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病毒包装技术1——病毒与非病毒载体介绍

基于转化医学的研究理念,锐赛知道,每一项临床疾病的致病源头或表象最初都是由个体体内某个基因的突变导致了。所以每一项临床疾病的研究,整体课题项目开展的最初源头也必须从一个基因开始。 锐赛在多年的转化医学研究中,在于各个临床医师的整体项目合作中,探讨得出的不仅是转化医学临床研究课题的整体思路,一般实验方向,更有各个环节单项具体实验的操作纪要。 现将整体实验的一般实验方案,各单项技术的实验方法在此分享给大家,不仅是为了大家实验室的需要更是为了进一步提高转化医学的效率,为病患之需而行。 对于整体项目的一般实验思路: 基因-基因化学合成/调取-载体构建-病毒包装-稳转株构建-细胞功能实验-动物实验/临床样本分析-数据分析统计,研究 病毒包装技术1——病毒与非病毒载体 病毒载体的优势 特点 病毒载体来源于对病毒基因组进行操作和改造,消除致病性基因,保留其感染活性,使之成为具有生物活性的......阅读全文

慢病毒的包装简介及其应用范围

  慢病毒,( Lentivirus )载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷 I 型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒载体的研究发展得很快,研究的也非常深入。慢病毒载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达

慢病毒的包装简介及其应用范围

  慢病毒,( Lentivirus )载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷 I 型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒载体的研究发展得很快,研究的也非常深入。慢病毒载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达

慢病毒的包装简介及其应用范围

  慢病毒,( Lentivirus )载体是以 HIV-1 (人类免疫缺陷 I 型病毒)为基础发展起来的基因治疗载体。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒载体的研究发展得很快,研究的也非常深入。慢病毒载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表达

简述基因治疗的最新临床研究进展

  基因疗法以其“一次给药,终身受益”的优势越来越受到医疗市场的青睐。截至目前,欧洲药品管理局(EMA)、美国食品药品管理局(FDA)及中国国家食品药品监督管理总局(NMPA)等机构至少已批准13种基因治疗产品上市,同时还有2500多项细胞和基因治疗正在进行临床试验。2019年8月,国际顶级期刊《新

简述基因治疗的最新临床研究进展

  基因疗法以其“一次给药,终身受益”的优势越来越受到医疗市场的青睐。截至目前,欧洲药品管理局(EMA)、美国食品药品管理局(FDA)及中国国家食品药品监督管理总局(NMPA)等机构至少已批准13种基因治疗产品上市,同时还有2500多项细胞和基因治疗正在进行临床试验。2019年8月,国际顶级期刊《新

针对病毒包装五大环节的解决方案

不论是细胞治疗还是基因治疗都离不开病毒载体。目前使用最多的病毒载体类型包括:腺相关病毒(AAV)、慢病毒(Lv)、逆转录病毒(Rv)和腺病毒(Adv)等,这些常用病毒载体特性如下图所示:特征慢病毒Lentivirus逆转录病毒Retrovirus腺相关病毒AAV腺病毒ADV基因表达稳转/瞬转稳转瞬转

常用的分子生物学基本技术2

IS PCR的技术特点 (1)既具有PCR的特异性与高灵敏性,又具有原位杂交的定位准确性;(2)测到低于2个拷贝量的细胞内特定DNA序列,甚至可检测出单一细胞中的仅含一个拷贝的原病毒DNA;(3)有助于细胞内特定核酸序列定位与其形态学变化的结合分析;(4)可用于正常或恶性细胞,感染或非感染细胞的鉴定

常用的分子生物学基本技术

核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的

真核细胞表达系统的类型与常用真核细胞表达载体

原核表达系统是常被用来研究基因功能的成熟系统,由于原核表达系统具有包涵体蛋白不易纯化、蛋白修饰不完整等缺陷,人们也开始利用真核细胞表达系统来研究基因。自上世纪70年代基因工程 技术诞生以来,基因表达技术已渗透到生命科学研究的各个领域。并随着人类基因组计划实施的进行,在技术方法上得到了很大发展,时至今

反向遗传学技术及其在FMDV 研究中的应用

刘光清 刘在新 谢庆阁(中国农业科学院兰州兽医研究所农业部畜禽病毒学重点开放实验室,兰州730046)摘 要:  反向遗传技术是一种新兴的分子生物学技术, 已广泛应用于生命科学研究的各个领域。综述反向遗传技术研究进展,并讨论该技术在口蹄疫病毒研究中的应用。关键词:  反向遗传学 反向遗传技术 全长c

DNA重组(DNA recombination)技术:DNA重组的载体-3

在作为载体时,这些噬菌体有一个很大的优点,即克隆到M13mp载体的外源DNA片段(双链),在子代噬菌体便成为了单链形式。故应用M13mp进行克隆,可方便地分离到大量含有外源DNA某一单链的DNA分子。这种单链DNA可在下列工作中作模板:①主要用作双脱氧链终止法进行DNA序列测定的模板;②制备仅有一条

RNAi 实验介绍

1. RNAi 介绍 RNA 干扰(RNAi:RNA interference)是由诺贝尔生理学/医学奖得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello(1)在线虫实验中发现的,2001 年 Elbashir 等人发现哺乳类的 siRNA 可以进行 RNAi 诱导

RNAi 实验介绍

1. RNAi 介绍RNA 干扰(RNAi:RNA interference)是由诺贝尔生理学/医学奖得主 Andrew Z. Fire 和 Craig C. Mello(1)在线虫实验中发现的,2001 年 Elbashir 等人发现哺乳类的 siRNA 可以进行 RNAi 诱导。这个方法与常规方

英国设定150亿美元的基因和细胞治疗产业目标

  关键问题:这是天上掉馅饼还是严肃命题?  据Stephen Ward博士说,英国已经定下产值高达100亿英镑(150亿美元)的细胞和基因治疗产业目标。  Ward博士, Cell Therapy Catapult的首席执行官,在他在近期召开的bioProcessUK会上发表了讲话。Cell Th

中国科学技术大学发表10篇CNS,全球学术排名表现出色

Science:中国科学技术大学在量子力学再取新突破  实现对量子系统的调控是人类认识并利用微观世界规律的必然诉求,也是诸多前沿科学领域的核心要素。自旋作为一种重要的量子调控研究体系,在世界各国的量子计划中均被列为重点研究对象。开展单自旋量子调控研究有助于人们在更深层次上认识量子物理的基础科学问题,

胰腺癌研究体内外模型综述

  胰腺癌的预后非常差,其致死率基本等同于发病率。在美国,胰腺癌的5年生存率依然只有6%。关键的问题是胰腺癌患者在早期基本无症状,被诊断发现时大多数都处在晚期;全球每年胰腺癌致死的病人超过20万人。   胰腺癌有多种类型,基本上划分成外分泌肿瘤和内分泌肿瘤两种。99%的胰腺癌都属于外分泌型肿瘤,其

CRISPR专家发表CRISPR/Cas9综述

  CRISPR技术的确在科学界掀起了基因组编辑的狂潮。在Pubmed中快速检索“CRISPR”,目前已有1400多项结果。也相继有专家为该技术撰写了综述论文,例如:Science综述:CRISPR-Cas9系统的历史和未来;北大魏文胜最新发表CRISPR综述。  最近,来自美国加州大学伯克利分校和

膀胱癌研究体内外模型综述

  膀胱癌是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,在我国其发病率及病死率均列泌尿生殖系统肿瘤的首位。 2015年全国新确诊为膀胱癌的患者人数超过8万,导致的死亡人数超过3万,约70%以上首诊时是浅表性癌。膀胱癌的高复发率和治疗后期的并发症是临床治疗的两大难题。深入研究膀胱癌的发病机制、发展过程及转移规律

乳腺癌体内外模型总结

  乳腺癌是指发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。其中女性患者占99%,男性仅占1%,在女性肿瘤死亡率中,位于第二位。大多数乳腺癌为激素依赖性肿瘤,ER阳性乳腺癌约占全部乳腺癌的60~75%,其中约65%为PR阳性。其中有约10.0%~20.8%的患者其ER,PR和Her-2均为阴性,即为三阴性乳腺癌。

检科院庞国芳团队建立食品农药残留检测数据库工作纪实

  十年磨一剑。庞国芳院士与助手一起讨论技术问题  庞国芳院士带领一个团队,孜孜不倦地潜心研究,突破了农残检测在信息化时代的三大挑战,使我国在这一领域的检测技术达到世界领先水平;兢兢业业地做了4万批次的农残筛查,摸清了我国“菜篮子”中的农药残留家底,为相关部门的决策和监管提供了有效的科学依据。这种踏

结直肠癌研究体内外模型综述

  引言:上海吉凯基因化学技术有限公司成立于2002年,拥有国内最大的慢病毒文库,同时也是国内最大的疾病关键基因科研服务供应商,在疾病研究领域的实验积累已逾14年!在这里,我们为大家特别整理了10多个研究领域的经验所得,将最实用的精华分享给大家!上一期帮大家总结了胃癌研究中体内外模型的选择,以及病毒

膀胱癌研究体内外模型综述(一)

膀胱癌是泌尿生殖系统最常见的恶性肿瘤之一,在我国其发病率及病死率均列泌尿生殖系统肿瘤的首位。 2015年全国新确诊为膀胱癌的患者人数超过8万,导致的死亡人数超过3万,约70%以上首诊时是浅表性癌。膀胱癌的高复发率和治疗后期的并发症是临床治疗的两大难题。深入研究膀胱癌的发病机制、发展过程及转移规律

脑胶质瘤研究体内外模型综述

  胶质瘤是最常见的原发性中枢神经系统肿瘤,约占中枢神经系统肿瘤的40-60%。 恶性胶质瘤是中枢神经系统的顽疾之一,有着预后差、复发率高等特点,现有的治疗方法如手术、放疗和化疗效果均不满意。近年来随着分子生物学技术的发展,肿瘤的基因治疗已成为当前神经外科领域的热点课题。子曰:“工欲善其事,必先利其

脑胶质瘤研究体内外模型综述

胶质瘤是最常见的原发性中枢神经系统肿瘤,约占中枢神经系统肿瘤的40-60%。 恶性胶质瘤是中枢神经系统的顽疾之一,有着预后差、复发率高等特点,现有的治疗方法如手术、放疗和化疗效果均不满意。近年来随着分子生物学技术的发展,肿瘤的基因治疗已成为当前神经外科领域的热点课题。子曰:“工欲善其事,必先利其

乳腺癌体内外模型总结

乳腺癌是指发生在乳腺腺上皮组织的恶性肿瘤。其中女性患者占99%,男性仅占1%,在女性肿瘤死亡率中,位于第二位。大多数乳腺癌为激素依赖性肿瘤,ER阳性乳腺癌约占全部乳腺癌的60~75%,其中约65%为PR阳性。其中有约10.0%~20.8%的患者其ER,PR和Her-2均为阴性,即为三阴性乳腺癌。三阴

常用的分子生物学基本技术1

DNA重组技术(或基因工程)是20世纪生物学的伟大成就,并已渗透到生命科学包括医学 各个领域,为肿瘤的实验研究和临床诊断及治疗提供了崭新的技术和有用的工具。本附录扼要介绍在分子肿瘤学领域中常用的分子生物学基本技术及其在肿瘤研究中的应用,着重介绍它们的原理和应用。至于具体的技术方法和操作步骤可参阅《分

Nature:用新型高效Cas9实现基因组编辑

  来自哈佛-麻省理工Broad研究所、麻省理工学院和国立卫生研究院国家生物技术信息中心的研究人员,在一项合作研究中发现了一种高效的Cas9核酸酶,攻克了体内基因组编辑面临的一个主要挑战。发表在《自然》(Nature)杂志上的研究结果,预计将有助于CRISPR工具箱更容易地应用于体内实验和治疗用途。

讨论潮式生物反应器对贴壁细胞培养的线性放大性

背景介绍十年前一次性生物反应器首次引入商业生产后,生物制备工艺业已将其归纳为cGMP标准。现有的搅拌式反应器只能支持悬浮细胞培养,而VaccixCell的TideMotion®潮汐式生物反应器CelCradleTM(500ml)和TideCell®(2升-500升),是目前市面上仅有的少数可用于大规

美国BRAIN计划发布首个技术成果

  研究人员开发了一种新化学遗传学(chemogenetic)技术,可以通过启动和关闭神经元,揭示控制小鼠行为的大脑回路。这是美国NIH BRAIN计划产出的首个技术成果,可以帮助人们调节神经元进而治疗疾病。  北卡罗来纳大学和NIH的研究团队在四月三十日的Neuron杂志上发表文章介绍了这一成果。

美BRAIN计划发布首个技术成果:无创技术启动和关闭神经元

  研究人员开发了一种新化学遗传学(chemogenetic)技术,可以通过启动和关闭神经元,揭示控制小鼠行为的大脑回路。这是美国NIH BRAIN计划产出的首个技术成果,可以帮助人们调节神经元进而治疗疾病。  北卡罗来纳大学和NIH的研究团队在四月三十日的Neuron杂志上发表文章介绍了这一成果。