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小鼠胚成纤维细胞的培养和体外分化

原代MEF的分离和冻存 MEF滋养板的制备 实验材料 母鼠 试剂、试剂盒 PBS 胰蛋白酶溶液 DNase 溶液 仪器、耗材 无菌解剖器械 不锈钢滤网 烧瓶 培养箱 实验步骤 1. 准备下列试剂和材料:确定怀孕期的母鼠(孕期1......阅读全文

如何选购合适的培养箱运用于小鼠培养

实验室做小鼠培养的实验非常多,那么如何选购一款合适的培养箱用于小鼠的培养。小鼠培养箱的话肯定是在不同的温度范围,那么就要选购带有低温的培养箱,一般温度范围为0~50℃的培养箱居多,还需要培养的湿度环境,以50~95%为主;其次确定培养箱的容量需要多大,做小鼠的话肯定是一个箱体放多个小笼,一般常规的1

Cell子刊:肠道菌群失衡和衰老如何相互加剧?

  最近,加拿大麦克马斯特大学(McMaster University)的科学家们发现,肠道微生物在小鼠体内可引起衰老相关炎症和过早死亡。老年小鼠肠道微生物组成失衡(dysbiosis)可能导致肠道渗漏,向体内释放引发炎症的细菌产物,进而损害免疫功能和减少寿命。这项发表在《细胞》子刊《Cell Ho

研究人员在体外重构小鼠“人工胰岛”

  近日,中国科学院分子细胞科学卓越创新中心曾艺研究组在实验小鼠中开展实验,成功鉴定了小鼠胰岛中的干细胞类群,并借助干细胞体外培养的方法,获得了有功能的小鼠“人工胰岛”( 胰岛类器官),为下一步人体“人工胰岛”的研究提供了理论依据和技术支持。该研究成果于北京时间3月19日发表于《细胞》。  糖尿病是

肠道微生物ELISA试剂盒调控外周淋巴结发育

ELISA试剂盒血液中的淋巴细胞通过高内皮静脉(high endothelialvenules,HEVs)进入淋巴结中。这一过程首先是由一些地址素(addressin)的引导,其中包括a4b7的受体MadCAM-1以及CD62L的受体PNAd。在刚出生的小鼠中,MAdCAM-1的表达量较高

小鼠α甘露糖苷酶(α Manase)ELISA Kit

  武汉赛默飞生命科技有限公司成立于2019年,注册资金100万元,公司办公场所坐落武汉光谷生物城。赛默飞生命致力于为行业内的客户提供技术开发、技术咨询、技术转让等服务,秉承着“我们用心 客户省心”的服务理念打造出一支敢于创新、敢于挑战的综合服务团队。   赛默飞生命主营业务:小鼠α甘露糖苷酶(α

为何说肠道微生物是人类的“健康保护伞”?

  近年来大量的研究表明肠道微生物对于机体健康的维持具有重要的作用,包括营养的摄取,免疫系统的正常功能以及代谢稳态的维持。作为基础医学最热门的领域之一,肠道微生物与人体健康之间的关系的研究也层出不穷。在此,我们简要梳理一下近一段时间来有关这一领域的研究进展,希望大家喜欢!  1. Science子刊

小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)的培养(四)

3. BMDC的完全成熟注:步骤2中获得的BMDC并非完全成熟的DC,若想得到完成成熟的DC,还需LPS,CD40L或TNF-a等的诱导。3.1 步骤2.4或2.9中获得的BMDC以1200rpm离心5 min,弃上清;3.2 用含重组小鼠GM-CSF(20ng/ml)和IL-4(10ng/ml)的

喝酒脸红的人 更有可能患上痴呆?

  12月12日,发表在《Acta Neuropathologica Communications》上的一篇新研究中,美国斯坦福大学医学院的研究人员表明,参与酒精代谢的一种关键酶的常见突变会增加阿尔茨海默症患者和小鼠细胞的损伤。  乙醛脱氢酶2(ALDH2)的这种突变与饮酒后面部发红有关。它会导致酶

喝酒脸红的人 更有可能患上痴呆?

  12月12日,发表在《Acta Neuropathologica Communications》上的一篇新研究中,美国斯坦福大学医学院的研究人员表明,参与酒精代谢的一种关键酶的常见突变会增加阿尔茨海默症患者和小鼠细胞的损伤。  乙醛脱氢酶2(ALDH2)的这种突变与饮酒后面部发红有关。它会导致酶

小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)的培养(三)

【经典的BMDC培养法】-Inaba法(改良)[3,10]¾ 背景:1.  Inaba法获得的BMDC数目为5-7 x 106个/小鼠;2.  Inaba原法操作比较复杂,需要将骨髓中的淋巴细胞等用抗体+补体法预先去除, 后来的改良法均省却了这个步骤,其实Inaba后来自己也说这

上海生科院揭示自噬调控神经元轴突发育新机制

  8月19日,国际细胞自噬领域的核心期刊《自噬》在线发表了题为《Mir505-3p通过调控Atg12及自噬通路以影响神经元轴突发育》的研究论文。该研究由东华大学化工生物学院周宇荀团队与中国科学院上海生命科学院神经科学研究所、脑科学与智能技术卓越创新中心仇子龙研究组合作完成。该研究利用CRISPR/

流式细胞仪实验方法-1

流式细胞仪实验方法 一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.C

流式细胞仪实验方法

一、 实验准备1.   标本制备:2.   zui小化非特异性结合: 二、凋亡1.凋亡的检测方法:网站和其它2.PI染色法3.Annexin V 法4.TUNNEL法 三、细胞因子1.激活的细胞因子2.CBA 四、血小板

曾艺研究组发现小鼠胰岛成体干细胞身份

  北京时间3月19日,中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)曾艺研究组的文章“Long-term expansion of pancreatic islet organoids from resident Procr+ progenitors”在国际学术期刊《细胞》(Ce

peprotech细胞因子注意事项(三)

五、细胞培养和刺激的基本方法细胞活化的最终结果是产生细胞因子,根据检测指标和标本的不同,研究人员需要选择不同的刺激剂和刺激时间,以获得最佳的实验结果。下表提供了检测一些常用细胞因子的推荐的活化方法。表1、细胞内细胞因子流式检测推荐的阳性对照活化方法检测细胞因子阳性对照刺激方法人IFN-g方法2 (4

日本研究人员培养出类胰岛组织

  日本横滨市立大学的研究小组日前宣布,他们通过在模拟微重力环境下培养胰腺β细胞,最终制造出具有立体结构的类胰岛组织。   研究人员介绍说,如果在培养皿中培养胰腺β细胞,只能形成平面组织,制造胰岛素的能力很低,而他们通过旋转盛有培养液的容器,让容器内部出现微重力环境,并在这种环境下培养小鼠的胰腺β

猴子一生中“最重要时刻”首次体外重现

  英国著名发育生物学家路易斯·沃伯特曾说:“人一生最重要的时刻不是出生、结婚和死亡,而是原肠运动。”  来自中国科学院动物研究所等单位的研究人员,借助该团队深耕多年建立的非人灵长类动物胚胎体外培养系统,将食蟹猴囊胚体外培养至原肠运动出现,并进一步发育至受精后20天,体外重现非人灵长类动物胚胎原肠运

流式细胞仪实验方法(三)

四、所需试剂1、细胞表面染色的荧光标记的单抗试剂依据实验需要选择特殊表面标志CD45圈定所有淋巴细胞CD3 圈定T淋巴细胞CD4 圈定T辅助淋巴细胞亚群CD8 圈定T抑制淋巴细胞亚群CD19/或CD20圈定B淋巴细胞CD56圈定NK淋巴细胞CD14圈定单核细胞2、荧光标记的细胞因子抗体:R&

胰岛类器官体外长期扩增培养体系建立

  糖尿病是由遗传因素和环境因素长期共同作用导致的一种慢性、全身性代谢疾病。近年来,胰岛移植作为新兴的糖尿病治疗方法取得了一定的成功。但供体胰岛的严重不足极大限制了这种方法的普及。如何打破供体的局限,获得可用于移植的功能性胰岛β细胞,一直是糖尿病治疗领域的巨大挑战。  细胞生物学国家重点实验室的研究

我国研究人员建立了胰岛类器官体外长期扩增培养体系

  糖尿病是由遗传因素和环境因素长期共同作用导致的一种慢性、全身性代谢疾病。近年来,胰岛移植作为新兴的糖尿病治疗方法取得了一定的成功。但供体胰岛的严重不足极大限制了这种方法的普及。如何打破供体的局限,获得可用于移植的功能性胰岛β细胞,一直是糖尿病治疗领域的巨大挑战。  细胞生物学国家重点实验室的研究

详解单克隆抗体的制备过程

 单克隆技术又名杂交瘤技术。由G.KÖhler和Milstein1975年创立。主要原理是利用产生抗体的B细胞与肿瘤细胞杂交融合成杂交瘤细胞,生产抗体。 单克隆抗体的制备过程主要有以下六个环节,具体为抗原指标、免疫动物选择、免疫程序的确定、免疫、细胞杂交与选择培养。下面详细介绍单

胚胎干细胞培养有新法 软凝胶基质代替硬培养皿

  据美国每日科学网12月19日报道,美国研究人员发现,利用软凝胶基质代替硬培养皿来培养小鼠胚胎干细胞,无需添加昂贵的生长因子,便可让干细胞培养物长时间维持同质的多能状态。研究人员表示,这一技术在未来的再生医学中有着巨大的应用前景。相关论文发表在《公共科学图书馆・综合》杂志上。  干

软凝胶基质代替硬培养皿成为干细胞培养新方法

  据美国每日科学网12月19日报道,美国研究人员发现,利用软凝胶基质代替硬培养皿来培养小鼠胚胎干细胞,无需添加昂贵的生长因子,便可让干细胞培养物长时间维持同质的多能状态。研究人员表示,这一技术在未来的再生医学中有着巨大的应用前景。相关论文发表在《公共科学图书馆·综合》杂志上。  

小鼠骨髓来源树突状细胞(BMDC)的培养(二)

1. 这些工作均是在 Ralph M.Steinman的参与下完成的;2. Inaba培养的BMDC来源于小鼠股骨和胫骨中的骨髓;3. Inaba先用抗体+补体法去除骨髓中的淋巴细胞,以防淋巴细胞对BMDC培养的影响;4. 在诱导分化过程中,为防止粒细胞的干扰,Inaba通过每2天轻摇培养板并3/4

平滑肌细胞培养方法-2

1 材料与方法1.1 材料 9~12d新生健康清洁级KM小鼠,雌雄不限,购自重庆医科大学实验动物中心。RPMI-1640干粉培养基,D-Hanks粉,标准胎牛血清,胰蛋白酶粉(1∶250)均购自Hy-Clone公司;青霉素钠、硫酸链霉素购自华北制药厂;鼠抗兔平滑肌α肌动蛋白单克隆抗体,购自Zymed

干细胞培养基的使用

研究背景:小鼠骨髓间充质干细胞的目前干细胞培养难点。小鼠的骨髓基质细胞成分复杂,间充质干细胞比率低,分离培养有一定的难度。广东医学院的博士研究生陈博士在培养过程中就遇到该问题。他曾成功饲养成人和大鼠骨髓间充质干细胞。但新近培养的小鼠间充质干细胞状态就很差。按照自己的分析:细胞培养操作没有问题,培养条

吃香蕉吗?—饮食中的钾离子调控动脉钙

   2017年10月9日 讯 /生物谷BIOON/ --富含钾离子的食物,例如香蕉与牛油果等,能够帮助机体抵抗心血管钙化的风险,也就是所谓的血管硬化。  最近,来自阿拉巴马大学伯明翰分校的研究者们首次发现,降低饮食中的钾离子会导致小鼠动脉硬度的上升。人类患者中动脉硬度的变化则预

人用单克隆抗体质量控制技术指导原则-2

3、特异性 测定单抗对靶抗原的特异性;对多株单抗识别的抗原决定簇进行相关性分析。 4、交叉反应 按附录要求。 免疫组织化学法测定单抗与人体组织交叉反应,用冰冻及石蜡包埋的各种正常脏器组织测定。来源于肿瘤相关抗原的单抗应进行与各种肿瘤组织的交叉反应试验。&nbs

微流控芯片模拟体内受精的模型构建

微流控芯片:又被称作芯片实验室,是将传统的化学技术和生物技术结合,并将所有基本操作单元微缩集成在一块芯片上以自动完成全过程的一项新技术,它在生物、化学、医学等领域都有巨大潜力,目前广泛运用于各行各业。输卵管:女性生殖系统的重要组成部分,体内受精及早期胚胎培养的场所,胚胎在输卵管壶腹部和峡部交界处完成

个别组织细胞的培养

体内组织细胞在体外培养时,所需培养环境基本相似,但由于物种、个体遗传背景及所处发育阶段等的不同,各自要求条件有一定差别,所采取的培养技术措施亦不尽相同,现介绍个别组织细胞培养的要点如下:一、上皮细胞培养上皮细胞包括腺上皮是很多器官如肝、胰、乳腺等的功能成分,又由于癌起源于上皮组织,故上皮细胞培养特别