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一个标准的细胞培养实验室应该是这样的(一)

导语你所在的细胞培养实验室是功能完善的细胞培养实验室吗,不但要布局合理,还要操作安全、方便,并能避免污染,既能满足工作需要,又能保证检验结果不受干扰。防火、防潮、防腐性能样样兼备,通风、净化、消毒、灭菌功能更是必不可少。遵循安全、高效、舒适以及“以人为本”的原则,才能建成正规化、标准化的细胞培养实验室,达到最佳的使用效率。 一、细胞培养实验室设计与布局组织细胞培养技术研究的对象不一般,它是具有完整生命力的生物单位,因此与其他一般实验工作不同,要求保持无菌操作,避免微生物及其他有害因素的影响。细胞培养实验室应能进行六方面的工作:无菌操作、孵育、制备、清洗、消毒灭菌处理、储藏。各部门最好分别设置于相连的各个房间,特别是无菌操作室最好能单独设置;如都安置在一大实验室内,无菌操作区与清洗、消毒灭菌区应分别位于两端,而制备、储藏和孵育区位于此两区之间。1.无菌操作区(1)无菌操作室:只限于细胞培养及其他无菌操作的区......阅读全文

从标准化、规模化、产业化谈细胞治疗

  1、什么是细胞治疗?  细胞治疗是指将正常或生物工程改造过的人体细胞移植或输入患者体内,新输入的细胞可以替代受损细胞、或者具有更强的免疫杀伤功能,从而达到治疗疾病的目的。细胞治疗在治疗癌症、血液病、心血管病、糖尿病、老年痴呆症等方面显示出越来越高的应用价值。一般来讲,细胞治疗包括肿瘤细胞免疫治疗

细胞系错误鉴定:终结的开始

  2010年5月ATCC SDO(Standards Development Organization)工作组在Nature review cancer杂志上发表了题为《Cell line misidentification:the beginning of the end》前瞻性报道。以下是全文

杆状病毒-昆虫细胞表达系统

实验步骤 一、杆状病毒表达载体 最简单的经典杆状病毒表达载体是一个重组的杆状病毒,其基因组含有一段外源核酸序列,通常为编码目标蛋白质的dDNA,在多角体蛋白启动子控制下进行转录。这个嵌合的基因由多角体蛋白启动子和外源蛋白编码序列组成

细胞培养大攻略

一、细胞培养基础和步骤细胞培养基大全细胞原代培养步骤细胞传代培养步骤二、细胞培养常见问答1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?答:不是必须的,看做什么实验了。2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子

细胞污染的一些总结和心得

小生刚开始做细胞培养不久,对于一个细胞培养的新手来说,最怕的就是细胞受污染。所以本人翻阅了一些园子里的关于细胞培养过程中的污染问题的贴子,结合平时查阅资料以及这些天的细胞培养的一些心得,整理出一些关于细胞污染的东东与大家一起分享。希望能对刚踏入细胞培养的同仁们有些帮助,也希望各位达人作出补充,大家共

细胞培养污染的途径、危害及预防措施(一)

污染是细胞培养技术中面临的主要问题。某些污染的发生往往难以察觉检测,而且污染源能长期共存于培养体系中,这类染事实上大部分被人们忽视了。培养的细胞作为个生物体,会对培养环境以及环境中的污染物作相应的反应,造成培养细胞生物学特性的改变,而实验结果造成潜在的威胁,而且随着污染时间的长而增加。培养环境中的物

张隆基教授带你探索解密CAR-T治疗

  感谢张教授接受我们这次的专访,我们知道最近这一两年对CAR-T的研究特别的热,患者们也特别关注这块的一些新的进展,我们这次专访想请您来讲解一下关于CAR-T在白血病以及和淋巴瘤方面的一些应用的一个情况。  Q1:CAR-T的原理是什么?  Z(张隆基教授):CAR-T它是基因修改T细胞的治疗方案

细胞培养常见问答

细胞培养常见问答 1、加到培养基中的血清 必须灭活吗?   答:不是必须的,看做什么实验了。   2、四季青胎牛血清灭活是56 ℃30分钟吗?   答:如果用于培养大多数的肿瘤细胞,血清一般是不需要灭活的,这样可以有效保存血清中的生长因子 。但是如果用于培养一些表面具

细胞培养培养基

  绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如

流式、WB、RT-PCR等实验所需细胞数问题

1、流式所需细胞数问:我目前准备做流式,要做10 个标本,但是细胞总数不多了,我能不能把原来在100ml培养瓶培养的细胞转移到25ml里培养,这样把细胞重悬后,1个100ml的可以分到4个25ml里。请问这样可以嘛?细胞数够嘛?据说做流式至少要105次方个细胞以上才行。丁香网友漂泊认为:细胞数是够的

微核实验在染色体水平检测DN A损伤实验

实验步骤 一、材料 1. 胞质分裂阻滞微核试验 2. 微核的着丝点检测 (1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。 (2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。 (3) 过氧化物酶

细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始(二)

要想达到细胞培养用水的水质要求,纯水机的配置非常关键,带有消毒模块的纯水水箱、终端过滤器、取水水质的实时监测等配置都关系着产水水质是否达标。纯水的储存对保持纯水的质量是至关重要的,由于周围环境和空气中的二氧化碳更容易使水污染改变其pH,所以储存水的容器要尽量密封,避免和外界过多接触,抑制微生物生长。

干细胞实验技术入门

《Science》刚刚公布的十大科学突破中,占据首位就是细胞重新编程技术(iPS,induced pluripotent stem cells),这一才初初“面世”一年的干细胞 技术引发了生命科学研究领域的极大震动,引用《科学》杂志负责新闻的副主编Robert Coontz的话就是“这项研

细胞体外培养实验的成功要从用水的选择开始(二)

终端滤器可用于去除纯水中特定类型的污染物,满足不同实验的应用需求。对于细胞体外培养可以选用RephiBio Filter 纯水终端过滤器,安装在乐枫超纯水系统的出水口,可有效去除水中的热原(内毒素)、核酸酶、细菌等杂质,制备符合细胞培养用水要求的超纯水(无热原、无DNase、无RNase、无菌)。&

细胞培养基的种类与应用!

  细胞培养基的种类与应用!   经典的培养基有很多种,其中 DMEM、 RPMI 1640、 MEM 、 DMEM/F12 都是应用最广泛的培养基。其他如M199 、 IMDM 、 L15培养基等也用于某些细胞的培养。其具体的特征及应用如下:   1、BME细胞培养基   基础Eagl

酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法

酶联免疫斑点(ELISPOT)测定法是一种在单细胞悬液中检测分泌某种特定蛋白质的细胞和定量分析产生该特定蛋白质的细胞频率的有力工具。1983年,Crekinsky等运用ELISPOT技术成功检出分泌特异性抗体的细胞频率,经过不断发展,目前该技术已广泛用于检测产生、分泌多种其他效应分子的细胞(如细胞因

细胞培养板的选择和使用问答-1

培养板的包被及相关问题:为了适应不同的实验需要,可对培养板用不同的物质进行包被后使用,这其中有促进细胞黏附的,也有用于一些特殊检测需要的。不同的实验目的可能具体的方案亦不同,根据需要灵活掌握。(一)多聚赖氨酸包被:问:我要培养原代神经细胞培养,要用多聚赖氨酸铺细胞培养板,请问赖氨酸液怎么配,怎样铺扳

细胞培养污染的途径、危害及预防措施(二)

3 生物性污染的来源、危害及预防 外界的微生物如昆虫、节肢动物、原虫、霉菌、病毒、细菌、无细胞壁的微生物(通常指支原体)和其它类型的细胞都可能侵入培养环境引起污染。只要在一个开放的环境中进行培养,都难以避免发生污染。发生污染的可能性取决于操作方法、培养室的无菌环境以及实验室的规章制度。生物性污染对细

李小兵教授:微生物组学是影响未来的三大科技之一

  近日,由中国广告主协会标准与认证咨询专业委员会承办,多家行业研究机构协办的2019年中国广告主大会“标准与认证服务发展论坛”在杭州举行。国家工程实验室教授、黔酸宝生物实验室主任李小兵  国家工程实验室教授、黔酸宝生物实验室主任李小兵出席论坛,并发表“标准与认证是中国大健康产业发展的基石”主题演讲

微核实验在染色体水平检测DN A损伤实验(二)

2 用阿糖胞苷微核实验检测人淋巴细胞 (V G 1 期 DNA 剪切修复损伤的方法在对暴露于各种遗传毒物的人 G 。期淋巴细胞的 M N 进行检测后发现,对于主要引起碱基损伤和 DNA 加合物而不是 DNA 链断裂或者纺锤体损伤的化学物质和紫外辐射而言, MN 的形成与细胞毒性相比明显程度较

微核实验在染色体水平检测DNA损伤实验(一)

实验步骤一、材料1. 胞质分裂阻滞微核试验2. 微核的着丝点检测(1)从硬皮病 C R E S T 亚型的患者中取得的血清样本。(2) F I T C 标记的兔抗人 I g G 二抗。(3) 过氧化物酶标记的兔抗人 I g G 。(4) 二胺基联苯溶液(D A B ): I m g /m L 溶于

流式细胞仪和流式细胞术指南篇-1

Jay Haron Ph. D.jay dot haron at gmail dot comBD Biosciences, San Diego, United States引用实验材料和方法  从1968年 zui早的商品化 流式细胞术(FC) 和荧光激活细胞分类术(FACS)诞生以来,

肿瘤研究,从认识肿瘤细胞开始

  最近一段时间我们一直围绕着肿瘤动物模型的构建,为大家介绍了肿瘤研究中各种实用动物模型的建立方法,相信大家应该收获颇多。动物水平的研究为我们提供了更接近临床的数据分析,与此同时,肿瘤细胞的实验研究也同样重要,它是肿瘤研究的初级阶段,可以更加快捷地提供在体外水平的研究结果。本期我们就开启肿瘤细胞学新

支原体常用检测方法

  支原体这种微小的微生物(直径0.2-0.8 µm),是细胞培养中令人头疼的大问题。支原体污染可能来自培养基、血清或实验操作者,会影响细胞生长率、细胞形态、基因表达、细胞代谢和细胞活力。支原体感染不易察觉,因此对培养细胞定期进行支原体检测就非常重要。   污染实验室培养细胞的支原体

MALDI-TOF在诊断传染性疾病中的应用

  Christopher Doern博士是西南德克萨斯州立大学儿科病理学助理教授,达拉斯儿童医学中心临床微生物学主任,该儿童医学中心是美国第一家应用MALDI-TOF串联质谱法鉴定微生物的儿科实验室。2013年7月29日Christopher Doern博士于2013

流式细胞仪的概念、发展历史和主要品牌

1 流式细胞仪的概念及其发展历史1.1 流式细胞仪的基本概念 流式细胞仪(flow cytonletry,FCM)是对高速直线流动的细胞或生物微粒进行快速定量测定和分析的仪器,主要包括样品的液流技术、细胞的计数和分选技术,计算机对数据的采集和分析技术等。流式细胞仪以流式细胞术为理论基础,是流体力学、

杆状病毒-昆虫细胞表达系统3

七、杆状病毒表达载体的新一代昆虫细胞宿主最早的鳞翅类昆虫细胞的遗传转化技术出现在1990年(Jarvisetal.,1990)。那时,研发该技术的初衷在于构建一个稳定转化的昆虫细胞系,它旨在能够持续生产目标重组蛋白而无需使用杆状病毒进行感染。然而, 构建这个生产用细胞系所用的载体及方法也为构建具有新

流式细胞仪原理及及其在植物上的应用和选用

摘要:随着科技水平的不断深入,科研设备的不断更新,国家对科研投入的不断增多,植物检测技术也得到了进一步的发展。流式细胞仪植物检测技术是近几年在我国刚刚兴起的一项新技术,对许多植物科技工作者来说还比较陌生。本文用比较通俗的语言介绍了进行流式细胞仪分析所必须的基本概念、发展历史、工作原理、知名品牌、常见

流式细胞术常见问题问答

1、流式细胞仪上的FL2-W FL2-A FL2-H 分别是做什么的?FL2-W是只检测荧光的脉冲宽度, FL2-H是指脉冲高度。通常在做细胞周期分析时应用,用于去除粘连细胞。2、流式同型对照怎样选择?同型对照(Isotype Control):使用与一抗相同种属来源、相同亚型、相同剂量和相同的免

他们是如何拿到诺奖的——来自诺奖实验室的内部报告

  刚获得诺贝尔生理或医学奖的Moser夫妇的实验室中,有一对中国夫妇——张生家和叶菁,他们与Moser夫妇已经合作了五六年的时间,并在此次获诺贝尔奖的工作中,做出了重要贡献。  张生家、叶菁夫妇与Moser夫妇合影  在本届诺贝尔生理或医学奖颁布的当天,赛先生联系了张生家夫妇表示祝贺,在谈话中张生