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生物杂交瘤技术平台的优化策略

杂交瘤技术仍然是单克隆抗体发现的主要技术,尤其是在治疗性抗体药物治疗领域,相比噬菌体、酵母等非天然文库,具有成药性好、特异性强等特点。由于杂交瘤获得的单克隆抗体,系经过哺乳动物细胞自然进化筛选获得的序列,因此其通常不会遇到表达困难、产量低、非特异性结合等问题。 杂交瘤技术具有以下挑战:1. 对于免疫原性低的抗原,抗体滴度低、难以产生中和抗体;2. 融合效率低、难以获得低丰度存在的克隆;3. 抗体亲和力低、表位分布局限。针对以上局限性,启文生物提出了以下优化方案:1. 针对低免疫原性抗原,免疫增强佐剂提高抗体效价方法:我们的免疫增强佐剂在CFA等传统佐剂的基础上拓展T细胞的抗原表位识别,进而扩展抗体的表位结果:多次试验表明,初始免疫后,效价可提高5~10倍。2. 针对融合时阳性率较低的现象,阳性克隆佐剂增强B细胞丰度方法:在Pre-fusion boost阶段,我们的阳性克隆佐剂可以增强阳性克隆在B细胞中的丰度,通过提高阳性率,从......阅读全文

生物杂交瘤技术平台的优化策略

杂交瘤技术仍然是单克隆抗体发现的主要技术,尤其是在治疗性抗体药物治疗领域,相比噬菌体、酵母等非天然文库,具有成药性好、特异性强等特点。由于杂交瘤获得的单克隆抗体,系经过哺乳动物细胞自然进化筛选获得的序列,因此其通常不会遇到表达困难、产量低、非特异性结合等问题。 杂交瘤技术具有以下挑战:1. 对于免疫

PCR常用优化策略

 PCR过程中如果没有找到zui佳的扩增条件将会导致产生许多不确定的、不需要的产物,有时甚至没有目的产物;而在另一个极端,又可能没有扩增到任何产物。这时改变已知对引物-模板的忠实性和引物延伸有影响的诸多参数中的一两个,将会达到优化扩增的目的。其中zui主要的优化变量包括 Mg2+浓度、缓冲液pH值和

优化乳化PCR新策略

仅仅不到三十年的时间,聚合酶链式反应PCR席卷了生命科学研究,成为了许多生物实验室必备的实验技术。虽然其基本前提——扩增目的DNA样品——不变,但近年来出现了不少创新,将这一技术发展到了许多应用领域,比如利用定量PCR分析特异性RNA转录的拷贝数,来确定基因表达水平。另外基因组 研究的发展也促使研究

超高效液相色谱柱洗脱技术优化策略

  超高效液相色谱洗脱技术的质量取决于什么?如何利用QbD评判色谱仪洗脱质量,它除关注关键性的邻近双峰外也考虑了洗脱的稳定性。    图1 色谱洗脱技术的经验模型。模型中的影响因素有梯度时间(tG)、温度(T)、有机洗脱剂B的初始浓度(%Bs)及最终浓度(%Be)、水质洗脱液A的酸碱度pH值以及

多能互补独立发电系统控制技术优化应用策略

多能互补的发电形式目前已经越来越多的被能源生产领域采纳,因此,从硬件和软件等多个角度,对多能互补独立发电控制系统进行优化设计,是目前很多能源工作领域人员高度关注的问题。1 多能互补独立发电系统控制存在的问题  (1)硬件设计方面的问题。目前,一些多能互补技术体系的设计缺乏对二极管设计状态的关注,并没

重组蛋白制备工艺优化策略

重组蛋白纯化基本原则蛋白的分离纯化是生物工程下游阶段一个比较重要的部分,尤其在基因工程重组蛋白的分离纯化中,上游过程的许多因素会直接影响到下游蛋白的分离,充分利用上游对下游的影响,对蛋白的纯化做一个全面的考虑和整体的设计。是否带有亲和标签,His标签,GST标签等,不同的亲和标签选择不同的纯化方案;

杂交瘤技术原理

单克隆是指利用在细胞融合基础上的B细胞杂交瘤技术。        杂交瘤技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。这两种细胞分别是经抗原免疫的小鼠脾细胞和小鼠骨髓瘤细胞。被特异性抗原免疫的小鼠脾细胞(B淋巴细胞)的主要特征是它的抗体分泌功能,但不能在体外连续培养,小鼠骨髓瘤细胞则可在

细胞杂交瘤技术

细胞杂交瘤技术 杂交瘤技术 杂交瘤技术是1975年Kohler和Milstein用于制备单克隆抗体而创建的一项重要技术,被誉为“免疫学上的一次革命”。此技术被广泛用于各种单克隆抗体的制备。抗体是由B淋巴细胞分泌的,一个B淋巴细胞只能分泌一种抗体。把B淋巴细胞和骨髓细胞融合,即可形成在体外长期存活并分

高效平台灌流培养基的开发策略

细胞灌流培养是蛋白药物连续流生产工艺的重要一环,而高效、低消耗的培养基则是细胞灌流培养工艺成败的关键因素。在fed-batch工艺占主导的今天,市面上缺乏灌流专用的平台培养基。生物制药企业在探索灌流工艺时,往往只能使用fed-batch基础培养基(或混合少量补料培养基)来作为灌流培养基使用,这些培养

Soil Biology & Biochemistry:土壤微生物群落定量研究优化策略

  近日,中国农业科学院农业资源与农业区划研究所植物营养团队研究提出土壤微生物群落定量研究优化策略。相关成果发表在《土壤生物学与生物化学(Soil Biology & Biochemistry)》上。  微生物群落的组成和功能在人类健康、全球元素循环、作物生长和植物抗病中发挥关键作用。随着高通量测序