PCR反应假阴性，不出现扩增条带的原因分析
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消 化除净,特别是染色体中的组蛋白,④在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。⑤模 板核酸变性不彻底。在酶和引物质量好时,不出现扩增带,极有可能是标本的消化处 理,模板核酸提取过程出了毛病,因而要配制有效而稳定的消化处理液,其程序亦应 固定不宜随意更改。 酶失活:需更换新酶,或新旧两种酶同时使用,以分析是否因酶的活性丧失或不够而 导致假阴性。需注意的是有时忘加Taq酶或溴乙锭。 引物:引物质量、引物的浓度、两条引物的浓度是否对称,是PCR失败或扩增条带不 理想、容易弥散的常见原因。有些批号的引物合成质量有问题,两条引物一条浓度 高,一条浓度低,造成低效率的不对称扩增,对策为:①选定一个好的引物合成......阅读全文
PCR反应假阴性，不出现扩增条带的原因分析
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板:①模板中含有杂蛋白质,②模板中含有Taq酶抑制剂,③模板中蛋白质没有消 化除净,特别是染色体中的组蛋白,④在提取制备模板时丢失过多,或吸入酚。⑤模 板核酸变性
PCR反应出现假阴性结果无扩增条带原因分析
PCR 反应的关键环节有 ： ① 模板核酸的制备; ② 引物的质量与特异性; ③ 酶的质量; ④ PCR循环条件; 寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究 ， 可能出现的原因有以下几点： 1 ) 模板： ① 模板中含有杂蛋白质; ② 模板中含有Taq酶抑制剂; ③
PCR反应阴性对照也出现明显扩增的原因
反应体系组分（如，水）被污染：实验过程中，更换新的Mix或者水重复实验；标本间的交叉污染或产物污染：反应体系在超净工作台内配制，对实验室进行严格的区分，减少气溶胶污染；使用带滤芯的枪头；引物二聚体的出现：一般在35循环以后阴性对照出现扩增属正常情况，可配合熔解曲线，PCR产物的琼脂糖电泳结果进行分析
PCR假阴性的原因分析
PCR的假阳性问题是在PCR诞生之初就被深刻认识到了，同时由于造成假阳性的因素相对单一，因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。如果一个项目只是阳性率高敏感性好的话，那么可以认为其阴性结果具备很高的可排除性，仍然有相当的临床适用价值。但PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常被人忽略，严
PCR假阴性的原因分析
PCR的假阳性问题是在PCR诞生之初就被深刻认识到了，同时由于造成假阳性的因素相对单一，因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。如果一个项目只是阳性率高敏感性好的话，那么可以认为其阴性结果具备很高的可排除性，仍然有相当的临床适用价值。但PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常被人忽略，严
PCR假阴性的原因分析
PCR假阳性问题是在PCR诞生之初就被深刻认识到了，同时由于造成假阳性的因素相对单一，因此假阳性并不是困惑检验工作的主要原因。如果一个项目只是阳性率高敏感性好的话，那么可以认为其阴性结果具备很高的可排除性，仍然有相当的临床适用价值。但PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常被人忽略，严重
聚合酶链式反应（PCR）出现假阴性的原因分析
PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及溴乙锭的使用， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。
PCR假阴性的原因
假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因：引物设计不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火温度不合适，循环次数过少，产物未及时电泳检测等。解决方法有：重新设计引物，增加酶量或调换酶，增加模板量，调整退火温度，增加循环次数，及时检测扩增产物，一般在 48h 以内进行。
PCR假阴性的原因
造成PCR假阴性的原因是复杂的，也是多样的。主要有： 1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题（如：温控不准等）给临床带来了诸如非特异性扩增（假阳性）、扩增效率下降(假阴性）等问题. 2.离心机问题。离心机的质量或使用不正确，造成离心标本模板没有分离出来造成假阴性，窃
PCR仪PCR检测结果出现假阴性是什么原因？
假阴性假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因：引物设计不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火温度不合适，循环次数过少，产物未及时电泳检测等。解决方法有：重新设计引物，增加酶量或调换酶，增加模板量，调整退火温度，增加循环次数，及时检测扩增产物，一般在 48h 以内进行。
PCR扩增后没有出现条带
没有条带说明没有PCR产物，应该是PCR阶段原料准备处理线遗漏，建议回忆一下实验过程，重新制备
PCR扩增后没有出现条带
没有条带说明没有PCR产物，应该是PCR阶段原料准备处理线遗漏，建议回忆一下实验过程，重新制备
造成PCR假阴性的原因
PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常 被人忽略，严重的影响了PCR的使用。可以想象一种假阳性和假阴性都很高的项目，有什么样的诊断价值。造成PCR假阴性的原因是复杂 的，也是多样的。主要有：1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题（如：温控不准等）给临床
造成PCR假阴性的原因
PCR的假阴性在检验工作中仍很严重，并且用些因素经常 被人忽略，严重的影响了PCR的使用。可以想象一种假阳性和假阴性都很高的项目，有什么样的诊断价值。造成PCR假阴性的原因是复杂 的，也是多样的。主要有：1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题（如：温控不准等）给临床
PCR－反应出现假阳性结果原因
1 ) 引物设计不合适： 选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而，在进行PCR扩增时，扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳性。需重新设计引物。 2 ) 靶序列或扩增产物的交叉污染： 这种污染有两种原因： 一是整个基因组或大片段的交叉污染，导致假
PCR扩增后出现非特异性条带的原因
PCR扩增后出现的条带与预计的大小不一致，或大或小，或者同时出现特异性扩增带与非特异性扩增带。非特异性条带的出现，其原因：一是引物与靶序列不完全互补、或引物聚合形成二聚体。二是Mg2+离子浓度过高、退火温度过低，及PCR循环次数过多有关。其次是酶的质和量，往往一些来源的酶易出现非特异条带而另一来源
PCR反应结束无扩增曲线出现的原因
扩增效率问题：电泳检测qPCR反应产物，观察是否有目的条带出现。如果没有，则需要逐一排查引物、模板以及反应条件问题；确认引物是否降解：长时间未用的引物应先通过 PAGE 电泳检测完整性，以排除引物降解的可能性；模板浓度太低或目标基因表达丰度过低：减少稀释度，重复实验，一般未知浓度的样品。通常基因表达
PCR假阴性的原因分析及解决办法
假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因：引物设计不合理，酶失活或酶量不足，模板量太少，退火温度不合适，循环次数过少，产物未及时电泳检测等。解决方法有：重新设计引物，增加酶量或调换酶，增加模板量，调整退火温度，增加循环次数，及时检测扩增产物，一般在 48h 以内进行。
尿液分析仪检测出现假阴性的原因分析
假阴性 。即镜检阳性，尿液分析仪潜血反应阴性，其常见原因有： （1）食物或药物的影响：由于饮食或药物使尿液呈碱性时，RBC溶解破裂，形成褐色颗粒，潜血反应呈阳性，而镜检呈阴性。 （2）VitC 尿液中大量存在时，能竞争性夺取反应产生的氧，引起假阴性反应。 （3）高比重、高蛋白尿样降低了试剂
pcr－阴性对照出现条带，怎么办
这个是分子实验室常见问题，有人说是由于气溶胶引起的假阳性。首先要防止污染，其次要优化PCR体系及反应程序。
为什么pcr阴性总有条带出现
提高退火温度，或重新设计引物，或者是阴性对照被污染，当然还有其它好多小原因，要是还没解决，请细说并追问。
基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个
聚合酶链式反应（PCR）PCR不扩增的原因
1、PCR扩增体系问题。用其他正在进行的且扩增正常的模板和引物证明PCR扩增体系没有问题,即PCR反应混合物、水、取液器、PCR仪、操作等都是好的(阳性对照)2、引物问题。用以前扩增产物做模板(稀释50倍),证明引物没有问题3、只是模板问题了。因为样本降解的可能性比引物降解的可能性高得多。也可能是样
pcr出现非特异性扩增原因分析
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质
基因扩增PCR的扩增出现片状拖带或涂抹带的原因分析
PCR扩增有时出现涂抹带或片状带或地毯样带。其原因往往由于酶量过多或酶的质量 差,dNTP浓度过高,Mg2+浓度过高,退火温度过低,循环次数过多引起。其对策有:减少酶量,或调换另一来源的酶。②减少dNTP的浓度。适当降低Mg2+浓 度。增加模板量,减少循环次数。
PCR常见问题总汇(一）
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模
PCR技术（五）：常见问题分析与对策
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模
高速离心机－PCR问题的总结
pcr产物的电泳检测时间一般为48h以内，有些zui好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。假阴性，不出现扩增条带 pcr反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及活性 ④pcr循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质
PCR结果分析
1、假阴性，不出现扩增条带PCR反应的关键环节有：①模板核酸的制备；②引物的质量与特异性；③酶的质量及；④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。（1）模板①模板中含有杂蛋白质，②模板中含有Taq酶抑制剂，③模板中蛋白质没有消化除净，特别是染色体中的组蛋白，④在提取制备模板时丢失过多，
PCR常见问题总（1）
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内，有些最好于当日电泳检测，大于48h后带型不规则甚致消失。 假阴性，不出现扩增条带 PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备，②引物的质量与特异性，③酶的质量及， ④PCR循环条件。寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究。 模板：①模板中含有杂蛋白质，②模