昆虫细胞高MOI杆病毒感染
高MOI（ Multiplicity Of Infection，等于用于感染的病毒数目与细胞数目的比值）感染是生产蛋白的最好方法。这有两个原因。一是不用考虑DIP（Defective Interfering Particles，即只包装入部分基因组的病毒颗粒）的形成，因为关心的是细胞或者培养液中的蛋白；二是高MOI感染是最便于控制、重复性好的方法，以达到高的蛋白表达水平。低MOI感染也可用于生产蛋白，但是难以控制，难以达到最高的表达量。然而病毒需要量少的确是该法的一个优点，对于大规模的生产这个优点极为有利，只要它们可以可靠的复制，这因不同的重组病毒而异。一般说来，用高MOI感染的方法就是将培养液中所有的细胞同时感染，每个细胞至少感染一个病毒颗粒。这个过程的几率可以用Poisson分布来分析，简而言之，如果你想同时把所有的细胞都感染，MOI值应该接近3。由于一旦加入病毒细胞就不再生长，因此你可以精确的控制感染时细胞的密度......阅读全文
昆虫细胞--高MOI杆病毒感染
高MOI（ Multiplicity Of Infection，等于用于感染的病毒数目与细胞数目的比值）感染是生产蛋白的最好方法。这有两个原因。一是不用考虑DIP（Defective Interfering Particles，即只包装入部分基因组的病毒颗粒）的形成，因为关心的是细胞或者培养液中的蛋
昆虫细胞的低MOI杆病毒感染
感染悬浮细胞是使杆病毒系统生产蛋白的普遍方法。悬浮培养的细胞很容易从10ml扩大到100L。一般来说，悬浮的细胞在无血清的培养液中培养。这种培养液许多公司有售，比如Life Technologies、Hyclone、Biowhitaker、JRH Biosciences、Expression Sys
昆虫细胞的扩增
实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞，在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。 实验材料 Sf9细胞 二甲基亚砜
昆虫细胞的扩增
实验方法原理用机械法从细胞单层分离细胞，在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料Sf9细胞二甲基亚砜Pluronic F68试剂、试剂盒生长培养液仪器、耗材培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤常规维持培养1. 通过刮取法或用培养液冲洗细胞（( ATCC # CRL-171
昆虫细胞的扩增
实验方法原理 用机械法从细胞单层分离细胞，在 27°C 条件下和悬浮状态下进行扩增培养。实验材料 Sf9细胞二甲基亚砜Pluronic F68试剂、试剂盒 生长培养液仪器、耗材 培养瓶旋转培养瓶和磁力搅拌器27°C培养箱实验步骤 常规维持培养1. 通过刮取法或用培养液冲洗细胞（( ATCC # CR
昆虫细胞转染实验
实验材料昆虫细胞试剂、试剂盒胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤1. 接种2x106个Sf9细胞于60 mm 培养皿，在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养，于27℃培养30~60 min，让细胞贴壁。2. 相应于毎一待转染的培养皿，吸取40 ul 无菌
昆虫细胞转染实验
实验材料 昆虫细胞试剂、试剂盒 胎牛血清脂质体转染剂仪器、耗材 培养皿锥形瓶培养箱离心机转子实验步骤 1. 接种2×106个Sf9细胞于60 mm 培养皿，在含10%胎牛血清的完全培养液或无血清培养液中培养，于27℃培养30~60 min，让细胞贴壁。2. 相应于毎一待转染的培养皿，吸取40
昆虫细胞转染实验
基本方案 实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒
昆虫细胞转染实验
基本方案 实验材料 昆虫细胞 试剂、试剂盒
什么是MOI值？如何进行MOI值摸索？
什么是MOI值？如何进行MOI值摸索？ MOI（Multiplicity of Infection，感染复数）是指病毒感染细胞的比例。选择合适的MOI值，病毒的感染效率以及目的蛋白的表达量越高，相对细胞的毒性越小。对于分裂活跃的细胞，比如293细胞MOI=1时，95%以上的细胞均可以表达目的