T细胞亚群的分离纯化

分离出来的T 细胞用抗CD8 抗体可分为CD4 + 和 CD8+ T 细胞。由于两种细胞都可回收,此法优于抗体和补体溶解法作者:J.E.科利根等,译者:曹雪涛等,本实验来自「精编免疫学实验指南」实验步骤基 本 方 案 间 接 淘 洗 法 分 离 T 细胞亚群材 料亲和纯化的人免疫球蛋白吸附的羊抗鼠 Ig (Tago)0.05m ol/L Tris •Cl,pH9. 5抗 CD 8 抗体或其他特异性小鼠抗体(多克隆或单克隆;如 Coulter 或 Becton Dickinson)PBS总 T 细 胞(见辅助方案 1 或 2)含 5 % 和 1 % (V A O 热灭活 FCS (56°C , Ih) 的 PBSR PM I 完 全 培 养 基(无血清,经过滤保持无菌)15 mmX IOOmm 塑料培养皿,细 菌 学 级 别(非组织培养用)15m l 离心管Beckman GPR GH-3. 7 水 平 转 头 离 心 机(或者其......阅读全文

T淋巴细胞亚群有哪些相关疾病

  人类T淋巴细胞病毒感染,联合免疫缺陷病,非典,斑秃,慢性肾功能衰竭,皮炎,肿瘤性心包炎

T细胞亚群检测有何临床意义

1、对高危人群进行筛查可作为肿瘤早期诊断指标:肿瘤患者多处于免疫抑制状态,特征是患者体内CD3+细胞、CD4+细胞明显减少,而CD8+细胞增加,CD4+/CD8+比值显著降低;2、为肿瘤患者个体化治疗提供强有力的依据:在放化疗过程中监测免疫功能,根据患者免疫状态调整治疗方案及剂量或使用免疫增强剂,减

单个核细胞的分离纯化

外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC)主要指淋巴细胞和单核细胞,是免疫学实验最常用的细胞,也是进行T细胞和B细胞分离纯化的重要环节。1.原理PBMC的密度与血液中的其他成分不同。红细胞和粒细胞的密度较大,为1.092左右;淋巴细胞和单核细胞的

巨噬细胞的分离和纯化

巨噬细胞的分离1)从小鼠、豚鼠或家兔腹腔中分离巨噬细胞1.取6周左右的小鼠(或600克左右的豚鼠,或3公斤左右的家兔),剃去腹部的毛并消毒。腹腔注射1ml(豚鼠20ml,家兔200ml)无菌的液体石蜡或巯基乙酸肉汤或4%淀粉肉汤。3~4天以后收集腹腔细胞。2.如要收集腹腔静置巨噬细胞,不注射刺激物,

淋巴细胞亚群的分离原则是什么

  选择纯化所需细胞的方法是阳性选择法,而选择性去除不要的细胞,仅留下所需的细胞为阴性选择法。  常用的方法包括:  ①E花环沉降法;  ②尼龙毛柱分离法;  ③亲和板结合分离法;  ④磁性微球分离法及荧光激活细胞分离仪分离法。

T-细胞及B-细胞的分离

将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱,B 细胞粘附于尼龙棉上,T细胞则不粘附,先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱,流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。然后用力反复挤压尼龙柱、挤出粘附在尼龙棉上的B 细胞,并用少量的RPMI l640 培基洗脱,此细胞悬液含有丰富的B 细胞。尼龙柱(塑料管)的长短和尼龙棉的

T8淋巴细胞亚群的临床意义

  (1)降低:急性移植物抗宿主病(GVH)、系统性红斑狼疮(SLE)、溶血性贫血、高免疫球蛋白E综合征(高IgE综合征)、类风湿性关节炎。  (2)升高:无丙种球蛋白血症、病毒感染、慢性移植物抗宿主病(GVH)、结核病、真菌和原虫感染。

T8淋巴细胞亚群的注意事项

  同B细胞检测。另外,由于间接免疫荧光技术所用的羊或兔抗鼠荧光抗体与部分白细胞表面发生非特异结合,以及Fc受体的非特异细胞反应和多克隆荧光抗体的结合放大效应,从而造成非特异阳性荧光细胞增多。而对FITC直标单克隆抗体来说,抗体成分、性质和结构上完全均一,只要不使蛋白质-FITC复合物上带上过多的电

T4淋巴细胞亚群的临床意义

  (1)降低:低丙种球蛋白血症、细菌感染、某些病毒感染。  (2)升高:急性移植物抗宿主病(GVH)、肉瘤、硬皮病、皮肤黏膜淋巴结综合征。

T4淋巴细胞亚群的注意事项

  同B细胞检测。另外,由于间接免疫荧光技术所用的羊或兔抗鼠荧光抗体与部分白细胞表面发生非特异结合,以及Fc受体的非特异细胞反应和多克隆荧光抗体的结合放大效应,从而造成非特异阳性荧光细胞增多。而对FITC直标单克隆抗体来说,抗体成分、性质和结构上完全均一,只要不使蛋白质-FITC复合物上带上过多的电

免疫学实验T淋巴细胞亚群介绍

T淋巴细胞亚群介绍:  T淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫功能的重要指标,且对某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等)的辅助诊断,分析发病机制,观察疗效及监测预后有重要意义。T淋巴细胞亚群正常值:  免疫荧光法、桥联酶免疫检测法、SPA花环法:  CD3+细胞阳性

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

简述巨噬细胞的分离和纯化

  1、取2~3公斤重的家兔,耳缘静脉注射10ml空气处死动物或注射2ml(含130mg)戊巴比妥麻醉动物。仰卧固定,消毒胸部,剪开胸壁。以下过程注意无菌操作。小心从环状软骨下方剪下气管,分离心脏和血管,取出肺,剪去脂肪和结缔组织。用无菌纱布小心擦净肺表面,称重。  2、分离肺泡巨噬细胞:用夹子夹住

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠精原细胞的分离和纯化

【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7~8d小鼠的生殖细胞悬液;用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%;平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞;精原细胞主要分布

小鼠精原细胞的分离和纯化

实验概要精原细胞的生理生化特性及其分裂增殖、分化、运动、衰老、死亡等项生命活动的调节机制的深入研究,精子发生机理的进一步阐明以及精原细胞异体、异种移植技术的实际应用,都迫切需要找到一种可行的方法将其分离纯化,以期得到较高产量和纯度的有活力的精原细胞,用于体外培养。资料表明,从成年啮齿类的睾丸分离粗线

植物细胞叶绿体DNA的分离纯化

实验方法原理本实验首先是制备植物新鲜组织匀浆、过滤,分离出完整的叶绿体,然后通过蔗糖密度梯度离心,把叶绿体与其他亚细胞结构分离开来。完整叶绿体经蛋白酶K酶解后,再通过酚-氯仿抽提获得高纯度的叶绿体DNA。实验材料植物新鲜幼嫩叶片试剂、试剂盒缓冲液A(提取缓冲液)缓冲液B(裂解缓冲液)TE缓冲液蔗糖溶

植物细胞叶绿体DNA的分离纯化

实验方法原理 本实验首先是制备植物新鲜组织匀浆、过滤,分离出完整的叶绿体,然后通过蔗糖密度梯度离心,把叶绿体与其他亚细胞结构分离开来。完整叶绿体经蛋白酶K酶解后,再通过酚-氯仿抽提获得高纯度的叶绿体DNA。实验材料 植物新鲜幼嫩叶片试剂、试剂盒 缓冲液A(提取缓冲液)缓冲液B(裂解缓冲液)TE缓冲液

T淋巴细胞亚群的检查过程及相关疾病

  检查过程  在前散射(FSC)和侧散射(SSC)的二维Dot-plot图中,划出淋巴细胞区,然后对淋巴细胞作FITC和PE的荧光强度检测,荧光Ⅰ(FL1)为FITC,滤过片为(530±10) nm带通,荧光Ⅱ(FL2)为PE,滤光片为(575±10) nm带通。数据分析时,在确定每次检测阳性细胞

外周淋巴结的t细胞有哪些主要亚群

外周血淋巴细胞根据生物学功能和细胞表面抗原表达分为3个群:  T淋巴细胞(CD3+)、B淋巴细胞(CD19+)和NK淋巴细胞【自然杀伤细胞(natural killer),CD3-CD16+和/或CD56+】。  T细胞又分为辅助T细胞(CD3+CD4+)和抑制T细胞(CD3+CD8+)。

人T细胞亚群中的免疫检查点表达分析

                                                                                                       T淋巴细胞(T lymphocyte)简称T细胞,是由来源于骨髓的淋巴干

简述外周血T淋巴细胞亚群的化验结果意义

  用OKT系列细胞株产生的OKT3、OKT4、OKT8等抗人T细胞的单克隆抗体作间接免疫荧光法,测定T淋巴细胞数并进行免疫分型。OKT3单克隆抗体是针对辅助性T细胞(TH)及抑制住T细胞(TS)的双向型抗体,故可测得TH和TS细胞总量;OKT4和OKT8分别为抗TH及TS细胞的抗体,分别测定两种T

不同疾病引发不同的精疲力竭T细胞亚群产生

2018年5月23日/生物谷BIOON/---人体免疫系统与长期持续存在的感染和癌症等其他慢性疾病之间的斗争会导至长时间的僵局。随着时间的推移,战斗中疲惫的T细胞逐渐精疲力竭,从而使得细菌或肿瘤处于优势地位。在一项新的研究中,利用来自多个分子数据库的数据,来自美国宾夕法尼亚大学佩雷尔曼医学院的研究人

T、B及其他免疫细胞的纯化

  经密度梯度离心法获得的单个核细胞是不均一的细胞群,还可根据各种细胞的生物学特性、表面标记等进一步纯化。例如单核细胞等具有粘附和吞噬作用,可用玻璃或塑料容器的粘壁法和吞噬羰基铁颗粒的磁铁吸引法除去或获得。绵羊红细胞能与人T细胞形成E花环,藉此可通过花环沉降法分离T与B淋巴细胞。此外,利用B细胞具有

临床化学检查方法介绍T淋巴细胞亚群介绍

T淋巴细胞亚群介绍:  T淋巴细胞亚群的测定是检测机体细胞免疫功能的重要指标,且对某些疾病(如自身免疫病、免疫缺陷病、恶性肿瘤、血液病、变态反应性疾病等)的辅助诊断,分析发病机制,观察疗效及监测预后有重要意义。T淋巴细胞亚群正常值:  免疫荧光法、桥联酶免疫检测法、SPA花环法:  CD3+细胞阳性

T淋巴细胞的分离技术

(一)原理混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,这是获得富含T细胞群的有效方法。 (二)材料及试剂 1.尼龙毛(Femwall Laboratories,LP-1 Leukoqak leukocyte F

T淋巴细胞的分离技术

  (一)原理   混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,这是获得富含T细胞群的有效方法。   (二)材料及试剂   1.尼龙毛(Femwall Laboratories,LP-1 Leukoqak leu

T淋巴细胞的分离技术

(一)原理  混合单个核细胞悬液在通过尼龙毛柱时,B细胞、浆细胞、单核细胞和一些辅助细胞被选择性粘附于尼龙毛上,而多数T细胞则通过尼龙毛柱,这是获得富含T细胞群的有效方法。(二)材料及试剂1.尼龙毛(Femwall Laboratories,LP-1 Leukoqak leukocyte Filte

再生障碍性贫血患者T细胞亚群及细胞因子的检测

 摘要 为了探讨再生障碍性贫血(再障)的免疫发病机制,阐明细胞免疫、细胞因子在再障患者中的变化。本文采用APAAP法和ELISA分别检测再障患者及正常人外周血T细胞亚群、PBMC经PHA培养上清中IL-2、IL-3和IFNγ水平。结果表明,再障患者外周血CD3、CD4、CD4/CD8降低,CD8升高

关于T-细胞及B-细胞的分离介绍

  将淋巴细胞悬液通过尼龙棉柱,B 细胞粘附于尼龙棉上,T细胞则不粘附,先用RPMI l640 培基洗脱尼龙棉柱,流下的细胞悬液含有丰富的T 细胞。然后用力反复挤压尼龙柱、挤出粘附在尼龙棉上的B 细胞,并用少量的RPMI l640 培基洗脱,此细胞悬液含有丰富的B 细胞。尼龙柱(塑料管)的长短和尼龙