1 细胞的肌动蛋白图谱( actin map),在预期的位置发现了大致等同于肌动蛋白横向弧( actin transverse arcs)(与细胞边缘平行但有一定距

冷冻电镜结合 Nanodisc在膜蛋白研究的应用(一)

细胞生物膜所含的蛋白称为膜蛋白,其参与和行使了众多细胞功能,包括细胞与外界进行物质运输、信息传递、能量交换等。膜蛋白担任了各种神经信号分子、激素和其他底物的受体,构成了各种离子跨膜的通道,以及构成各类转运蛋白。在人体蛋白中,有大约 30% 是膜蛋白。FDA 批准的新药中,绝大多数都以膜蛋白为靶点

冷冻电镜的当今应用

从高中生物课本中,我们了解到,蛋白质是由多种氨基酸通过脱水缩合构成的具有复杂空间结构的生物大分子。每一种氨基酸,都因由其R基的不同,从而有了不同的空间结构。科学家们就可以观测这种空间结构,从而确定该位置上氨基酸的种类。蛋白质的复杂结构普通的荧光显微镜下,我们只能观察到蛋白质的粗略影像。而通过冷冻电镜

冷冻电镜

说起冷冻电镜,小编想不管是研究生还是教授大咖,可能和科研有那么一丁点联系的人对这个名字都不会陌生,因为它实在太出名了!基于冷冻电镜产出的科研成果很多都发表在Nature、Science、Cell等顶刊上(羡慕脸),堪称NSC神器。冷冻电镜技术的发展直接带动了生命科学领域,特别是结构生物学的飞速发展,

冷冻电镜样品冷冻

样品冷冻样品冷冻其实是科学家们很早就想到的思路,但是冷冻之后样品中水分子形成冰晶,不仅产生强烈电子衍射掩盖样品信号,还会改变样品结构。直到1974年,Kenneth A. Taylor和Robert M. Glaeser在-120℃观察含水生物样品时未发现冰晶形成,而且发现冷冻样品能够耐受更大剂量和

冷冻电镜细胞结构和分子在细胞内的分布

细胞结构和分子在细胞内的分布:从部分到整体电镜可以用来做断层成像(cryogenic computed tomography,cryo-CT),应用于亚细胞层面的研究,比如细胞器的结构,蛋白质分子的分布,以及一些细胞骨架的构成。与超低温样品操作结合,cryo-CT 可以提供更高分辨率的信息,衔接分子

冷冻电镜的发展

  细胞里面的生命活动井然有序,每一个部分都有其特定的结构,承担不同的功能。生物大分子则是一切生命活动的最终执行者,它们主要是核酸和蛋白。核酸携带了生命体的遗传信息,而蛋白是生命活动的主要执行者。自现代分子生物学诞生以来的半个世纪里,解析和分析生物大分子的结构、进而阐释其功能机制一直都是现代生命科学

冷冻电镜的原理

冷冻电镜是用于扫描电镜的超低温冷冻制样及传输技术,可实现直接观察液体、半液体及对电子束敏感的样品,如生物、高分子材料等。样品经过超低温冷冻、断裂、镀膜制样(喷金/喷碳)等处理后,通过冷冻传输系统放入电镜内的冷台(温度可至-185℃)即可进行观察。冷冻电镜中的冷冻技术可以瞬间冷冻样品,并在冷冻状态下保

冷冻电镜结合 Nanodisc在膜蛋白研究的应用(二)

将膜蛋白组装到 Nanodiscs 中主要有两种方法。第一:组装溶解在去污剂中的膜蛋白在去污剂存在条件下将膜蛋白纯化,然后再添加 MSPs 和磷脂。含有膜蛋白的 Nanodiscs 能够自发地组装,在去除掉表面活性剂后可以通过凝胶过滤(排阻层析)等方式来纯化。第二:Nanodiscs 与无细胞表达体