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酶活性测定条件的选择和限定2

曲线A:V对pH作图曲线B:酶先在pH5及pH8预孵育后,在pH6.8测活性 氢离子可以通过多种途径影响酶催化反应。如在脱氢酶反应中往往需要氢离子参加,也可能产生氢离子,从理论上可以将氢离子看成是该反应的底物和产物之一。此外,当pH变化时,可影响到底物、酶、酶-底物复合物的解离状态和构型,甚至还可能影响到各种辅因子,从而影响酶活性。 PH对酶还有一个重要的作用,就是影响酶的稳定性。图17-3B介绍一个有关实验。 图中曲线A是最适pH实验的结果,出现典型的钟形曲线,其最适pH为6.8,高于或低于6.8时,酶反应速度下降,下降原因可能与上述诸因素有关,但也可能由于酶稳定性下降失活所致,或者是二类原因之总和。通过曲线B的实验,可将上述二类原因分清。此时先将酶与不同pH底物缓冲液温育一段时间,此时间一般与测定时间相当,然后再将pH调回最适pH处测其活性。从曲线B可以说在pH5-6.8以及pH6.8-8.0之间酶活性的下降与酶灭活......阅读全文

常规聚丙烯酰胺凝胶电泳实验——检测

实验方法原理常规聚丙烯酰胺凝胶电泳后的检测,对于不同的目的,应采用不同的检测方法。由于这种电泳方法不破坏蛋白质的生物活性,所以可选用的检测方法很多。试剂、试剂盒丙烯酰胺单体贮液Tris-甘氨酸缓冲液贮液电极缓冲液样品缓冲液过硫醆铵浓缩胶缓冲液贮液分离胶缓冲液贮液实验步骤一、早期染色方法用染料和生物大

谷胱甘肽过氧化物酶活性比色法定量检测试剂盒使用说明

主要用途谷胱甘肽过氧化物酶(GSH PX)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过谷胱甘肽过氧化物酶和谷胱甘肽还原酶的酶偶联反应系统中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化后吸光峰值的降低,即采用比色法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。

组织谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性酶偶联反应光谱法...

组织谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性酶偶联反应光谱法定量检测试剂盒使用说明主要用途组织谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性酶偶联反应光谱法定量检测试剂是一种旨在通过谷氨酸丙酮酸转氨酶和乳酸脱氢酶的酶偶联反应系统中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值的降低,即采用光谱法来测定组织裂解样品中

血液乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒使用说明

主要用途血液乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过乙酰胆碱酯酶反应系统中释放出巯基胆碱,使用Ellman试剂后,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物,出现吸光峰值的变化,即采用比色法来测定血液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种动物和人体血液

体液黄嘌呤氧化酶活性比色法定量检测试剂盒使用说明

  体液黄嘌呤氧化酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)   主要用途   YIJI体液黄嘌呤氧化酶活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过黄嘌呤氧化酶和过氧化酶酶偶联反应系统中生成的过氧化氢,与显色染料作用后,产生醌亚胺产物所呈现的吸光峰值的变化,即采用比色法来测定体液样品中酶活性的权威而

组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明

主要用途组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过乙酰胆碱酯酶反应系统中释放出巯基胆碱,使用Ellman试剂后,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物,出现吸光峰值的变化,即采用比色法来测定细胞裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解悬

谷氨酸丙酮酸转氨酶GPT活性酶偶联反应光谱定量检测试剂

  组织谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性酶偶联反应光谱法定量检测试剂盒   产品说明书(中文版)   主要用途   组织谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性酶偶联反应光谱法定量检测试剂是一种旨在通过谷氨酸丙酮酸转氨酶和乳酸脱氢酶的酶偶联反应系统中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值

(GPT)活性酶偶联反应光谱法定量检测试剂盒使用说明

  组织谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性酶偶联反应光谱法定量检测试剂盒   产品说明书(中文版)   主要用途   组织谷氨酸丙酮酸转氨酶(GPT)活性酶偶联反应光谱法定量检测试剂是一种旨在通过谷氨酸丙酮酸转氨酶和乳酸脱氢酶的酶偶联反应系统中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)氧化后吸光峰值

血液乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒使用说明

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组织乙酰胆碱酯酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

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HOK细胞人口腔角质细胞使用说明

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食品中重金属的检测在食品安全检测中的应用

  食品,是指经过加工制作可以供人食用的物质。它包括农作物 (食食、蔬菜、水果、食用菌、茶叶 )、水产品、畜禽产品、奶制品、蜂产品、调料等。  随着经济全球化不断深入发展,人们饮食文化日益多样化,食品卫生与安全问题也让人们高度关注,环境中的空气污染、水污染、土壤污染日益严重,其中重金属污染以隐蔽的方

PCR反应条件的选择及优化

PCR技术已经在生物学研究和临床医学检验领域中得到了广泛的应用,PCR技术也日臻完善。PCR技术操作简便,特异性强,敏感度极高,正因为敏感度高,很容易受其他因素的影响,因此要得到准确可靠的反应结果,需根据不同的模板,摸索最适合的条件,配制出PCR反应试剂。聚合酶链反应必须具备下述基本条件:①模板核酸

血栓学检验临床应用中的几个问题及其理解

血栓学检验标准化的几个问题及其理解:伴随着人们生活水平的提高,心血管疾病发病率和病死率也成逐年增高的趋势,血栓栓塞性疾病做为多种系统疾病的并发症成为临床医学的研究重点。近年来,血栓止血学临床检验在出血性疾病的诊断、术前检查和抗凝治疗检测中得到了广泛应用。受益于检验医学的迅猛发展,自动化凝血仪的普及大

盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验

盘绕螺旋结构的设计和优化技巧             实验步骤 本节讨论盘

盘绕螺旋结构的设计和优化技巧实验

虽然表观上简单,盘绕螺旋(coiled coil ) 模体是高度专一的,并在理解三级结构及其形成方面具有重要意义。最常观察到的盘绕螺旋形态——平行二聚态,其一般的结构类型仍有待全面的描述。尽管如此,其结构已呈现出在某些特定位置需要某些特定类型氨基酸的严格规则。本实验来源「现代蛋白质工程实验指南」〔德

蛋白质组实验全套流程方案-1

 蛋白质组实验流程双向电泳的样品的制备样品制备原则样品制备是双向电泳中最关键的一步,将直接影响2-DE结果好坏。目前并没有一个通用的样品制备方法,尽管处理方法多种多样,但都遵循几个基本的原则:1)尽可能的提高样品蛋白的溶解度,抽提最大量的总蛋白,减少蛋白质的损失;2)减少对蛋白质的人为修饰

整理的PCR资料.供大家分享.2

引物设计简介1.寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的引物设计可以避免背景和非特异产物的产生,甚至在RNA-PCR中也能识别cDNA或基因组模板。引物设计也极大的影响扩增产量:若使用

pcr实用技巧-2

1.简介寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的引物设计可以避免背景和非特异产物的产生,甚至在RNA-PCR中也能识别cDNA或基因组模板。引物设计也极大的影响扩增产量:若使用设计粗糙

寡聚核苷酸引物的选择

1.简介    寡聚核苷酸引物的选择,通常是整个扩增反应成功的关键。所选的引物序列将决定PCR产物的大小、位置、以及扩增区域的Tm值这个和扩增物产量有关的重要物理参数。好的引物设计可以避免背景和非特异产物的产生,甚至在RNA-PCR中也能识别cDNA或基因组模板。引物设

蛋白质组技术的研究进展

大规模基因组测序计划的实施已改变生命科学的重心,在相当短的时期内,一些原核生物和某些低等真核生物的基因组序列已被测定. 1995年,流感嗜血杆菌基因组序列首次被破译,在此后不到两年的时间,近50个细菌的基因组序列已被完成. 然而,这仅仅是理解有机物功能的一个起点. 在基因组时代,许多DNA序列信息仅

蛋白质组技术的研究进展

  大规模基因组测序计划的实施已改变生命科学的重心,在相当短的时期内,一些原核生物和某些低等真核生物的基因组序列已被测定. 1995年,流感嗜血杆菌基因组序列首次被破译,在此后不到两年的时间,近50个细菌的基因组序列已被完成. 然而,这仅仅是理解有机物功能的一个起点. 在基因组时代,许多DNA序列信

蛋白质组技术的研究进展(二)

3 蛋白质组技术的支柱---鉴定技术(Identification)    如果目前分离蛋白质组的最好技术是2-DE,那么随之而来的挑战是数百数千个蛋白如何被鉴定.  在这里,我们不考虑传统的蛋白鉴定方法,如免疫印迹法、内肽的化学测序、已知或未知蛋白的comi

蛋白质组学实用分析技术一览

分析其实也属于技术的一部分,且在蛋白质组学研究中显得尤为重要,因为蛋白质组学研究提供的数据是生物学上最庞大的,而且蛋白质组比基因组具有更大的复杂性,因此蛋白质组信息学更有挑战性。今天小编先抛砖引玉地介绍几个常用的分析方法和软件。蛋白质定性分析蛋白质定性分析通常是指利用质谱法进行蛋白质鉴定和序列分析。

活体电穿孔法介绍

1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115

蛋白质沉淀技术

在过去的 100 年里,虽然人们已经使用过多种不同的沉淀方法,但是 AS 沉淀一直都得到了最广泛的应用,尤其对于酸性蛋白质。此外,PEI 沉淀的应用也正日益普及。接下来,将会对这两种方法进行详细的讨论, 随后对其他几种沉淀方法做简单概述,并针对沉淀过程中沉淀的处理和纯化效率的最大化提出一般性建议。实

蛋白质沉淀技术

蛋白质沉淀技术             实验步骤 一、AS 沉淀

质谱沙龙第二十期活动报道

  2009年6月28日下午,质谱沙龙第二十期活动在北京师范大学分析测试中心举行。来自发酵研究院、二炮总医院、空军总医院、中科院植物所、AB公司、岛津公司、北京大学分析测试中心的各位专家、学生20余人。     第二十期质谱沙龙活动现场     北京师范大学分析测试中心简介及应用经