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干细胞培养基的使用

研究背景:小鼠骨髓间充质干细胞的目前干细胞培养难点。小鼠的骨髓基质细胞成分复杂,间充质干细胞比率低,分离培养有一定的难度。广东医学院的博士研究生陈博士在培养过程中就遇到该问题。他曾成功饲养成人和大鼠骨髓间充质干细胞。但新近培养的小鼠间充质干细胞状态就很差。按照自己的分析:细胞培养操作没有问题,培养条件也不错,试剂来源可靠。问题应该出现在培养基配方上。陈博士以原来的骨髓间充质干细胞培养基为基础,按照导师的提点,修改了配方,但细胞不好不坏。为此他做了两次正交,结果缺总不理想,细胞状态并不稳定。陈博士为此焦头烂额,担心下一步的实验无法进行。经朋友介绍找到百恩维公司的技术支持。 解决方案:百恩维的干细胞技术专家了解了陈博士的情况,培养技术、取材和试剂来源等,觉得不存在大问题;问题主要的原因是培养基的成分配比。建议陈博士重新配制培养基或使用现成的完全培养基。陈博士为了加快实验进度,直接选用了百恩维小鼠骨髓间充质干细胞培养基。&n......阅读全文

MSC无血清培养基与血清培养基有何区别?

在描述产品区别之前,先简单描述下间充质干细胞无血清培养基。间充质干细胞无血清培养基是怎么开发出来的?研发人员根据近几十年来,中国及国外的科研人员在间充质干细胞研究方面取得的一些成果,比如什么样的物质可以很好的促进干细胞生长,什么样的物质可以抑制间充质干细胞的分化,什么样的物质有更好的贴壁效果等等。在

《干细胞制剂制备质量管理自律规范》正式发布

  10月25日,中国医药生物技术协会发布了《干细胞制剂制备质量管理自律规范》的公告,公告显示,《规范》是参照《药品生产质量管理规范》(GMP)、《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则(试行)》和《干细胞临床研究管理办法(试行)》等规定,经业内骨干企业及专家的研讨,为规范我国干细胞制剂制备,加强质

小鼠胚胎干细胞培养实验步骤

1、一般培养——保持胚胎干细胞处于未分化状态 培养基细胞复苏冻存细胞明胶包被细胞传代 2 、体外分化 培养基:包被有多聚鸟氨酸/纤维结合蛋白的培养板(使用或不使用盖玻片) 体外分化方法 注:以下培养针对于小鼠的R1胚胎干细胞系,其它胚胎干细胞的培养可

如何成为细胞培养大神?

问世间谁人无忧,唯神仙逍遥自在。作为一名终日泡在实验室的实验君,如何在细胞实验中无所不能,超脱轮回做到一个人人羡慕的细胞大神呢?且看向这里,成为细胞大神的六个细节。 1. 过滤体系  自从出现瓶装培养基之后,培养基过滤的需求就减少了。有些时候,一些特定细胞培养

如何成为细胞培养大神?

  问世间谁人无忧,唯神仙逍遥自在。  作为一名终日泡在实验室的实验君,  如何在细胞实验中无所不能,超脱轮回  做到一个人人羡慕的细胞大神呢?  且看向这里,成为细胞大神的六个细节。  1. 过滤体系   自从出现瓶装培养基之后,培养基过滤的需求就减少了。有些时候,一些特定细胞培养支持物的添加可能

从标准化、规模化、产业化谈细胞治疗

  1、什么是细胞治疗?  细胞治疗是指将正常或生物工程改造过的人体细胞移植或输入患者体内,新输入的细胞可以替代受损细胞、或者具有更强的免疫杀伤功能,从而达到治疗疾病的目的。细胞治疗在治疗癌症、血液病、心血管病、糖尿病、老年痴呆症等方面显示出越来越高的应用价值。一般来讲,细胞治疗包括肿瘤细胞免疫治疗

多能干细胞(ES/iPS)冻存和复苏方法

多能干细胞(ES/iPS)冻存是干细胞扩增传代过程中重要的一环,但是多能干细胞不同于普通细胞系,其增殖扩增过程中需要聚团生长,为保持其细胞活性,不建议单细胞传代。而且使用血清+DMSO冻存方法,不能很好的保持细胞活性,且复苏细胞成活率较低。本文就重点介绍多能干细胞进行冻存以及解冻的标准化步骤。介绍使

细胞冻存技术介绍

细胞冻存技术实验室低温保存设备包括:液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低温保存箱、-86℃超低温冰箱、程控降温仪、低温冰箱(-20℃、-30℃、-40℃)、药品保存箱、疫苗保存箱、血库冰箱、层析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。检验冰箱可靠性和制冷能力的方法:1、常规冰箱放置温度计;2、超低温冰

血清替代品:XerumFree XF205培养基添加物使用说明(三)

重点注意事项:--XerumFreeTM不含任何的生长因子,因此也不含有bFGF和胰岛素。培养干细胞时我们建议添加bFGF或胰岛素或IGF。--XerumFreeTM不含硒,培养干细胞时我们建议用含有硒的培养基。2.2.2  hESCs 和hiPSCs的无饲养层培养按照上面的包被步骤在含有

如何高效培养人类多能干细胞

人类多能干细胞(hPSCs)因其拥有分化为机体所有类型细胞的能力,使得hPSCs成为研究发育机制以及疾病机理最常用的工具,同时在再生医学以及疾病治疗领域也有非常广泛应用。人类多能干细胞因其来源不同又可分为胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESCs)和诱导多能干细胞(induced

细胞培养基怎么选择

细胞培养是在已经从其宿主生物体中移除的人造环境细胞中生长的过程。无论它们的来源如何,这些细胞的成功繁殖依赖于使用专门的培养基,这些培养基经过精心设计,有利于健康的生长和维持。在研究这种多样化的细胞类型的情况下,可用的培养基配方的范围似乎是压倒性的,但是为了选择合适的培养基产品,非常值得花时间研究每种

血清替代品:XerumFree XF205培养基添加物使用说明(一)

以下翻译仅供参考!最终使用者请参看英文原文说明书。 使细胞能在无血清环境中生长确保无动物成分且经过GMP认证的细胞培养添加物细胞的无血清培养具有一定的挑战性。这篇文章的目的是指导终端使用者平稳过渡到无血清环境中,且避免所有不足的或不恰当的努力。理想的过渡到无血清环境下应该经历几个阶段,逐渐

三维潮汐式生物反应器于间充质干细胞的应用

前  言 未来的细胞治疗需要大量的间充质干细胞(MSCs),每个剂量从1000万到2亿多个细胞不等。当需要超过5000万个细胞的大剂量使用时,传统的平板培养是不切实际的。而利用生物反应器并结合线性放大、过程控制和自动化,是解决这一需求的主要方法。然而许多生物反应器在MSCs培养方

STEMCELL新推成分确定的iPSC培养基

  加拿大著名的STEMCELL公司(STEMCELL Technologies Inc.)近日宣布将推出一系列新产品,以加速人多能干细胞的研究和转化应用。这些新产品包括全新的多能干细胞培养基TeSR-E8,以及诱导多能干细胞定向分化的STEMdiff系列产品。   TeSR™-E8™是一种成

GMP级干细胞细胞冻存液 Cryopreservation Media

  产品描述:   STEM-CELLBANKER ®是GMP下生产的ES细胞和iPS细胞专用冻存液 产品特点是化学成分清晰,无动物源成分,专门针对ES细胞和iPS细胞特点设计的细胞冻存液。STEM-CELLBANKER ®是完全无血清和动物源性成分的,所有成分完全满足欧洲药典或美国药典的要求,是

血清替代品:XerumFree XF205培养基添加物使用说明(二)

实验步骤A) 用足够的细胞贴壁因子包被细胞培养容器表面。--一些商用的包被试剂如PronectinTM F, MapTRIXTM或同等的其它产品--纤连蛋白或多聚赖氨酸或其它--少量FBS(如对于T25烧瓶添加500ul) 37℃孵育过夜,随后用新鲜培养基或PBS洗两遍。--利于细胞贴壁的一种即用型

间充质干细胞培养,无血清培养基与血清培养基相比......

间充质干细胞培养,无血清培养基与血清培养基相比,有何不同?近来,国家的干细胞的政策是一个接一个。对应的,来自用户的咨询也是一个接一个。大多数的问题是:现在都在说无血清培养基,无血清培养基和血清培养基到底有什么差别?差别很大,从用途方面简单说下你感受的可能更具体。如果你是提供间充质干细胞(MSC)药物

细胞形态异常,鱼骨图来帮忙(五)

细胞培养过程中细胞辅助试剂是不可或缺的角色那么它是怎么影响细胞形态的呢?BI中国市场部带您分析分析~细胞辅助试剂可分为以下四部分:接下来我们逐条分析!胰酶★☆★☆★☆什么情况下是胰酶可能出现了问题呢? 一旦发生消化时间逐渐拉长,或是细胞消化不下来,需注意胰酶是否已经失活。由于胰酶为蛋白类产品,反复冻

首次!美国成功使用胚胎干细胞培育出完整小奶牛!

   经过几十年的努力,科学家们终于从奶牛中获得胚胎干细胞(ES细胞),并将其保持在原始状态。这些ES细胞能够变成各种组织,例如皮肤、肌肉和骨头。使用这些干细胞有助于调整和保存奶牛的优良遗传特性。这项研究不仅可以使奶牛产奶更多、肉质更鲜嫩,还可以使奶牛对疾病的抵抗力更强、分娩时并发症更少。这一发现也

笹井芳树:培养皿中长出视网膜

视网膜  科学家已经可以诱导干细胞形成视网膜,这为很多眼疾患者带来希望。  在子宫里,一团相同的细胞分化成各种不同的模样,最终形成高度有序的结构,组装成人体的全副器官。这个过程依照内在的“生物学蓝图”有条不紊地进行,引导组织产生折叠、皱褶,精确形成适当的外形和大小。  科学家很熟悉这个由简单到复杂的

肿瘤细胞培养

肿瘤细胞在组织培养中占有核心的位置,首先癌细胞是比较容易培养的细胞。当前建立的细胞系中癌细胞系是最多的。另外肿瘤对人类是威胁最大的疾病。肿瘤细胞培养是研究癌变机理、抗癌药检测、癌分子生物学极其重要的手段。肿瘤细胞培养对阐明和解决癌症将起着不可估量的作用。一、组织培养肿瘤细胞生物学特性肿瘤细胞与体内正

首款无血浆组分的造血干细胞培养基上市

  STEMCELL Technologies公司近日推出了StemSpan™ ACF,一款新的无动物来源成分、化学限定的造血干细胞培养基,它不含动物或人类血浆来源的组分。尽管无血清培养基上市已久,但这是第一款不含有动物和人类蛋白,只含有重组和合成组分的完整培养基,用于造血干细胞的培养和扩增。

诱导多能干细胞iPSC培养基质如何转换注意事项

摘要 : 滋养层细胞在胚胎干细胞的培养中扮演了双重角色,同时提供了生长底物和生长因子。后者我们能用外源的生长因子来替代。至于前者,一些研究人员也开始用基底膜基质来替代,如BD的Matrigel。当然,人类胚胎干细胞及诱导多能干细胞(iPSC)的最佳培养条件是成分完全明确,并且完全人源性的。 为此

神经细胞培养基质的预处理实验

实验方法原理几乎所有神经细胞的培养必须有大分子物质作为生长基质 ,细胞黏附其上才能生长 。 常用的有多聚赖氨酸 (polylysine ) 和多聚鸟氨酸 ( polyornithine) 。 此外还有 一些 细胞外 基质 ( ECM) 成分,如层黏连蛋白 (laminin) 、纤连蛋白 (fibro

神经细胞培养基质的预处理实验

基本方案             实验方法原理 几乎所有神经细胞的培养必须有大分子物质作为生长基质 ,细胞黏附其上才能生长

合适的小鼠胚胎干细胞胞质分裂阻断微核试验CBMn分析

实验概要观察表明,加入细胞松弛素-B到小鼠胚胎干细胞(mESC)的培养诱导细胞凋亡作CBMn分析。另一方面,加入 cyt-B是(CBMn)技术的最关键的部分。因此,改变传统CBMn分析方法是必要的。在本实验中,我们试图解决这个问题。研究表明,CBMn可作为一个可靠的工具用于胚胎干细胞研究,特

干细胞老化的表现和处理(Cyagen技术支持)

干细胞在培养过程中如果环境不适合其生长就会出现部分细胞的老化现象。这是干细胞培养的一个难点也是经常出现的问题。干细胞老化表现:细胞胞浆内特别是在核区附近出现黑色颗粒,表示细胞开始出现老化;细胞胞浆内出现空泡,则表明该细胞已老化或者已经开始分化(在全部细胞中出现少数老化细胞是正常的);细胞立体感逐渐消

【盘点】定量蛋白组学将在未来10年飞速发展

  人类基因组计划的成功实施,我们已初步掌握了自身的遗传信息。但阐明人类基因组整体功能的功能基因组学仍任重而道远。蛋白质作为生命活动的"执行者",自然成为生命科学研究的新"宠儿"。几乎在所有生命科学领域内,科学研究工作者都需要对细胞、组织或完整生物体的蛋白进行定性描述或定量检测。对一种细胞、组织或完

流式细胞仪和流式细胞术指南篇-1

Jay Haron Ph. D.jay dot haron at gmail dot comBD Biosciences, San Diego, United States引用实验材料和方法  从1968年 zui早的商品化 流式细胞术(FC) 和荧光激活细胞分类术(FACS)诞生以来,

神经干细胞移植对缺氧缺血新生大鼠感觉运动机能的影响

【摘要】 目的 研究神经干细胞 (NSCs)移植对改善新生大鼠缺氧缺血性脑损伤 (H I BD)后感觉运动障碍的作用。方法  7d龄新生SD大鼠,随机分为假手术组, HIBD组和脑内移植组 ,后两组 H I BD损伤后3 d分别在左侧感觉运动皮质区植入BrdU标记的 NSCs或培养基作