T细胞亚群的分离纯化
分离出来的T 细胞用抗CD8 抗体可分为CD4 + 和 CD8+ T 细胞。由于两种细胞都可回收，此法优于抗体和补体溶解法作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」实验步骤基 本 方 案 间 接 淘 洗 法 分 离 T 细胞亚群材 料亲和纯化的人免疫球蛋白吸附的羊抗鼠 Ig (Tago)0.05m ol/L Tris •Cl，pH9. 5抗 CD 8 抗体或其他特异性小鼠抗体（多克隆或单克隆；如 Coulter 或 Becton Dickinson)PBS总 T 细 胞（见辅助方案 1 或 2)含 5 % 和 1 % (V A O 热灭活 FCS (56°C ， Ih) 的 PBSR PM I 完 全 培 养 基（无血清，经过滤保持无菌）15 mmX IOOmm 塑料培养皿，细 菌 学 级 别（非组织培养用）15m l 离心管Beckman GPR GH-3. 7 水 平 转 头 离 心 机（或者其......阅读全文
T－细胞亚群的分离纯化
分离出来的T 细胞用抗CD8 抗体可分为CD4 + 和 CD8+ T 细胞。由于两种细胞都可回收，此法优于抗体和补体溶解法作者：J.E.科利根等,译者：曹雪涛等，本实验来自「精编免疫学实验指南」实验步骤基 本 方 案 间 接 淘 洗 法 分 离 T 细胞亚群材 料亲和纯化的人免疫球蛋白吸附的羊抗鼠
T－细胞亚群的分离纯化
基 本 方 案 间 接 淘 洗 法 分 离 T 细胞亚群材 料亲和纯化的人免疫球蛋白吸附的羊抗鼠 Ig (Tago)0.05m ol/L Tris •Cl，pH9. 5抗 CD 8 抗体或其他特异性小鼠抗体（多克隆或单克隆；如 Coulter 或 Becton Dickinson)PBS总 T 细
T细胞亚群的分离
T细胞亚群的分离分离T细胞亚群，包括各种CD抗原阳性的亚群、αβ型T细胞受体阳性的T细胞或γδ型T细胞、或者其它表面标志不同的T细胞亚群，通常需要有相应的特异性抗体。用直接或间接免疫荧光染色，通过FACS分离细胞；或用抗体包被的免疫磁珠，通过磁场分离细胞；或用抗体亲和层析柱分离细胞。
关于T细胞、B细胞亚群的简介
淋巴细胞是构成机体免疫系统的主要细胞群，参与机体细胞及体液免疫。可将其分为 T 淋巴细胞、B淋巴细胞和自然杀伤细胞（NK细胞）。T细胞亚群是细胞免疫的主要免疫应答形式，根据表型不同分为CD3细胞、CD4细胞、CD8细胞三类，在正常情况下，这三类细胞处于动态平衡状态，其中CD3细胞是全T细胞标志，
T淋巴细胞亚群简介
T淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫功能的重要指标，且对某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等)的辅助诊断，分析发病机制，观察疗效及监测预后有重要意义。
概述T细胞亚群的动态变化
目的研究儿童传染性单核细胞增多症（IM）不同时期外周血T细胞亚群CD3^+、CD4^+、CD8^+细胞的改变及其变化规律。方法在病程不同时期采集30例IM患儿的外周血，肝素抗凝，采用流式细胞术方法分别检测了30例IM患儿急性期、病程1月、病程3月、病程6月及正常对照组外周血淋巴细胞CD3^+、C
外周血T细胞的检测——外周血T细胞亚群的检测分析
实验步骤展开
淋巴细胞亚群的分离原则
选择纯化所需细胞的方法是阳性选择法，而选择性去除不要的细胞，仅留下所需的细胞为阴性选择法。 常用的方法包括： ①E花环沉降法； ②尼龙毛柱分离法； ③亲和板结合分离法； ④磁性微球分离法及荧光激活细胞分离仪分离法。
淋巴细胞亚群的分离原则
选择纯化所需细胞的方法是阳性选择法，而选择性去除不要的细胞，仅留下所需的细胞为阴性选择法。 常用的方法包括： ①E花环沉降法； ②尼龙毛柱分离法； ③亲和板结合分离法； ④磁性微球分离法及荧光激活细胞分离仪分离法。
T淋巴细胞亚群概述（二）
（3)CTL的杀伤机制：TCL杀伤靶细胞的机理目前认为主要通过释放多种的介质和因子介导的。 ①穿孔素（perforin):又称成孔蛋白（pore-foming protein,PFP)、C9相关蛋白（C9 related protein)或溶细胞素（cytolysin)，贮存于电子稠密胞浆
各种疾病中T细胞亚群特点
HIV感染者的T细胞亚群特点：1） CD4+T及其纯真亚群数量显著减少；2） CD28表达比例显著减低，即CD4+T 细胞功能障碍；CD4+T 细胞CD28表达比例与CD4+T 细胞计数呈显著正相关，与血浆病毒载量呈显著负相关；3）CD4+T < 200 时，CD4+T 纯真亚群及CD28表达下降较
T淋巴细胞亚群概述（一）
应用CD4和CD8单克隆抗体可将外周淋巴器官或外周血中的T细胞分为CD4+CD8-和CD4-CD8+两个主要的亚群。每个亚群按照某些表面标志和功能又可分为不同的功能亚群。 （一)CD4阳性细胞群 1.Th1和Th2亚群 应用Th细胞克隆培养技术和细胞因子产生的不同，已发现小鼠CD4阳性细胞
T细胞亚群的基本信息介绍
T细胞是一个不均一的细胞群体,分类方法有多种.按细胞表面分化抗原(CD)的不同,可分为CD4+和CD8+两大亚群；按T细胞表面受体(TCR)的不同,可分为αβT细胞γδT细胞；按功能可分为辅助性T细胞(Th 细胞)、抑制性T细胞(Ts细胞)、细胞毒T细胞(CTL或Tc细胞)和迟发型超敏反应T细胞
关于T细胞亚群的具体分类介绍
初始、效应、记忆T细胞 从未接受过抗原刺激的成熟T细胞为初始T细胞，接受抗原刺激而活化，分化为效应T细胞和记忆T细胞。 αβT细胞和γδT细胞 根据表达的TCR类型，T细胞可分为αβ+T细胞和γδ+T细胞。αβ+T细胞分布广泛，识别抗原具有MHC限制性，抗原识别受体具有多样性，既可分化为辅
关于T细胞亚群的具体分类介绍
初始、效应、记忆T细胞 从未接受过抗原刺激的成熟T细胞为初始T细胞，接受抗原刺激而活化，分化为效应T细胞和记忆T细胞。 αβT细胞和γδT细胞 根据表达的TCR类型，T细胞可分为αβ+T细胞和γδ+T细胞。αβ+T细胞分布广泛，识别抗原具有MHC限制性，抗原识别受体具有多样性，既可分化为辅
简述T细胞、B细胞亚群的临床意义
评价体内免疫调节的平衡状态。CD4/CD8维持在1.5～2.0之间，如机体免疫功能发生异常，则T细胞亚群细胞会出现数量的变化，引起一系列的病理改变。 1.CD4/CD8升高：结节病，自身免疫性疾病，如系统性红斑狼疮（SLE）、类风湿等。SLE免疫异常的核心是多克隆B细胞的激活、自身抗体产生，B
T淋巴细胞亚群注意事项
不合宜人群：无特殊要求。 检查前禁忌：禁忌暴饮暴食和剧烈运动，宜平静状态，空腹抽血检查。 检查时要求：注意血清标本不被污染，及时送去检测。和听从医生的要求。
T淋巴细胞亚群正常值
免疫荧光法、桥联酶免疫检测法、SPA花环法： CD3+细胞阳性率71.5%±6.2% CD4+细胞阳性率45.7%±5.3% CD8+细胞阳性率27.9%±5.0% CD4/cD8比值为1.66±0.33 流式细胞术： CD3+细胞阳性率61%一85% CD4+细胞阳性率28%-5
T淋巴细胞亚群检查过程
在前散射(FSC)和侧散射(SSC)的二维Dot-plot图中，划出淋巴细胞区，然后对淋巴细胞作FITC和PE的荧光强度检测，荧光Ⅰ(FL1)为FITC，滤过片为(530±10) nm带通，荧光Ⅱ(FL2)为PE，滤光片为(575±10) nm带通。数据分析时，在确定每次检测阳性细胞百分率之前，
FCM用于检测T淋巴细胞亚群
1、CD3代表全部T淋巴细胞。CD3+T细胞增高见于自身免疫性疾病（如SLE）、重症肌无力、慢性活动性肝炎和移植排斥反应等。CD3+T细胞减少，常见于某些白血病、应用免疫抑制剂、放疗过程中、先天性细胞免疫缺陷、艾滋病、多发性骨髓瘤、传染性单核细胞增多症等。2、CD4代表辅助性T细胞和迟发型超敏T细胞
T4淋巴细胞亚群的概述
T淋巴细胞表面有多种抗原，其中簇分化(CD)抗原分类甚多，这些抗原除了标记细胞的种类和分化阶段外，同时也有一定的功能，或作为受体、黏附分子、信号传递成分等，可通过这些表面特征性抗原鉴别亚群。目前开展较多的是用抗分化抗原的单克隆抗体，如抗CD4单克隆抗体，对外周血单个核细胞进行检测，根据出现阳性率
T淋巴细胞亚群的临床意义
异常结果：1.CD4淋巴细胞减少：见于恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷病、艾滋病、应用免疫抑制剂的患者。2.CD8淋巴细胞增多：见于自身免疫病，如SLE、慢性活动性肝炎、肿瘤及病毒感染等。3.CD4/CD8比值异常：艾滋病患者比值显著降低，多在0.5以下。比值降低的还有：SLE肾病、传染性单核细胞增多症
关于T细胞的三个亚群介绍
T细胞是相当复杂的异质性细胞群体。按其在免疫应答中的功能不同，可将T细胞分为：以下三个亚群。 ①细胞毒性T细胞：简称Tc细胞，占T细胞总数的20~30%，它们能直接攻击进入体内的异体细胞、带有变异抗原的肿瘤细胞和病毒感染的细胞等。Tc细胞接触靶细胞后，能够释放颗粒酶和穿孔素，诱发靶细胞凋亡。
外周血T细胞的检测—荧光标记三参数检测外周血T细胞亚群
实验步骤展开
外周血T细胞的检测—荧光标记双参数检测外周血T细胞亚群
实验步骤展开
外周血T细胞的检测—荧光标记单参数检测外周血T细胞亚群
实验步骤展开
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个
细胞分离纯化技术
实验方法原理 常用来分离人外周血单个核细胞（PBMC）的分层液比重是 1.077±0.001 的 聚 蔗糖（Ficoll）-泛影葡胺（Urografin）（F/H）分层液。Ficoll是蔗糖的多聚体，呈中性，水性高，平均分子量为400000，当密度为1.2 g/ml仍未超出正常生理性
细胞分离纯化技术
Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞实验方法原理Percoll是一种包有乙烯吡咯烷酮的硅胶颗粒。渗透压很低（
细胞分离纯化技术
Ficoll密度梯度离心法分离外周血单个核细胞 Percoll不连续密度梯度沉淀法分离纯化淋巴细胞和淋巴母细胞 实验方法原理 常用来分离人外周血单个