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如何成为细胞培养大神?

问世间谁人无忧,唯神仙逍遥自在。作为一名终日泡在实验室的实验君,如何在细胞实验中无所不能,超脱轮回做到一个人人羡慕的细胞大神呢?且看向这里,成为细胞大神的六个细节。 1. 过滤体系 自从出现瓶装培养基之后,培养基过滤的需求就减少了。有些时候,一些特定细胞培养支持物的添加可能会引入一些新的污染。另外,一般认为,当液体长时间接触瓶口外的空气后最好重新过滤;所以一般不建议 管/瓶 对 管/瓶 的倾倒。这时,很多人会选择Millipore的滤嘴配合针筒进行再过滤。结果发现,完成500 ml培养基过滤后,手疼腰酸!过滤杯的出现完美的解决了这个问题,所以,大体积尽量使用过滤杯吧,可靠且轻松,快捷。 默克第二代超滤杯 2. 培养基的选择关于血清质量,业界流行的澳洲来源 > 北美来源 >南美来源的说法。这一点从价格上也可见一斑。实际情况是优质血清的市场现实是供不应求,所以......阅读全文

细胞冻存技术介绍

细胞冻存技术实验室低温保存设备包括:液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低温保存箱、-86℃超低温冰箱、程控降温仪、低温冰箱(-20℃、-30℃、-40℃)、药品保存箱、疫苗保存箱、血库冰箱、层析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。检验冰箱可靠性和制冷能力的方法:1、常规冰箱放置温度计;2、超低温冰

LiveCyte即用型细胞冻存液常见问题汇总

1.1601、1602、1603、1604分别对应什么细胞和用途?答:常用细胞系&肿瘤细胞系干细胞&原代细胞无血清含DMSO16011602无血清无DMSO160316042.细胞冻存密度为多少合适?答:对于大多数细胞类型,1~3×106/毫升即可;对于血液细胞,需要更高的密度,推荐

细胞冻存技术介绍

  细胞冻存技术   实验室低温保存设备包括:液氮保存箱、液氮罐、-140℃/-150℃深冷低温保存箱、-86℃超低温冰箱、程控降温仪、低温冰箱(-20℃、-30℃、-40℃)、药品保存箱、疫苗保存箱、血库冰箱、层析柜、防爆冰箱、防火冰箱等。   检验冰箱可靠性和制冷能力的方法:1、常规冰箱放置

GMP级干细胞细胞冻存液 Cryopreservation Media

  产品描述:   STEM-CELLBANKER ®是GMP下生产的ES细胞和iPS细胞专用冻存液 产品特点是化学成分清晰,无动物源成分,专门针对ES细胞和iPS细胞特点设计的细胞冻存液。STEM-CELLBANKER ®是完全无血清和动物源性成分的,所有成分完全满足欧洲药典或美国药典的要求,是

细胞冻存和复苏实验

细胞冻存和复苏可以:(1)用于生物学保种;(2)用于医学上干细胞研究;(3)用于传代培养。实验方法原理细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减

无血清快速细胞冻存液操作说明

无血清快速细胞冻存液,通用于各种动物细胞株。特别配方具有有效提高细胞冻存活率和复苏活力。不含动物来源性蛋白,能减少各类病毒、霉菌和支原体等的污染,确保冻存细胞安全。既适用于一般培养细胞的冻存,也适用于无血清培养细胞和蛋白表达细胞的冻存。产品特色高安全性,完全使用医药品等级原料进行生产,不含动物成分,

生物样本库建设、管理及相关产品建议

建样本库的基本原则是安全、准确、便捷。其中安全包括样本生物安全、样本信息安全、设备运行安全;准确包括样本信息准确、样本存放取出位置准确;便捷包括工作流程便捷、软件系统操作便捷、信息交流便捷、硬件软件耗材供应及技术支持便捷。    样本库通常由基础设施、冻存设备、冻存耗材

大数据时代的疾病生物样本库建设与管理(二)

⑵-1400C冻存设备(液氮气相和深冷冰箱):液氮气相和深冷冰箱是实现-1400C长期样品储存的常用设备。这两种方法因为不存在液氮进入样本内的风险,因而储藏期间没有样本间交叉感染的危险。深冷冰箱是相对较新的一种设备,从近几年的客户使用反馈来看,在满载样品的情况下能够实现-140~-1500C的稳定环

BI教你如何做好细胞冻存与复苏

选 好 细 胞 冻 存 液 是 基 础使用动物血清常常会遇到很多问题,例如:病毒感染、其他动物源的污染。使用无血清制品培养与冻存细胞,可以消除这方面的隐患。此外,无血清冻存液可以确保细胞在化学成分固定的条件下生长,更进一步确保细胞冻存时的条件稳定慢 慢 做 冷 冻若您养的是贴壁细胞,请先将细胞消化下

多能干细胞(ES/iPS)冻存和复苏方法

多能干细胞(ES/iPS)冻存是干细胞扩增传代过程中重要的一环,但是多能干细胞不同于普通细胞系,其增殖扩增过程中需要聚团生长,为保持其细胞活性,不建议单细胞传代。而且使用血清+DMSO冻存方法,不能很好的保持细胞活性,且复苏细胞成活率较低。本文就重点介绍多能干细胞进行冻存以及解冻的标准化步骤。介绍使

无DMSO、无血清干细胞冻存技术与使用(非程序降温)

含DMSO的冻存液DMSO是最常用的渗透性冷冻保护剂,广泛应用于细胞的冷冻保存。在细胞水平,DMSO除了是一种DNA致畸因子外,还可渗入细胞内,分子中S=O键可能与细胞内蛋白发生化学反应,致使蛋白变性。因此,有些细胞和组织细胞对DMSO敏感,使用含DMSO的细胞冷冻液会降低细胞复苏后活性,进而影响细

细胞冻存实验

细胞冻存实验可以用于:(1)妥善贮存细胞;(2)维持细胞生存;(3)节约人力、物力、时间及减少污染机会;(4)维持细胞发生遗传性状的稳定。实验方法原理细胞生长至对数晚期,以培养基制备高浓度细胞悬液,加入细胞保护剂,等份转移至冻存管中,缓慢冷冻。细胞冻存时向培养基中加入保护剂,即终浓度5%.15%的甘

微生物医药学中细胞冻存和复苏实验

细胞冻存和复苏应用领域(1)用于生物学保种;(2)用于医学上干细胞研究;(3)用于传代培养。细胞冻存和复苏原理细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以最大限度的保存细胞活力。目前细胞冻存多采用甘油或二甲基亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细

如何高效培养人类多能干细胞?

人类多能干细胞(hPSCs)因其拥有分化为机体所有类型细胞的能力,使得hPSCs成为研究发育机制以及疾病机理最常用的工具,同时在再生医学以及疾病治疗领域也有非常广泛应用。人类多能干细胞因其来源不同又可分为胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESCs)和诱导多能干细胞(induce

多能干细胞(ES/iPS)冻存和复苏方法

多能干细胞(ES/iPS)冻存是干细胞扩增传代过程中重要的一环,但是多能干细胞不同于普通细胞系,其增殖扩增过程中需要聚团生长,为保持其细胞活性,不建议单细胞传代。而且使用血清+DMSO冻存方法,不能很好的保持细胞活性,且复苏细胞成活率较低。本文就重点介绍多能干细胞进行冻存以及解冻的标准化步骤。介绍使

冻存细胞时,还在坚持缓冻原则吗?

一、我们先来说说何为缓冻:缓冻即为冻存细胞时,要程序降温——4℃ 30min,-20℃ 1h ,-80℃ 过夜,次日投入液氮内。二、那为什么要进行缓冻呢?其实所谓的缓冻是一般使用传统冻存液冻存过程中需要程序降温。传统的冻存液,一般由胎牛血清、DMSO及基础培养基等组分组成。冻存保护的DMSO组分,在

如何高效培养人类多能干细胞

人类多能干细胞(hPSCs)因其拥有分化为机体所有类型细胞的能力,使得hPSCs成为研究发育机制以及疾病机理最常用的工具,同时在再生医学以及疾病治疗领域也有非常广泛应用。人类多能干细胞因其来源不同又可分为胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESCs)和诱导多能干细胞(induced

如何用二氧化碳培养箱进行细胞复苏?

(1) 准备   无菌超净台,酒精灯,75%酒精喷壶,二氧化碳培养箱,37℃水浴锅,离心机;培养瓶,含10%胎牛血清的完全培养基和基础培养基以及PBS磷酸缓冲液(提前放置超净台使平衡到室温),无菌工作服(白大褂),*罩,手套,记号笔(2) 步骤  &

mESCs冻存及复苏

实验概要mESCs冻存及复苏主要试剂mESCs培养液A 或者B、冻存液A、DPBS、0.25%Trypsin、细胞基础培养液实验材料15 mL离心管、冻存管、程序降温盒、镊子、培养皿实验步骤(1)冻存①冻存细胞时,最好提前两个小时更换新鲜的培养液。②准备冻存液并放到冰上预冷。③弃去培养液,用DPBS

小鼠神经干细胞(C17.2)的培养操作规程及注意事项

小鼠神经干细胞(C17.2)细胞接受后的处理:1) 收到细胞后,请检查发货培养瓶的状况,若发现培养瓶破损、有液溢出及细胞有污染,请拍照后及时联系我们。2) 在显微镜下确认细胞生长状态时,在低倍镜(4或5X物镜)下进行,能准确判断细胞的传代密度。看细胞的形态请在10X和20×物镜下,同时给细胞拍照各2

小鼠精原干细胞分离培养

实验概要小鼠精原干细胞分离培养主要试剂0.1%明胶、DPBS、0.25%胰蛋白酶、400目细胞筛、精原干细胞培养液、1 mg/mL胶原酶Ⅳ、7 mg/mLDNase、细胞基础培养液、DMEM-C、精原干细胞冻存液(Kubota et. al., 2004a and 2004b)(4℃条件下可

《干细胞制剂制备质量管理自律规范》正式发布

  10月25日,中国医药生物技术协会发布了《干细胞制剂制备质量管理自律规范》的公告,公告显示,《规范》是参照《药品生产质量管理规范》(GMP)、《干细胞制剂质量控制及临床前研究指导原则(试行)》和《干细胞临床研究管理办法(试行)》等规定,经业内骨干企业及专家的研讨,为规范我国干细胞制剂制备,加强质

5637细胞| 5637细胞系 培养步骤

  5637细胞| 5637细胞系 培养步骤   产品名称:5637细胞   中文名称:人膀胱癌细胞;5637   规格:T25   供应商:上海慧颖生物科技有限公司   复苏周期:10个工作日左右   培养步骤:   1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇

如何又快又好地冻存细胞?

  细胞冻存是细胞培养中的重要环节。大家都知道,冻存技术要点是慢冻,标准的冻存程序为降温速率-1~-2ºC/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5 ºC~-10 ºC /min。之前,常用的传统方法是将冻存管置于4 ºC 30分钟--->-20 ºC 60分钟--->-80 ºC过

又快又好的细胞冻存方法:CoolCell

细胞冻存是细胞培养中的重要环节。咱们都知道,冻存技能关键是慢冻,规范的冻存程序为降温速率-1~-2ºC/ min;当温度达-25℃以下时,可增至-5 ºC~-10 ºC /min。之前,常用的传统办法是将冻存管置于4 ºC 30分钟--->-20 ºC 60分钟--->-80 º

如何成为细胞培养大神?

  问世间谁人无忧,唯神仙逍遥自在。  作为一名终日泡在实验室的实验君,  如何在细胞实验中无所不能,超脱轮回  做到一个人人羡慕的细胞大神呢?  且看向这里,成为细胞大神的六个细节。  1. 过滤体系   自从出现瓶装培养基之后,培养基过滤的需求就减少了。有些时候,一些特定细胞培养支持物的添加可能

对于脐带血究竟液氮罐能冻存多久?

对于脐带血究竟液氮罐能冻存多久?提起脐带血,大多数人并不陌生,但对于脐带血究竟能冻存多久,真正的答案还需要时间来证明。液氮罐脐带血储存的高年限是在不断变动中的,由于全球范围内成立时间最长的脐带血储存机构仅有25年的历史,目前还没有实际的数据来证明脐带血的储存年限究竟可以达到多久。脐带血究竟能冻存多久

细胞培养攻略:细节决定成败

  培养细胞就像养育BABY一样,要精心照料,用心呵护。最好每天都去看看它们,满足它们所需要的物质需求,防止出现培养箱缺水、二氧化碳不足、温度不够等各种小意外,还要注意很多小细节,以免开展重复的实验导致不必要的人力物力浪费。  那培养细胞都要注意哪些小细节呢?就让我们一起来看看吧!  1.细胞生长的

hESCs传代、冻存及复苏

实验概要hESCs传代、冻存及复苏主要试剂KODMEM、0.25%Trypsin、1 mg/mL胶原酶Ⅳ或者Dispase、0.1%明胶、细胞基础培养液、hESCs培养液、冻存液C主要设备2 mL移液管、5 mL移液管、10 mL移液管、15 mL移液管、25 mL移液管、15 mL离心管、50 m

生物样本冷冻储存技术有哪些?

  1 储存温度  生物样本的长期储存通常使用尽可能低的温度来降低样本内的生化反应提高样本内各种成分的稳定性。生物大分子、细胞、组织和器官的常用储存温度有-80℃(超低温冰箱), -140℃(液氮气相或深冷冰箱)以及-196℃(液氮液相),温度越低样本的稳定保存时间越长。0~-60℃是水的结晶温度,