恒温核酸扩增技术通量
在实际的产业化中，分子诊断仪器的通量往往至关重要。对于qPCR而言，由于引物设计的成熟和荧光通道的多样性，往往可以比较好的实现高通量检测。由于恒温核酸扩增技术引物设计较为困难，单一的反应温度会造成引物和模板，引物与引物之间的非特异性链接和扩增，使得恒温扩增的检测通量受到限制。但同时也得益于反应温度的单一化，我们可以通过设计多个反应槽来弥补通量不足的遗憾。 过去几十年间，若干恒温核酸扩增技术发展迅速，如环介导恒温扩增（LAMP）技术，链置换（SDA）恒温扩增，解旋酶（HDA）DNA 恒温扩增，重组酶聚合酶（RPA）扩增和切刻内切酶（NEAR）恒温扩增。......阅读全文
恒温核酸扩增技术通量
在实际的产业化中，分子诊断仪器的通量往往至关重要。对于qPCR而言，由于引物设计的成熟和荧光通道的多样性，往往可以比较好的实现高通量检测。由于恒温核酸扩增技术引物设计较为困难，单一的反应温度会造成引物和模板，引物与引物之间的非特异性链接和扩增，使得恒温扩增的检测通量受到限制。但同时也得益于反应温
恒温核酸扩增技术概述
恒温核酸扩增技术是利用各种酶，引物，脱氧核苷三磷酸（dNTP），模板DNA以及缓冲液的混合物在同一温度下温浴一定时间，让不同的酶与DNA进行反应，从而达到特定DNA片段的扩增。与传统的PCR核酸扩增相比，恒温核酸扩增不需要在不同温度之间的转换，只要保持酶反应的最佳温度，37℃、42℃、56℃或6
恒温核酸扩增技术的扩增速度
由于恒温核酸扩增只需要在一个温度下进行，相比较于PCR不同温度之间的循环，恒温扩增不需要反复的升温降温过程，有些恒温扩增的速度是快于PCR的扩增速度的。例如：环介导恒温核酸扩增（LAMP），重组聚合酶扩增法（RPA）以及切刻内切酶恒温扩增（NEAR）。目前英国公司optigene已经成功的改造了
恒温核酸扩增技术的特异性
由于恒温核酸扩增的整个反应是没有温度的变化，模板DNA双链的打开，引物与互补片段的链接以及新片段的合成都是在同一温度下进行的。这就造成某些情况下的反应体系里引物之间形成非特异性互补，扩增，最后造成假阳性的结果。与PCR相比，恒温核酸扩增更易出现假阳性的结果。
恒温核酸扩增技术与传统PCR对比
和传统的PCR技术相比，恒温核酸扩增不仅仅是缩短了核酸扩增的时间，更重要的是核酸扩增摆脱了对硬件的束缚。PCR技术原理是利用94℃高温使DNA双链解开，并在耐高温的DNA聚合酶的作用下扩增DNA片段。PCR反应至少需要2个不同的温度使DNA片段得到特异性的扩增。恒温核酸扩增是利用各种酶与DNA之
恒温核酸扩增技术对引物的高要求
自80年代PCR技术发明以来，PCR引物的设计已经相当成熟，市场上有很多关于PCR引物设计的软件可供使用。所以设计一对好的PCR的引物并不困难。恒温核酸扩增刚好相反。一对或者几对好的引物对任何一种恒温核酸扩增技术都是相当关键的，可是由于恒温核酸扩增技术各不相同，引物设计方法很难相互借鉴。目前虽然
核酸扩增—链置换扩增技术(SDA)
SDA是一种基于酶促反应的DNA体外等温扩增技术，采用标记的两种不同荧光基团的探针。在SDA过程中，该探针被掺入到双链扩增产物中，由限制内切酶的酶切使淬灭基团与荧光基团分开，从而释放荧光，用荧光偏振检测法定量检测。SDA较之PCR有更高的扩增效率，耗时仅30min。其基本系统包括一种限制性核酸内
核酸扩增—转录介导的扩增技术(TMA)
TMA是一种利用RNA聚合酶和逆转录酶在约42℃等温条件下来扩增RNA或DNA的技术，其原理是带有T7 RNA聚合酶识别的启动子序列的启动子引物与模板退火经反转录形成RNA-DNA杂交分子，被反转录酶的RNase H活性水解形成单链RNA，然后与引物2退火，通过反转录合成双链DNA，在T7 RN
EMA -常温核酸扩增技术介绍
基于分子仿生学的原理，把生物体内(如大肠杆菌，酵母或人体等)多酶介导的核酸复制机理在体外再现，使痕量的核酸靶标在普通生物耐受的条件下(常温下)进行快速的扩增，同时利用特异性荧光探针结合扩增产物，通过荧光检测仪实时监测荧光信号，实现核酸靶标的快速扩增和检测。 常温核酸扩增技（简称EMA技术），是由点晶
核酸等温扩增技术及其应用
据微生物学家的估计，采用培养技术，仅有约1%的细菌可以培养。在过去的一个世纪里，以聚合酶链反应（PCR）为代表的基于核酸的检测技术发展迅速，为其他病原体的精确检测诊断提供了可能。毋庸置疑，Kary Mtlllis发明的PCR技术是20世纪80年代分子生物学领域的一项革命性突破。也许他本人当时也没有想