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离子交换柱层析(ionexchangechromatography)分离核苷酸

一、目的:学习离子交换柱层析法分离核苷酸的原理及方法。二、原理:离子交换作用一般指在固相和液相之间发生的可逆的离子交换反应,它可用于分离各种可解离的物质。通常离子交换剂是在一种高分子的不溶性母体上引入若干活性基团。这样人工会成的离子交换剂具有各种各样的性能。作为不溶性母体的离分子有树脂、纤维素、葡聚糖、琼脂糖或无机聚合物等,引入的活性基团可以是酸性基团,如强酸型的含有磺酸基(—SO3H)、中强酸型的含磷酸基(—PO3H2)、亚磷酸基(—PO2H)、弱酸型的含有羧基(—COOH)或酚羧基(—OH)等。也可以是碱性基团,如强碱型的含季铵[—N+(CH3)3]、弱碱型的含叔胺[—N(CH3)2]、仲胺(—NHCH3)、伯胺(—NH2)等。在一定条件下,离子交换树脂吸附的物质数量和在溶液中的物质数量达到平衡时,两者数量之比叫分配系数(平衡常数)。理想的情况是洗脱曲线和分配系数相符合,待分离的各种物质的分配系数,应有足够的差别,以Kd表示......阅读全文

离子交换凝胶柱层析

原理 在植物生理生化的研究中,往往要从一个组分复杂的混合物中,将性质很相近的生物大分子分离,这是研究工作中一个很关键的问题,需要一种具有高度分辨力的技术,才能满足这一要求。离子交换层析就是这样的技术,能够分离只有很小差异的物质(例如仅有一个氨基酸不同的两种蛋白质),是分离生物大分子的一

离子交换柱层析原理

离子的半径电荷等差异会影响它在离子交换柱上的移动速度,进而实现层析。

离子交换柱层析条件的选择

  对于分离一个特定的蛋白质,选择什么样的柱子、离子交换剂和流动相等需根据具体情况统筹考虑,主要是根据待分离蛋白质本身的理化性质和生物学性质确定。因此,在采用离子交换层析法进行蛋白质的分离之前,应当对待分离的蛋白质的性质有所了解,如等电点、相对分子质量、疏水性、生物活性及测定方法、溶解性、浓度、发生

离子交换柱层析法(层析实验简介)概略

一、    原理:有些高分子物质含有一些可以分离的基因,例如-SO3H,-COOH等,因此可以和溶液中的离子产生交换反应。如:R-SO3H+M+ ———— R-S3M+H+或R-NH3OH+CL-  —————  R-NH3CL+OH-这类高分子物质通称离子交换剂,其中使用最普遍的是离子交换树脂。由

离子交换柱层析分离核苷酸实验_离子交换层析法

本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离, 最后采用紫外吸收法进行鉴定。旨在了解并掌握RNA 碱水解的原理和方法,掌握离子交换柱层析的分离原理和方法,熟练掌握紫外吸收分析方法。实验方法原理本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离

离子交换柱层析分离核苷酸实验

离子交换层析法             实验方法原理 本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离, 最后采用紫外吸收法进行鉴定。同时通过

离子交换柱层析分离蛋白原理详解

 1.离子交换与洗脱   所谓离子交换,是指溶液中的某一种离子与另一种靠静电力结合在惰性载体上的离子进行可逆交换的过程,即溶液中的离子结合到载体上而载体上的离子被替换下来。若惰性载体上以共价键结合着带正电荷的活性基团,则可交换阴离子,叫阴离子交换剂;若以共价键结合着带负电荷的活性基团,则可交换阳离子

离子交换柱层析分离核苷酸实验

实验方法原理 本实验以酵母RNA 为材料, 将RNA 用碱水解成单核苷酸,再用离子交换柱层析进行分离, 最后采用紫外吸收法进行鉴定。同时通过测定各单核苷酸的含量, 可以计算出酵母RNA 的碱基组成。实验材料 酵母RNA试剂、试剂盒 阴离子交换树脂聚苯乙烯-二乙烯苯-三甲胺季铵甲酸甲酸钠KOH蒸馏水过

离子交换柱层析(ion-exchange chromatography)分离核苷酸

一、目的:学习离子交换柱层析法分离核苷酸的原理及方法。二、原理:离子交换作用一般指在固相和液相之间发生的可逆的离子交换反应,它可用于分离各种可解离的物质。通常离子交换剂是在一种高分子的不溶性母体上引入若干活性基团。这样人工会成的离子交换剂具有各种各样的性能。作为不溶性母体的离分子有树脂、纤维素、葡聚

怎样利用离子交换柱层析法分离不同的蛋白质

离子交换柱层析法的核心在于不同的蛋白质的等电点不同所以说,利用离子交换柱层析法分离不同的蛋白质其实就是利用不同蛋白质不同的等电点来分离。比如目的蛋白等电点是5,那么在环境pH为8.0的情况下,目的蛋白可以结合阴离子交换层析,而杂蛋白可能不能结合或者结合能力比目的蛋白弱。通过不同的盐浓度的洗脱让结合能