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2014年测序、克隆、细胞分析等技术展望

新一代测序 新一代测序(NGS)技术一路走来,逐渐褪下其神秘面纱,进入越来越多的实验室。随着时间的推移,NGS系统从“高端大气上档次”的大型平台演化成满足个性化需求的台式测序仪。MiSeq、Ion Torrent和454 GS Junior这些仪器的上市,也推动了测序平台的普及。同时,MiSeqDx测序仪通过美国FDA认证,成为行业内一大里程碑事件,让NGS的临床应用成为现实。2014年,NGS技术将继续发展,可能会为我们带来更多惊喜。 1.纳米孔测序走出阴影:Oxford Nanopore Technologies公司沉寂了一年之后,终于在11月底启动MinION测序仪的早期试用计划。2014年初,他们会将仪器发送给客户。据称,这个系统不需要文库制备,成本极低,且读长高达几十kb。这究竟是炒作,还是事实?答案将在明年揭晓。届时我们将看到许多有关纳米孔测序仪的数据。 2.“黑客”改造测序仪:随着......阅读全文

打破疫苗研制的“天花板”——可辨别细胞特征的先进工具

  每次我们达到一个新的“天花板”,便会在几年内打破它。   疫苗是科学对抗感染的胜利。它们击败了世界卫生组织在1980年宣布已被彻底根除的天花,并且大幅减少了很多其他传染疾病的死亡人数。   但这并非全部。美国国立卫生研究院疫苗研究中心免疫学家Mario Roederer表示,寻找对抗诸

Nature子刊:倾听细胞的耳语

  在拥挤喧哗的酒吧中很难好好聊天,所以大家都选择在安静的小咖啡馆里促膝长谈。不过科学家们现在可以在复杂的细胞培养环境中,选择性倾听细胞间的“对话”。 细胞通过分泌蛋白来相互交流并对环境改变进行应答,分泌蛋白还能帮助细胞迁移。位于德国海德堡的著名欧洲分子生物学实验室EMBL与德国癌症研究中心DK

Nature子刊:倾听细胞的耳语

  在拥挤喧哗的酒吧中很难好好聊天,所以大家都选择在安静的小咖啡馆里促膝长谈。不过科学家们现在可以在复杂的细胞培养环境中,选择性倾听细胞间的“对话”。 细胞通过分泌蛋白来相互交流并对环境改变进行应答,分泌蛋白还能帮助细胞迁移。位于德国海德堡的著名欧洲分子生物学实验室EMBL与德国癌症研

sapphire检测残留的宿主细胞蛋白HCP的方法

  许多生物制品例如抗体,重组蛋白,疫苗等的制备还是通过生物体系细胞工程合成,尽管采用多种纯化方式,在生物药物中还会有微量的宿主蛋白残留(HCP),会对药品的安全性及药性产生影响。   一、HCP的概念   HCP:Host cell protein,宿主细胞蛋白   疫苗、抗体、重组蛋白药物

sapphire检测残留的宿主细胞蛋白HCP的方法

许多生物制品例如抗体,重组蛋白,疫苗等的制备还是通过生物体系细胞工程合成,尽管采用多种纯化方式,在生物药物中还会有微量的宿主蛋白残留(HCP),会对药品的安全性及药性产生影响。一、HCP的概念HCP:Host cell protein,宿主细胞蛋白疫苗、抗体、重组蛋白药物等生物制品的生产主要利用某些

形形色色的蛋白标签(一)

  一提到蛋白研究,首先跳入脑海的当然是抗体。的确,很多蛋白实验都离不开抗体。然而,即使抗体公司时不时推出新产品,但许多蛋白还是没有相应的抗体,我们只能望电脑兴叹。而且,也有很多抗体无能为力的情况,比如观察蛋白在细胞内的运输。所幸,各种各样的蛋白标签让我们能够从容应对这些挑战。   遗传标签  

技术强则药物强-单个B细胞抗体制备技术

  如今,单克隆抗体药物以其独特的作用机制及高效性,在肿瘤和自身免疫疾病的治疗中发挥了不可估量的作用,成为全球的研发热点,目前已有2400个单克隆抗体药物处于研发及商业化阶段。   1975年杂交瘤技术问世[1]。1986年鼠源单克隆抗体药物Muromonab的上市拉开了单克隆抗体发展的序幕。

循环肿瘤细胞的检测方法

  近年来随着现代医学研究技术的进步和CTC临床应用价值凸显,许多研究机构和研发团队都在推出不同的CTC检测技术。由于血液中CTC的含量极低,目前主流的检测方法是先捕获(富集)后检测,少量方法是不捕获(富集)直接检测。CTC检测技术包括CTC的富集(分离)和CTC的分析鉴定(识别)。本篇文章将介绍C

活体生物发光成像技术的最新进展

活体动物体内光学成像(Optical in vivo Imaging)主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进

SCIENCE ADVANCES:单细胞Western揭秘胚胎发育异质性

  近日,美国加利福尼亚大学伯克利分校的科学家,利用单细胞Western技术在期刊SCIENCE ADVANCES(IF:12.804)发表文章:Assessing heterogeneity among single embryos and single blastomeres using ope

SCIENCE ADVANCES:单细胞Western揭秘胚胎发育异质性

  近日,美国加利福尼亚大学伯克利分校的科学家,利用单细胞Western技术在期刊SCIENCE ADVANCES(IF:12.804)发表文章:Assessing heterogeneity among single embryos and single blastomeres using ope

免疫学检验——免疫细胞的分离及其表面标志检测技术

  第一节  免疫细胞的分离  一、外周血单个核细胞的分离  将2份6%聚蔗糖蒸馏水溶液与1份34%泛影葡胺生理盐水溶液混合,其比重为1.077±0.002,可作为常规的淋巴细胞分离液,即Ficoll分离液。  主要用于分离外周血中单个核细胞,是一种单次密度梯度离心分离法,其分布由上到下依次为:稀释

2017年5月Science期刊不得不看的亮点研究

  5月份即将结束了,5月份Science期刊又有哪些亮点研究值得学习呢?小编对此进行了整理,与各位分享。  1.Science:重磅!开发出延缓癌细胞生长的新方法  doi:10.1126/science.aai9372  癌症是一种非常复杂的疾病,但是它的定义是相当简单的:细胞发生异常和不受控制

从胚胎的角度研究肿瘤发生问题

  一直以来,科学家们在研究某个基因的功能时无非就只有两种方法,要么就是敲除这个基因,或者下调其表达量,要么就是提高其表达量。在20世纪90年代发现的RNA干扰技术又给科学家们提供了一条新的研究基因功能的途径,RNA干扰技术可以通过小RNA分子(small RNA molecule)与目标m

免疫细胞化学在神经科学中的应用

免疫细胞化学的发展对许多领域的研究起到很大的推动作用,在神经科学的研究中尤为突出。本章 仅就免疫细胞化学在神经科学的基础研究方面的应用做一简要介绍。  一、确定神经递质的性质、定性和分布  早期的神经科学工作者应用传统的神经解剖学研究方法如甲基蓝染色法、镀银染色法等对中枢及外周神经系统的结构做了大量

蛋白质组最新研究进展

  蛋白质组(Proteome)的概念最先由Marc Wilkins提出,指由一个基因组,或一个细胞、组织表达的所有蛋白质。 蛋白质组的概念与基因组的概念有许多差别,它随着组织、甚至环境状态的不同而改变。 在转录时,一个基因可以多种mRNA形式剪接,一个蛋白质组不是一个基因组的直接产物,蛋白质组中蛋

Nature Methods:2016年最值得关注的八大技术

  《Nature Methods》盘点2015年度技术,选出了最受关注的技术成果:单粒子低温电子显微镜(cryo-EM)技术。 除此之外,也整理出了2016年最值得关注的几项技术,分别为:细胞内蛋白标记(Protein labeling in cells)、细胞核结构(Unraveling nuc

癌症免疫细胞治疗知识:CAR-T与TCR-T的区别在哪里?

  肿瘤免疫治疗,实际上分为两大类。一种把肿瘤的特征“告诉”免疫细胞,让它们去定位,并造成杀伤;另一种是解除肿瘤对免疫的耐受/屏蔽作用,让免疫细胞重新认识肿瘤细胞,对肿瘤产生攻击(一般来说,肿瘤细胞会巧妙伪装,逃脱免疫的监视)。  第一种情况,因为要利用机体自身的免疫细胞,因此,目前多为免疫细胞治疗

ELISPOT酶联免疫斑点分析简介

  ELISPOT 技术简介    随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 , 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法( ELISA )检测体液中游离的细胞因子( CK )或抗体,但由于游离的循环抗体或 CK 的半哀期不同,使之在体液中

ELISPOT酶联免疫斑点分析简介

  ELISPOT 技术简介    随着酶联免疫分析技术在医学及生物学领域的广泛应用 , 使体外检测各种细胞因子及抗体研究有了新的突破。在研究免疫应答机制时以往常用用酶联免疫吸附法( ELISA )检测体液中游离的细胞因子( CK )或抗体,但由于游离的循环抗体或 CK 的半哀期不同,使之在体液中

蛋白芯片的基本原理及技术研究现状

作者:陈玮莹 来源:《国外医学临床生物化学及检验学分册》汕头大学医学院 陈玮莹 综述 温博贵 随着分子生物学芯片技术研究工作的进一步深入开展,NDA芯片技术已经被逐渐应用于对生物样品中的各种已知或未知的核酸序列表达的检测和比较研究。但是,作为生物体细胞中实施化学反应功能成分的蛋白质,其相当部分与活性

《科学家》期刊:2018 top 10创新产品

随着大数据和全基因组测序的发展成熟和大量研究的广泛开展,有时不免让人觉得研究人员将他们的显微镜(microscope)更换为宏观镜(macroscope)。但是,《科学家》杂志举办的2018年十大创新竞赛讲述了一个不同的故事:单个细胞。在《科学家》杂志的独立评审团评选出的2018年十大创新产品中,它

无细胞蛋白表达技术介绍

无细胞蛋白表达技术是指用含有蛋白合成必需的组分(核糖体,转运RNA,氨酰合成酶,启动/延伸/终止因子,三磷酸鸟苷,ATP,Mg2+和K+)的细胞裂解物在体外进行蛋白合成。与传统的基于细菌或真核细胞的蛋白表达系统相比较,无细胞蛋白表达系统具有独特的优势,包括节约时间、提高具有功能的、可溶的、全长蛋白的

干货|了解这些,养好细胞不是事儿!!!

  抗体药物是目前生物技术药物研究中最为活跃的领域,特别是在肿瘤和自身免疫性疾病等方面的临床应用,更是大放异彩。随着临床需求的增加,单克隆抗体药物发展迅速,FDA已批准的抗体药物多达70多个,抗体药物销售量年增长率基本在10%以上,大大高于制药行业平均水平,其市场规模已经达到千亿美元。  我国针对单

ImageXpress Micro高内涵3D细胞球成像检测手册(一)

一、概述1 当前细胞培养和观察的常用方法十九世纪起,当显微镜出现后,人们就开始尝试对细胞结构进行观察,并在二十世纪发展出细胞的培养技术。单层细胞的培养相对方便,而且商业化的显微镜非常适合于平面的、薄样品的观察,所以,在二十世纪的中后期,人们普遍采用 2D 的细胞培养方法,进行生物学的研究,以及进

【盘点】定量蛋白组学将在未来10年飞速发展

  人类基因组计划的成功实施,我们已初步掌握了自身的遗传信息。但阐明人类基因组整体功能的功能基因组学仍任重而道远。蛋白质作为生命活动的"执行者",自然成为生命科学研究的新"宠儿"。几乎在所有生命科学领域内,科学研究工作者都需要对细胞、组织或完整生物体的蛋白进行定性描述或定量检测。对一种细胞、组织或完

检测细胞凋亡的实验方法比较-4

六、Caspase-3活性的检测 Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活,活化的Caspase-3由两个

看得见的蛋白互作新技术Duolink PLA

  现今,科技发展的齿轮正在高速运转,每隔2-3年就会出现一个重大的技术变革引领生命科学走向更精细、更微观、更真实的水平,这其中也包括蛋白的研究。在疾病的致病机理、分子机制、信号通路、药物筛选以及新型诊断标志物的发现中,传统的蛋白研究“金标准”方法如Co-IP、Western blot、ELISA、

实现超滤富集!色谱层析方法达到最好的分离能力

  50-100KDa的膜截留的超滤技术是早期IgG的纯化技术中的难点之一。硫酸聚丙烯酰胺凝胶电泳结果显示,大部分宿主细胞蛋白的分子量要小于该滤膜孔径,因此,IgG能被有效截留。  同时浓缩和更改缓冲液有利于后续优化步骤。正是这一特点使该技术成为捕获LgG蛋白最合适的候选方法,然而事实上作用效果并没

流式细胞术在高等植物研究中的应用(一)

流式细胞术(Flow cytometry,简称FCM)是20世纪70年代发展起来的一种对细胞的物理性质及化学性质,如细胞大小、内部结构、DNA、RNA、蛋白质、抗原等进行快速测定并可分类收集的技术。该技术超越了传统显微分析技术,能在瞬间对大量细胞进行准确的分析。这种快速有效的细胞分析技术已广泛应