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自由基显示实验_细胞化学法

实验材料组织样品试剂、试剂盒DABMnCl2TrisCaCl2KClNaOHTris 缓冲液多聚甲醛锇酸实验步骤1. 组织取材后,即放入孵育液中,孵育 5 min。孵育液配方如下:DAB 2.5 mmol/L, MnCl2 0.5 mmol/L,Tris 4 mmol/L,CaCl2 2 mmol/L,KCl 4 mmol/L,pH 7.2~7.4,用 NaOH 调。2. Tris 缓冲液漂洗。3. 4% 多聚甲醛固定、漂洗。4. 锇酸后固定、脱水等同常规。注意事项1. 由于氧自由基化学性质非常活泼,因此组织取材后应迅速与孵育液反应,孵育后再固定,不能先固定。2. 关于铈生理溶液的配制,由于铈可与多种物质产生沉淀,如磷酸根离子、碳酸根离子,因此配制时需小心,一般可用生理盐水或葡萄糖等配制。另外,关于pH问题,虽然反应液越接近中性越好,但用三氯化铈配制时偏酸,而且不能用 NaOH 来调整,因为会形成沉淀。3. ......阅读全文

自由基显示实验_细胞化学法

实验材料 组织样品 试剂、试剂盒 DABMnCl2TrisCaCl2KClNaOHTris 缓冲液多聚甲醛锇酸 实验步骤 1. 组织取材后,即放入孵育液中,孵育 5 min。孵育液配方如下:DAB 2.5 mmol/L, MnCl2 0.5 mmol/L,T

自由基显示实验_H2O2细胞化学法

氧自由基主要指 O2-• 、•OH ,H2O2 虽不属于氧自由基,但与氧自由基有密切关系(如其他氧自由基可转化为 H2O2,H2O2 也可氧化组织,使其发生损伤),因此讨论氧自由基时常把其包括在内。H2O2 可与铈离子反应形成沉淀:H2O2+Ce3+→Ce(OH)2OOH 或 Ce(OH)3OOH,

自由基显示实验

H2O2细胞化学法 细胞化学法             实验方法原理 实验材料 组织样品

自由基显示实验

实验方法原理 实验材料 组织样品试剂、试剂盒 铈生理溶液生理溶液多聚甲醛锇酸实验步骤 1. 组织取下后,立即在含 1 mmol/L 铈生理溶液中切成小块,孵育 5 min。2. 生理溶液漂洗 5 min。3. 4% 多聚甲醛固定、漂洗。4. 锇酸后固定、脱水、包埋等同常规。5. 电镜观察。

自由基碰撞原子化

大量H·自由基的增加有助于原子化,被认为是自由基碰撞原子化机理的有力论据。Dědina及Rube ška对富燃氢-氧焰所提出的H·自由基可能是火焰反应区内游离基所致。这就很好地解释氢化物原子化时,H2的存在必要条件,以及02的作用和石英管表面的影响。石英在温度为1000℃ 时具有很强的催化作用,H·

单细胞mRNA差异显示实验

目前有几种方法可以显示生理刺激下组织样本中未知基因的表达水平变化。然而, 很多组织内的细胞又存在形态和功能上的异质性,因此常常需要从单个细胞水平研究基因表达的差异。现在,我们介绍一种新方法,它常规用来在单细胞水平考察未知基因的差异性表达。 现代神经科学研究技术 作者:U.Windhorst & H

单细胞mRNA差异显示实验

            实验方法原理 ##流程图 试剂、试剂盒 溶液和缓冲液 仪器、耗材

单细胞mRNA差异显示实验

实验方法原理 ##流程图试剂、试剂盒 溶液和缓冲液仪器、耗材 水浴槽PCR热循环仪微量离心机塑料制品和滤器实验步骤 一、RNA 的分离收集对照组和实验组细胞,放入含 45ul2 mmol/L DTT 的 1.5 ml 微量离心管中。95℃ 水浴热解 2 min。每管加入以下物质:37℃ 温育 30

酵母感受态细胞制备实验——化学法

酵母感受态细胞制备可应用于:(1)建立酵母转化体系;(2)酵母表达系统构建;(3)酵母其他分子生物学研究。实验方法原理感受态是受体最容易接受外源DNA片段并实现转化的一种生理状态,用对应化学物质处理细胞后,细胞逐渐形成感受态细胞并进行转化。化学法简单,快速,稳定,重复性好,广泛用于外源基因的转化。实

免疫细胞化学法

①直接法:用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合,操作方法简便,特异性高,但敏感性较差,此法可用于检定未知抗原;②间接法:先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合,然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合;第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体,然后再结合以标记物