等温扩增时出现假阳性的应对策略
等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术，从诞生之日起就不断受到研究者的青睐，但也少不了质疑，甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是，在建立方法或者实际样本检测的过程中，等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高，使得其实际应用范围变窄，未能真正显示出其检测优势。因此，推出这经验篇来回答“当等温扩增出现假阳性时应该如何应对？”。 01假阳性现象 假阳性是指检测阴性材料得到阳性结果。如果一次实验中的几个阴性对照中出现一个或几个阳性结果，提示本次实验中其它标本的检测结果可能有假阳性。实验中设立的阴性对照可提示有无假阳性结果出现。 02 造成假阳性的原因 1. 样品间交叉污染：样本污染主要有收集样本的容器被污染，或样本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有样本而造成相互间交叉污染；样本核酸模板在提取过程中，由于吸样*污......阅读全文
等温扩增时出现假阳性的应对策略
等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术，从诞生之日起就不断受到研究者的青睐，但也少不了质疑，甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是，在建立方法或者实际样本检测的过程中，等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高，使得其实际应用范围变窄，未能真正显示出其
分子诊断经验篇：如何应对等温扩增时出现的假阳性问题
等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术，从诞生之日起就不断受到研究者的青睐，但也少不了唏嘘、质疑，甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是，在建立方法或者实际样本检测的过程中，等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高，使得其实际应用范围变窄，未能真正显
等温扩增，存在“假阳性”的Bug？
等温扩增技术作为一种核酸分子诊断技术，从诞生之日起就不断受到研究者的青睐，但也少不了质疑，甚至摒弃。引起这种截然相反的态度的原因在于等温扩增技术自身所存在的缺陷。而最为突出的一点是，在建立方法或者实际样本检测的过程中，等温扩增技术引起假阳性结果的概率相对较高，使得其实际应用范围变窄，未能真正显示出其
基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个
现行Hp检测可能出现的假阳性
现行Hp检测可能出现的假阳性是检验技师考试中所包含的内容。医学教育网收集整理了部分相关信息供学员参考。 意大利Brandi等报告，在低酸患者胃液及胃黏膜中发现非幽门螺杆菌（Hp）尿素酶阳性细菌。该结果表明，在临床上对低酸患者采用胃黏膜快速尿素酶试验（RUT）及尿素呼气试验（C-UBT）诊断Hp
菌落pcr会出现假阳性结果吗
最近做酶切连接转化，最后做鉴定时，以菌落为模板进行PCR时可以见到有目的条带;当把菌落接种到LB液扩菌后，以菌液为模板进行PCR时却什么东东都没有?请问会是什么原因啊?多多指教啊!建议重新以菌落为模板进行PCR检测，再重新以菌液为模板进行PCR检测，因为菌落或者菌液PCR假阳性的几率还是比较高的。但
PCR－反应出现假阳性结果原因
1 ) 引物设计不合适： 选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而，在进行PCR扩增时，扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳性。需重新设计引物。 2 ) 靶序列或扩增产物的交叉污染： 这种污染有两种原因： 一是整个基因组或大片段的交叉污染，导致假
梅毒血清检查会出现假阳性吗
会有假阳性的可能，RPR试验，即为检测类脂质抗体的实验；而TPHA则为直接检测梅毒螺旋体的实验。因RPR是检测类脂质抗体，而不是直接检测抗梅毒螺旋体抗体的实验，因而无特异性，凡能导致产生类脂质抗体的疾病，均能使RPR阳性。
造成HBsAg检测出现假阳性的几种原因
造成HBsAg检测出现假阳性的原因可能会有以下几种： 1． 待测标本溶血或含有血细胞。 2． 待测标本长菌或其它原因混浊。 3． 洗板时洗涤液溢出，污染其它孔。 4． 洗板机内部管道有真菌生长。 5． 洗板机设置不当。 6． 手工洗板时，拍干用纸未更换。 7． 实验中，实际孵育时间过长
核酸扩增—环介导的等温扩增法
2000年日本学者Notomi在Nucleic Acids Research（核酸研究）杂志上公开了一种新的适用于基因诊断的恒温核酸扩增技术，即环介导等温扩增技术，英文名称为“Loop-mediated isothermal amplification"，受到了世卫组织、各国学者和相关政府部门的
哪些原因可致HBsAg检测出现假阳性？
哪些原因可致HBsAg检测出现假阳性？:乙型肝炎病毒HBsAg检测假阳性原因分析目前国内临床多采用ELISA 法检测乙型肝炎血清标志物，它以免疫学反应为基础，将抗原抗体的特异性反应与www.med126.com酶对底物的高效催化作用相结合，通过洗涤除去多余游离反应物，以保证实验结果特异性和稳定性，但
elisa－法检测HIV为什么总是出现假阳性
造成ELISA检测HIV假阳性的原因主要有3个:1.试剂影响因素,可能与试剂盒包被抗原组合不同有关。目前第3代双抗原夹心法试剂的质量优于第2代间接法试剂，具有更好的敏感性和特异性，尤其对感染早期的弱阳性标本,主要包被的抗原的种类及比例，纯度有关系。2.患者自身情况的影响， 患者体内特有的内源件物质可
为什么梅毒化验会出现假阳性呢？
梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种性病。感染梅毒后，人体内会产生两类抗体，一类是直接针对梅毒螺旋体的抗体，另一类则是针对类脂质的抗体。针对类脂质的抗体因不直接针对梅毒螺旋体，因此无特异性，除感染梅毒外，患另外一些疾病以及生理状况的改变，体内也可能产生低滴度的抗类脂质抗体。诊断梅毒时，所做的梅毒血清学检查
为何B型钠尿肽(BNP)检测出现假阳性？
案例经过 61岁的林大伯平时无烟酒嗜好，喜好散步。近4个月来，林大伯每于饭后自感胸闷，平时常感头晕。在省城大医院就诊时，查血压140/92mmHg，患者一般病史及临床检查都可，查血液心肌酶谱、肌钙蛋白I、血液生化和凝血指标均正常，仅D-二聚体轻度增高，甘油三酯（TG）195mg/dl。
尿液分析仪检测出现假阳性的原因
假阳性。即尿液分析仪潜血反应阳性，镜检阴性，其常见原因有： （1）血红蛋白（Hb） 尿液分析仪潜血反应既能与完整的RBC发生阳性反应，也可与RBC溶解释放的Hb发生阳性反应，而显微镜只能检出尿中未溶解的RBC。健康人尿中Hb含量极微，定性为阴性。疾病时，尿中Hb有两个来源：一是发生血管内溶血，血
PCR反应假阴性，不出现扩增条带的原因分析
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消 化除净,特别是染色体中的组蛋白,④在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。⑤模 板核酸变性
PCR仪PCR结果出现假阳性是什么原因？
假阳性假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔
等温扩增技术的原理及应用
等温扩增技术（isothermal amplification technology，ITA）是近年来发展起来的基于恒温扩增的新型核酸扩增技术,主要包括环介导等温扩增（loop-mediated isothermal amplification，LAMP)[1]、交叉引物扩增（crossing pr
什么酶重组等温扩增技术？
通过模拟生物体遗传物质自身扩增复制的原理,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定重组酶、外切酶、聚合酶等多酶体系进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进行优化组合,从而获得核心的重组等温扩增体系,建立特殊扩增反应体系,在37-42℃恒温条件下,可将微量DNA/RNA的特异性区段在数分钟内扩增
核酸等温扩增技术有什么
环介导等温扩增技术（LAMP）。依赖于核酸序列的扩增技术（NASBA）。滚环扩增技术（RCA）。单引物等温扩增技术（SPIA）。依赖于解旋酶的等温扩增技术（HAD）。链接代扩增技术（SDA）。快速等温检测放大技术（RIDA）。切刻内切酶核酸恒温扩增技术（NEMA）。核酸等温扩增技术，无论是在实际操作
环介导等温扩增技术原理
环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification)，是一个比较公认的等温扩增方法，现如今等温扩增法很多，比如RCA,NASBA,RPA...如果可以，你可以参考这篇文献：Loop-mediated isothermal amplification inte
核酸等温扩增技术及其应用
据微生物学家的估计，采用培养技术，仅有约1%的细菌可以培养。在过去的一个世纪里，以聚合酶链反应（PCR）为代表的基于核酸的检测技术发展迅速，为其他病原体的精确检测诊断提供了可能。毋庸置疑，Kary Mtlllis发明的PCR技术是20世纪80年代分子生物学领域的一项革命性突破。也许他本人当时也没有想
LAMP（环介导等温扩增）技术
PCR方法在人类及动植物疾病基因诊断、食品分析和环境监测等领域发挥着举足轻重的作用，其灵敏度高、特异性好，是目前最精准的基因诊断方法。然而PCR方法操作起来较复杂，对仪器和人员要求比较高，不适合基层或现场快速诊断，因此在国内的推广速度并不是很快。2000年日本学者Notomi在Nucleic Aci
避免假阳性结果
2008年9月美国应用生物系统公司推出超高灵敏度的5500三重四极杆串联质谱系统和Qtrap5500三重四极杆串联质谱-线性离子阱质谱复合系统。这为要求超高灵敏度的药物研发、食品安全残留检测、环境激素分析、毒物分析等相关领域提供了可靠的技术平台。该系统以独特的质谱数据采集方式——四极杆-
PCR反应出现假阴性结果无扩增条带原因分析
PCR 反应的关键环节有 ： ① 模板核酸的制备; ② 引物的质量与特异性; ③ 酶的质量; ④ PCR循环条件; 寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究 ， 可能出现的原因有以下几点： 1 ) 模板： ① 模板中含有杂蛋白质; ② 模板中含有Taq酶抑制剂; ③
等温扩增到底行不行？
最近又看到一些同行写的关于等温扩增的文章。不禁想起几年前看到的RPA技术介绍。当时第一次看到这个技术的时候，简直可以用“震惊”、“惊艳”来形容。扩增速度真快啊，十几分钟就能出结果，比现在吭哧吭哧做PCR岂不是方便多了！可是几年过去了，似乎也没看到基于RPA技术的临床产品上市。说真的是有点失望的。就像
什么是PCR假阳性？
假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔，防止
PCR的假阳性和假阴性如何解释
假阳性假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔
PCR实验中假阳性和假阴性的防治
1，标本采集必须合格，否则不做。2，严格按照操作规程，避免人为实验误差。3，用于操作的各种仪器，加样器，必须通过审核验收，仪器选贵的，进口的！4，最主要的就是试剂，选择公认的，优质试剂
ELISA假阳性结果和细胞假阴性结果
假阳性结果和假阴性结果1、标本的采集与保存ELISA试剂盒当标本采集保存不当产生溶血时，红细胞中的血红蛋白释放到血清中，血红蛋白具有过氧化物酶的性质，其通过吸附或“PP效应"（蛋白质间相互吸附的现象）结合后，可催化A、B液显色而造成假阳性标本采集保存不当致细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，会产生