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大鼠胚胎神经嵴干细胞的直接分离和培养

1、培养用液:HBSS。含有10mmol/L Hepes 的无钙、镁离子的PBS(ph7.4)。酶消化液。用HBSS配制,含0.025%胰蛋白酶和1mg/ml III型的胶原酶。细胞分散液。含有1mg/ml BSA、10mmol/L hepes、50U/ml青霉素和50/ml链霉素、25ug/mlDNA酶1的L15培养基。生长培养基。为低糖DMEM培养基,含有15%鸡胚浸出液、20ng/ml重组人bFGF、1%N2添加剂、2%B27添加剂、50umol/L2-巯基乙醇、35mg/ml维甲酸、50U/ml青霉素和50ug/ml链霉素。多聚D-赖氨酸溶液。先用培养用水配置成10mg/ml的储存液,-20℃保存。使用时用硼酸盐缓冲液稀释成10ug/ml的浓度。易生物试剂库: 2、细胞的分离和培养步骤: 孕期14-17天SD大鼠,用戊巴比妥(65mg/kg)腹膜下注射麻醉,腹部用75%乙醇消毒后,打开腹腔,取出子宫,小心的剪开子......阅读全文

大鼠胚胎神经嵴干细胞的直接分离和培养

1、培养用液:HBSS。含有10mmol/L Hepes 的无钙、镁离子的PBS(ph7.4)。酶消化液。用HBSS配制,含0.025%胰蛋白酶和1mg/ml III型的胶原酶。细胞分散液。含有1mg/ml BSA、10mmol/L hepes、50U/ml青霉素和50/ml链霉素、25ug/mlD

胚胎干细胞的分离与培养

分离囊胚的内细胞群(ICM)细胞,再进行体外培养即可取得胚胎干细胞。目前,取得胚胎干细胞的方法已有一定改进,但仍无可避免地会杀死胚胎。囊胚由两大部分构成:处于外围的滋养层以及处于内部的内细胞群。滋养层细胞会分化为胚胎外的组织(胎盘等),而内细胞群则会分化为胚胎的各种结构。最早期分离胚胎干细胞的方法是

大鼠、小鼠心脏干细胞(祖细胞)分离培养方法

心脏病是引起人类死因的一种代表性疾病,如果失去了心肌细胞,就会引起心力衰竭等心脏疾病。心肌细胞几乎没有再生能力,一旦失去就不能再生。从前认为心脏当中没有干细胞,所以心肌没有再生能力,但是近年的研究表明,成体心脏内部也会存在一些心肌干细胞。细胞培养操作:1.摘取出心脏,去掉心脏包膜,把心尖部分剪下来(

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

原代、传代培养 实验材料 孕13d的昆明种二级小鼠 试剂、试剂盒 胎牛血清

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

方法:神经干细胞的培养①原代细胞的培养:取孕13.5天昆明种二级孕小鼠,引臼脱颈处死,碘酒、乙醇消毒腹部,逐层剖开腹部皮肤、肌肉、腹膜,取出子宫,放入盛有D1-SGH液的器皿中。仔细剥离胎膜、羊膜,暴露胎鼠,剪开颅骨,取出胎鼠脑组织并转移至另一盛有D1-SGH液的器皿中,体视显微镜下剥离脑膜,分离胎

胚胎小鼠纹状体神经干细胞的分离培养及鉴定

原代、传代培养实验材料孕13d的昆明种二级小鼠                                                          试剂、试剂盒胎牛血清                                                          

新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验_分离及培养程序

实验材料Sprague Dawley 幼鼠试剂、试剂盒胰酶液乙醇仪器、耗材搅拌台烧杯实验步骤组织消化和分离细胞1. 在细胞操作间内,放一个加热搅拌台,上放一个装有 100 ml 灭菌水的容量 600 ml 的烧杯,加热至 37℃。2. 准备胰酶液。用水浴或温箱使胰酶液温度保持在 37℃。3. 做一个

胚胎干细胞的来源和培养的技术和条件

体外受精会产生多个胚胎。这会产生一些过剩的胚胎不用于临床或不适合植入患者体内,因此可以在征得供体同意的情况下可能获得捐赠。人类胚胎干细胞可以从这些捐赠的胚胎中获得,或者还可以使用患者的细胞和捐赠的卵子从克隆的胚胎中提取。 胚胎囊胚期的内细胞团(感兴趣的细胞)与滋养层细胞分离,滋养层细胞将来分化为胚外

新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验

分离及培养程序             实验材料 Sprague Dawley 幼鼠 试剂、试剂盒

新生大鼠心脏细胞的分离和培养实验

实验材料 Sprague Dawley 幼鼠试剂、试剂盒 胰酶液乙醇仪器、耗材 搅拌台烧杯实验步骤 组织消化和分离细胞1. 在细胞操作间内,放一个加热搅拌台,上放一个装有 100 ml 灭菌水的容量 600 ml 的烧杯,加热至 37℃。2. 准备胰酶液。用水浴或温箱使胰酶液温度保持在 37℃。3.