提问:降落PCR(Touchdown PCR)的原理?回答:Touchdown PCR是指每隔一个循环降低1°C反应退火温度,直至达到“Touchdown”退火温度,然后以此退火温度进行10个左右的循环。该方法最初出现是为了避开确定最佳退火温度而进行的复杂的反应优化过程。正确和非正确退火温度之间的任何差异将造成每个循环PCR产物量的两倍差异(每摄氏度造成4倍差异)。因此相对于非正确产物,正确的产物可以得到富集该方法的另一个应用是在确定已知序列肽的DNA序列。具体过程如下:使用两套与已知序列肽两末端可能配对的简并引物,这只需要知道一段长为13个氨基酸的肽段序列,5’和3’引物各长18个碱基(6个氨基酸),两者之间有一个碱基以上的间隔。使用简并引物即可以进行“Touchdown PCR”。由这种方法将获得大量的产物,但因为由肽序列可以知道引物之间的确切距离,所以可以根据产物的大小来选择所需要的产物。该方法的优点在于可以富集引物与模板......阅读全文
提问:降落PCR(Touchdown PCR)的原理?回答:Touchdown PCR是指每隔一个循环降低1°C反应退火温度,直至达到“Touchdown”退火温度,然后以此退火温度进行10个左右的循环。该方法最初出现是为了避开确定最佳退火温度而进行的复杂的反应优化过程。正确和非正确退火温度之间的任
提问:降落PCR(Touchdown PCR)的原理?回答:Touchdown PCR是指每隔一个循环降低1°C反应退火温度,直至达到“Touchdown”退火温度,然后以此退火温度进行10个左右的循环。该方法zui初出现是为了避开确定zui佳退火温度而进行的复杂的反应优化过程。正确和非正确退火温度
PCR (Polymerase Chain Reaction),中文翻译为聚合酶链式反应,是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制。 由1983年美国Mullis首先提出设想,1985年由其发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,意
PCR (Polymerase Chain Reaction),中文翻译为聚合酶链式反应,是一种用于放大扩增特定的DNA片段的分子生物学技术,它可看作是生物体外的特殊DNA复制。 由1983年美国Mullis首先提出设想,1985年由其发明了聚合酶链反应,即简易DNA扩增法,意味着PCR技术的真
PCR Array FAQ:任何一台能够做QPCR的仪器据能够做PCRarray吗?QPCR 仪器都可以进行QPCR array的实验。根据仪器采用的96孔或者384孔板,分为以下5种板型(plate format):plate formatInstrument providerQPCR instr
Q&A 常见问题: 如何选择合适的一抗? 如何选择合适的二抗? 如何选择合适的同型对照? 如何选择阳性对照? 如何确定一抗的稀释比例? 如何选择合适的抗原修复方式? 为何WB检测条带大小与预期有差别? 抗体能够用于其他种属/实验
常见问题: 如何选择合适的一抗? 如何选择合适的二抗? 如何选择合适的同型对照? 如何选择阳性对照? 如何确定一抗的稀释比例? 如何选择合适的抗原修复方式? 为何WB检测条带大小与预期有差别? 抗体能够用于其他种属/实验方法?
1.原代细胞与细胞系有什么区别? 细胞培养物来源于原代外植体或分散的细胞悬液。通常在这样的培养物中细胞增殖形成汇合地单层细胞或密集地细胞悬液。根据传统定义,第一次收获和接种的细胞被称为原代细胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells.
通常来讲,real-time qPCR 的反应程序不需要像常规的 PCR 那样,要变性、退火、延伸 3 步。由于其产物长度在 80~150 bp 之间,所以只需要变性和退火就可以了。 SYBR@Green 等染料法,最好在 PCR 扩增程序结束后,加一个溶解程序,来形成溶解曲线,判断 PC
一、培养基的制备 正确制备培养基时微生物检验的最基础步骤之一。使用脱水培养基和其他成分,尤其是含有有毒物质(如胆盐或其他选择剂)的成分时,应遵守良好实验室规范和生产厂商提供的使用说明。培养基的不正确制备会导致培养基出现质量问题。 使用商品化脱水合成培养基制备培养基时,应严格按