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由NAD+还原反应测定OGDHC总活性的实验

实验方法原理 实验材料 OGDHC试剂、试剂盒 磷酸钾NAD+焦磷酸硫胺素MgCl2α-酮戊二酸二硫赤藓糖醇辅酶 A仪器、耗材 分光光度计实验步骤 实验所需「试剂」具体见「其他」0.98 ml 实验混合物0.02 ml 酶样品37 ℃ 时,于 340 nm 处吸收值发生变化,ε340=6.3×103 l/(mol·cm)。注意事项 其他 试剂:0.1 mol/L 磷酸钾,pH 7.60.1 mol/L NAD+(游离酸,Mr=663.4;663 mg 溶于 10 ml 水中)0.01 mol/L 焦磷酸硫胺素(ThDP,脱羧辅酶,Mr=460.8,46.1 mg 溶于 10 ml 水中)0.1 mol/L MgCl2(MgCl2·6H2O,Mr=203.3,203 mg 溶于 10 ml 水中)0.5 mol/L α-酮戊二酸(α-酮戊二酸盐,2-氧代戊二酸,二钠盐,Mr=190.1,0.95 g 溶于 10 ml 水中)0.1......阅读全文

ELISA技术综述

  ELISA原理   ELISA利用抗原抗体之间专一性结合之特性,对标本进行检测;由于结合与固体承载物(一般为塑胶孔盘)上之抗原或抗体仍可具有免疫活性,因此设计 其结合 机制後,配合酵素显色反应,即可显示特定抗原或抗体是否存在,并可利用显色之深浅进行定量分析。根据待测样品与结合机制的不同,ELI

NK细胞活性测定:LDH法

实验方法原理活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化合物。在酶标仪上

酶的提取、分离、纯化及其活力测定

一、实验目的酶是植物体内具有催化作用的蛋白质,植物体内的生化反应,一般都是在酶的作用下进行的,没有酶的催化反应,植物的生命也就停止了,因此对酶的研究是阐明生命现象本质中十分重要的部分。为要研究酶首先要将酶从组织中提取出来,加以分离、纯化,不同的研究目的对酶制剂的纯度要求也不相同,有些工作只需要粗的酶

NK细胞活性测定:LDH法原理和实验步骤

一、原理 活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH 可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT 接受H+被还原成紫红色甲月赞类化

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理 硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-的

硝酸还原酶活性的测定实验

实验方法原理:硝酸还原酶是植物氮素代谢作用中的关键酶,与作物吸收和利用硝态氮的能力相关。它催化NO3-还原为NO2-的反应:NO3-+NADH+H+→NO2-+NAD++H2O反应产生的NO2-可从组织内渗透到外界溶液中,定时测定一定的反应溶液中NO2-含量的变化情况则可了解此酶的活性大小。NO2-

生化试剂应用常见问题的探讨

试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标之一,但不能反映试剂质量的全部。试剂成份、纯度、用量及稳定性,才是保证试剂质量的关键所在。目前市售的一些试剂具有抗干扰作用,主要是通过加入抗干扰物质或使用新的色素原以避免内源性物质的干扰。但值得注意的是:一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时,会带来样品含量真实性的

生化试剂常见问题的解决方法

试剂空白吸光度是反映试剂质量的指标,但不能反映试剂质量的全部。试剂成份、纯度、用量及稳定性,才是保证试剂质量的关键所在。目前市售的一些试剂具有抗干扰作用,主要是通过加入抗干扰物质或使用新的色素原以避免内源性物质的干扰。但值得注意的是:一些试验项目在消除内源性物质干扰的同时,会带来样品含量真实性的变化

ATP的生成、储存和利用

一、ATP的生成方式  体内ATP生成有两种方式  (一)底物水平磷酸化(substrate level phosphorylation) 底物分子中的能量直接以高能键形式转移给ADP生成ATP,这个过程称为底物水平磷酸化,这一磷酸化过程在胞浆和线粒体中进行,包括有:   (二)氧化磷酸化(oxid

乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒使用说明

乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒产品编号产品名称包装C0017乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒500次产品简介:一基的乳酸脱氢酶细胞毒性检测试剂盒(LDH Cytotoxicity Assay Kit),也称乳酸脱氢酶检测试剂盒(LDH Assay Kit)或乳酸脱氢酶释放检测试剂盒(LDH Relea

CheKineTM NAD激酶NADK活性检测五种试剂盒比色法的对比

与抑郁症|溶血性贫血|癌症治疗等相关的几个检测指标G6PDH,NADK,Na⁺/K⁺-ATP酶、MAO等等目前是非常火热的话题,而今天要说的5款相关试剂盒,也是大家非常想要了解的相关科研项目,一起来看看哦~ 一、CheKineTM 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)活性检测试剂盒(比色法

Science丨生长因子调控NADP+合成的新途径

  细胞代谢活动受营养物质、外源性生长因子、细胞因子和激素等的影响,从而形成了错综复杂又纷繁多变的信号通路。其中经典的信号通路就有PI3K-Akt-mTOR:生长因子通过刺激雷帕霉素复合物1(rapamycin complex 1,mTORC1)信号网络从而间接调节下游转录因子进而促进合成代谢,而m

什么是工具酶呢?工具酶都有哪些?

作为试剂用于测定化合物浓度或酶活力的酶称为工具酶。对于底物或产物不能直接测定或难于准确测定的酶促反应,采用酶耦联法测定。1.NAD(P)十或NAD(P)H偶联的脱氢酶及其指示反应。2.偶联H2O2的工具酶及其指示反应有些酶作用于底物时,可使其氧化产生H2O2,在POD的作用下使色素原氧化显色进行测定

常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——检测

实验方法原理常规聚丙烯酰胺凝胶电泳后的检测,对于不同的目的,应采用不同的检测方法。由于这种电泳方法不破坏蛋白质的生物活性,所以可选用的检测方法很多。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、早期染色方法用染料和生物大

常见发光免疫分析技术的比较

免疫学技术的迅速发展对精度的要求越来越高,一般的酶免检测技术已逐渐无法适应这种形势的需要。现今发展的主流已不再是用放射性同位素标记的测定方法(避免污染环境及对人体损害),而是转向于能在任何地方操作的快速均相和固相测定,最终趋向于能够检测到皮克或10负18摩尔级的、非同位素的、自动或半自动的实验室测定

常见发光免疫分析技术的比较

发光免疫分析是一种灵敏度高、特异性强、检测快速及无放射危害的分析技术。70年代末以来得到了迅速发展,目前在国际上已经实现商品化和产业化的发光免疫分析产品,基本上可以分为:化学发光、时间分辨荧光(也称时间延迟光致发光)、电化学发光(也称场致发光和电致发光)几种。   &n

硝酸还原酶活性的测定

一、原理 硝酸还原酶是植物  氮素作用中的关键性酶,与作物吸收和利用N肥有关的不同品种,年龄、器官组织以及环境条件对硝酸还原活性都有影响,硝酸还原酶作用于NO3使还原为NO2 NO3-+NADH+H→NO2- +NAD+H2O 产生的NO2- 可以从组织内渗到外界溶液中,并积累在溶液中因此

分子光谱学术会议巨献:2018拉曼光谱新技术及应用大全

  2018年10月20日,第二十届全国分子光谱学学术会议暨2018年光谱年会开幕式暨40周年庆典在青岛举办(相关报道:庆祝中国光谱40年 构建中国光谱新时代)。在第一天的大会报告之后(相关报道:古人学问无遗力 今有分子光谱百家鸣),组委会也安排了精彩分会报告。分析测试百科网作为合作媒体为您带来拉曼

酶活性的测定实验

酶活性的测定可应用于:(1)酶动力学的研究;(2)酶抑制的研究。实验方法原理1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位时间转化的底物摩尔数=速率×反应体积。酶活性是存在的活性酶量的量度,取决于指定的条件。SI单位是katal,1 katal = 1 mol /s,更实际

酶活性的测定实验

连续性检测             实验方法原理 1.酶的量或浓度可以用摩尔量表示,或者用酶单位的活性表示。酶活力=每单位

cDNA 文库的构建

            实验材料 λ噬菌体臂 大肠杆菌菌株 用于λ噬菌体的包装抽提物 试剂、试剂

超氧化物歧化酶(SOD)活性的测定

【实验原理】SOD是含金属辅基的酶,它催化以下反应:02 - +02 - + 2H+ H2 02 +02由于超氧阴离子自由基02 - 寿命短,不稳定,不易直接测定SOD活性,而采用间接的方法。目前常用的方法有3种, 包括氮蓝四唑(NBT)光化还原法,邻苯三酚自氧化法,化学发光法。本实验主要介绍光化还

NK细胞活性测定:LDH法

实验概要活细胞的胞浆内含有LDH。正常情况下,LDH不能透过细胞膜,当细胞受到NK细胞的杀伤后,LDH释放到细胞外。LDH  可使乳酸锂脱氢,进而使NAD还原成NADH,后者再经递氢体吩嗪二甲酯硫酸盐(PMS)还原碘硝基氯化四氮唑(INT),INT  接受H+被还原成紫红色甲月赞

苯丙氨酸(PKU)检测试剂盒使用说明(一)

【产品名称】通用名称:苯丙氨酸检测试剂盒商品名称:苯丙氨酸检测试剂盒英文名称:Phenylalanine (PKU) neonatal Screening Assay 【包装规格】480人份/盒 【预期用途】此试剂盒可用于新生儿血斑中L-苯丙氨酸的体外定量检测。仅供新生儿苯丙酮尿

NK细胞活性检测实验步骤

  细胞毒检测技术包括补体依赖细胞毒试验、NK细胞介导的细胞毒试验和特异性CTL活性检测,常用的实验技术有后两种。NK细胞(natural killer cell)是在天然免疫系统发挥主要作用的效应细胞,可直接杀伤病毒感染的靶细胞和某些肿瘤细胞。而细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymp

细胞诱导型一氧化氮合成酶活性比色法定量检测试剂盒...

细胞诱导型一氧化氮合成酶活性比色法定量检测试剂盒使用说明主要用途YIJI细胞诱导型巨噬细胞一氧化氮合成酶(iNOS /NOS2/mNOS)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过诱导型一氧化氮合成酶、硝酸还原酶和乳酸脱氢酶反应系统,在诱导型一氧化氮合成酶特异性抑制剂存在与否的情况下,由底物L-精氨酸

血液3-羟-3-甲戊二酰辅酶A(HMG-COA)还原酶光谱法

实验概要本实验介绍了血液3-羟-3-甲戊二酰辅酶A(HMG-COA)还原酶光谱法的操作流程,该方法是一种旨在运用3-羟-3-甲戊二酰辅酶A作为底物,在还原酶的催化下,还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光谱法来测定血液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。实验原理甲

蛋白质与多肽激素的放射免疫分析

蛋白质与多肽激素的放射免疫分析第一节 概述  1960年,美国学者Yalow 和Berson 创立了放射免疫分析(Radioimmunoassay,RIA),并首先用于糖尿病人血浆中胰岛素含量的测定。这是医学和生物学领域中方法学的一项重大突破,开辟了医学检测史上的一个新纪元。它使得那些原先认为是无法

组织学研究方法

(一)一般光学显微镜术应用一般光学显微镜(简称光镜)观察组织切片是组织学研究的最基本方法。取动物或人体的新鲜组织块,先用固定剂(fixative)固定(fixation),使组织中的蛋白质迅速凝固,防止细胞自溶和组织腐败。常用的固定剂如洒精、甲醛、醋酸、苦味酸、四氧化锇等,一般常将几种固定剂配制成混