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实验方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物（RNP，核糖核蛋白颗粒）的方法，无论是对于粗提物还是提纯后的样品，对分析 RNP 的结构域的结构都非常有效。实验材料 蛋白酶 KAMV 反转录酶试剂、试剂盒 缓冲液DNase ⅠDNase Ⅰ 缓冲液酚氯仿溶液乙酸钠RNasinE.coli RNase HTBE 缓冲液过硫酸铵溶液尿素凝胶点样缓冲液转移缓冲液SSPE 缓冲液核苷酸溶液琼脂糖丙烯酰胺RNP 凝胶点样缓冲液仪器、耗材 变性聚丙烯酰胺凝胶电泳电转移设备尼龙膜实验步骤 一、材料与设备所有的缓冲液和溶液必须无 RNA 酶污染。1. RNP 制备和 DEAE 层析(1) 缓冲液 D : 20 mmol/L HEPES ( pH 8.0 )，100 mmol/L KCl，0.2 mmol/L EDTA。20% 甘油，高压灭菌。在使用前加 DTT 至 1 mmol/L。加苯甲磺酰氟（PMSF）至 ......阅读全文
实验方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物（RNP，核糖核蛋白颗粒）的方法，无论是对于粗提物还是提纯后的样品，对分析 RNP 的结构域的结构都非
实验方法原理 寡核苷酸靶向的 RNase Ⅱ 酶解实验是分析 RNA 蛋合复合物（RNP，核糖核蛋白颗粒）的方法，无论是对于粗提物还是提纯后的样品，对分析 RNP 的结构域的结构都非常有效。实验材料 蛋白酶 KAMV 反转录酶试剂、试剂盒 缓冲液DNase ⅠDNase Ⅰ 缓冲液酚氯仿溶液乙酸钠R
小段DNA序列中产生大量突变 实验材料 大肠杆菌
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 DNA聚合酶dNTP甘油NaClEDTASDS无水乙醇仪器、耗材 水浴锅离心机分光光度计实验步骤 1. 设计寡核苷酸，其3‘端含有由8个核苷酸组成的回文结构，且包含某一限制性内切酶的识别位点；如果可能的话，5’端也应有一含某个限制性内切酶位点的序列。中间区
基本方案 实验材料 大肠杆菌
实验材料 大肠杆菌试剂、试剂盒 PEGTEATP寡核苷酸诱变引物T4多核苷酸激酶EDTASSC仪器、耗材 水浴锅电泳仪培养箱实验步骤 1. 将一个单链噬菌体产生的噬斑转移至含有1 ml 灭菌TY培养基的1.5 ml 微量离心管中，60℃温育5 min，以杀灭细菌细胞，剧烈振荡以释放琼脂中
试剂、试剂盒 寡核苷酸杂交液寡核苷酸预杂交液SSC 或 SSPETEAC1 洗涤液TMAC1或 TEAClTMAC1 洗涤液核酸和寡核苷酸放射性标记的寡核苷酸探针仪器、耗材 杂交装置振荡培养器实验步骤 材料溶液和缓冲液稀释贮存液至适当浓度。寡核苷酸杂交液6XSSC(或 6XSSPE)0.05mol/
试剂、试剂盒 寡核苷酸杂交液 寡核苷酸预杂交液 SSC 或 SSPE TEAC1 洗涤液 TMAC1
简并寡核苷酸基因混编 实验材料 pBSII KS 质粒
实验材料 pBSII KS 质粒大肠杆菌 DH5α试剂、试剂盒 Pfx 聚合酶碱性磷酸酶通用缓冲液覆盖液刚果红溶液脱色液桦木木聚糖底物溶液PAHBAH 储液实验步骤 我们以 DNA 重组 D.thermophilum Rt46B.1 木聚糖酶基因（ xynB) 及其 5 个相关的木聚糖酶基因为例