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电穿孔转染DNA实验

电穿孔可以有效地转染磷酸钙-DNA 沉淀物等其他方法转染效果不好的细胞系。但是,与其他转染方法一样,未使用过的细胞系进行电穿孔转染的实验条件要经过优化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料指数生长的哺乳动物细胞培养液试剂、试剂盒Giemsa 染液甲醇磷酸盐缓冲液丁酸钠载体 DNA细胞生长培养基仪器、耗材组织培养皿基因脉冲器 II电穿孔设备与电转化池Sorvall H1000B 转子或类似设备实验步骤材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所需浓度Giemsa 染液(10%m/V)Giemsa 染液应使用前用磷酸盐缓冲液或水新鲜制备的,用 Whatman1 号滤纸过。甲醇磷酸盐缓冲液溶液使用前过滤除菌,室温保存丁酸钠(500 mmol/L)(备选)在化学通风橱内,用10mol/LNaOH 调节丁酸贮存液至 pH7.0。用 0.22um 的滤器......阅读全文

电穿孔转染 DNA 实验

实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养液试剂、试剂盒 Giemsa 染液甲醇磷酸盐缓冲液丁酸钠载体 DNA细胞生长培养基仪器、耗材 组织培养皿基因脉冲器 II电穿孔设备与电转化池Sorvall H1000B 转子或类似设备实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录 1。稀释贮存液至所需

电穿孔转染 DNA 实验

电穿孔可以有效地转染磷酸钙-DNA 沉淀物等其他方法转染效果不好的细胞系。但是,与其他转染方法一样,未使用过的细胞系进行电穿孔转染的实验条件要经过优化。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料指数生长的哺乳动物细胞培养液试剂、试剂盒Giem

电穿孔转染 DNA 实验

            实验材料 指数生长的哺乳动物细胞培养液 试剂、试剂盒 Giemsa 染液 甲醇 磷酸盐缓冲液

电穿孔转染真核细胞实验

电穿孔转染哺乳动物细胞 植物原生质体细胞             实验材料 哺乳动物细胞

电穿孔转染真核细胞实验

实验材料 哺乳动物细胞试剂、试剂盒 完全培养液电穿孔缓冲液仪器、耗材 电穿孔仪器电击池实验步骤 1.  在完全培养液中培养特转染细胞至对数生长晚期,4℃ 640 g 离心5 min,收集细胞。 2.  将细胞沉淀用其半量体积的预冷电穿孔缓冲液重悬洗涤,4℃ 640 g 离心5 min。3.  对于稳

电穿孔转染真核细胞实验——电穿孔转染哺乳动物细胞

电穿孔法应用高压电击短暂或稳定地将DNA导人细胞,是一种目前大受好评的方法。它适用于多数类型的细胞,既可产生高频率的稳定转染,又可产生短暂的基因表达,并且由于其所需步骤甚少,因而比其他技术更为容易。实验材料哺乳动物细胞试剂、试剂盒完全培养液电穿孔缓冲液仪器、耗材电穿孔仪器电击池实验步骤1.  在完全

细胞转染--电穿孔转染法

电流能够可逆地击穿细胞膜形成瞬时的水通路或膜上小孔促使DNA分子进入胞内,这种方法就是电穿孔。当遇到某些脂质体转染效率很低或几乎无法转入时建议用电穿孔法转染。一般情况下,高电场强度会杀死50%-70% 的细胞。现在针对细胞死亡开发出了一种电转保护剂,可以大大的降低细胞的死亡率,同时提高电穿孔转染效率

电穿孔法稳定转染

方案27.12 脂质体介导的瞬时转染             实验材料 L8057-Y10细胞 D-PBSA

电穿孔法稳定转染

实验材料L8057-Y10细胞D-PBSA仪器、耗材培养瓶培养板F12 FB培养基G418(Invitrogen)选择性培养基电穿孔电穿孔专用杯电穿孔仪II电穿孔仪-II配套的效能扩增器-Plus实验步骤表达载体与 DNA 制备:pSVTKGH,线性化 [ Selden et al.,1986]此载

电穿孔法稳定转染

            实验材料 L8057-Y10细胞 D-PBSA 仪器、耗材 培养瓶 培养板