自由基显示实验_细胞化学法
实验材料组织样品试剂、试剂盒DABMnCl2TrisCaCl2KClNaOHTris 缓冲液多聚甲醛锇酸实验步骤1. 组织取材后，即放入孵育液中，孵育 5 min。孵育液配方如下：DAB 2.5 mmol/L， MnCl2 0.5 mmol/L，Tris 4 mmol/L，CaCl2 2 mmol/L，KCl 4 mmol/L，pH 7.2～7.4，用 NaOH 调。2. Tris 缓冲液漂洗。3. 4％ 多聚甲醛固定、漂洗。4. 锇酸后固定、脱水等同常规。注意事项1. 由于氧自由基化学性质非常活泼，因此组织取材后应迅速与孵育液反应，孵育后再固定，不能先固定。2. 关于铈生理溶液的配制，由于铈可与多种物质产生沉淀，如磷酸根离子、碳酸根离子，因此配制时需小心，一般可用生理盐水或葡萄糖等配制。另外，关于pH问题，虽然反应液越接近中性越好，但用三氯化铈配制时偏酸，而且不能用 NaOH 来调整，因为会形成沉淀。3. ......阅读全文
自由基显示实验_细胞化学法
实验材料组织样品试剂、试剂盒DABMnCl2TrisCaCl2KClNaOHTris 缓冲液多聚甲醛锇酸实验步骤1. 组织取材后，即放入孵育液中，孵育 5 min。孵育液配方如下：DAB 2.5 mmol/L， MnCl2 0.5 mmol/L，Tris 4 mmol/L，CaCl2 2 mmol/
自由基显示实验_H2O2细胞化学法
氧自由基主要指 O2-• 、•OH ，H2O2 虽不属于氧自由基，但与氧自由基有密切关系（如其他氧自由基可转化为 H2O2，H2O2 也可氧化组织，使其发生损伤），因此讨论氧自由基时常把其包括在内。H2O2 可与铈离子反应形成沉淀：H2O2+Ce3+→Ce（OH）2OOH 或 Ce（OH）3OOH，
自由基显示实验
实验方法原理 实验材料 组织样品试剂、试剂盒 铈生理溶液生理溶液多聚甲醛锇酸实验步骤 1. 组织取下后，立即在含 1 mmol/L 铈生理溶液中切成小块，孵育 5 min。2. 生理溶液漂洗 5 min。3. 4％ 多聚甲醛固定、漂洗。4. 锇酸后固定、脱水、包埋等同常规。5. 电镜观察。
自由基显示实验
H2O2细胞化学法 细胞化学法 实验方法原理 实验材料 组织样品
自由基碰撞原子化
大量H·自由基的增加有助于原子化，被认为是自由基碰撞原子化机理的有力论据。Dědina及Rube ška对富燃氢-氧焰所提出的H·自由基可能是火焰反应区内游离基所致。这就很好地解释氢化物原子化时，H2的存在必要条件，以及02的作用和石英管表面的影响。石英在温度为1000℃ 时具有很强的催化作用，H·
单细胞mRNA差异显示实验
实验方法原理 ##流程图 试剂、试剂盒 溶液和缓冲液 仪器、耗材
单细胞mRNA差异显示实验
目前有几种方法可以显示生理刺激下组织样本中未知基因的表达水平变化。然而, 很多组织内的细胞又存在形态和功能上的异质性，因此常常需要从单个细胞水平研究基因表达的差异。现在，我们介绍一种新方法，它常规用来在单细胞水平考察未知基因的差异性表达。现代神经科学研究技术作者：U.Windhorst & H. J
单细胞mRNA差异显示实验
实验方法原理 ##流程图试剂、试剂盒 溶液和缓冲液仪器、耗材 水浴槽PCR热循环仪微量离心机塑料制品和滤器实验步骤 一、RNA 的分离收集对照组和实验组细胞，放入含 45ul2 mmol/L DTT 的 1.5 ml 微量离心管中。95℃ 水浴热解 2 min。每管加入以下物质：37℃ 温育 30
酵母感受态细胞制备实验——化学法
酵母感受态细胞制备可应用于：（1）建立酵母转化体系；（2）酵母表达系统构建；（3）酵母其他分子生物学研究。实验方法原理感受态是受体最容易接受外源DNA片段并实现转化的一种生理状态，用对应化学物质处理细胞后，细胞逐渐形成感受态细胞并进行转化。化学法简单，快速，稳定，重复性好，广泛用于外源基因的转化。实
细胞膜糖类电镜显示实验
实验方法原理 细胞膜糖类包括糖蛋白和糖脂，其显示技术较常用的是凝集素细胞化学技术，此外，还有钌红染色法等。钌红染色法的原理是钌红可以与羧基（酸性基）通过静电结合，电镜下呈电子密度高染色。实验材料 组织样品试剂、试剂盒 钌红原液戊二醛 二甲胂酸钠缓冲液锇酸实验步骤 1. 钌红原液配制钌红溶于双蒸水，浓
免疫细胞化学法
①直接法：用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合，操作方法简便，特异性高，但敏感性较差，此法可用于检定未知抗原；②间接法：先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合，然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合；第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体，然后再结合以标记物
免疫细胞化学法
免疫细胞化学是将免疫学基本原理与细胞化学技术相结合所建立起来的新技术，根据抗原与抗体特异性结合的特点，检测细胞内某种多肽、蛋白质及膜表面抗原和受体等大分子物质的存在与分布。
凝集素显示糖类细胞化学实验
实验方法原理 实验材料 组织样品试剂、试剂盒 凝集素-胶体金探针锇酸实验步骤 1. 制备或购买凝集素-胶体金探针。2. 组织常规固定，游离细胞打散，组织切片切薄。3. 漂洗 3 次。4. 5～25 μg/ml 凝集素-胶体金 15～25℃ 孵育 30～60 min。5. 漂洗、锇酸固定同常规注意事项
凝集素显示糖类细胞化学实验
凝集素（lectin）是一种无免疫原性糖蛋白，与糖的结合有一定专一性，如伴刀豆凝集素只与葡萄糖、甘露糖结合，麦胚凝集素只与 N-乙酰葡萄糖结合。并且，凝集素还可与标记物结合，如胶体金、辣根过氧化物酶等，因此可将作为检测糖基的一种简单而具有选择性的探针。不过由于糖类的复杂性以及凝集素特异的相对性，凝集
培养细胞染色体显示法实验
实验方法原理 培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点，是制备染色体极好的对象。实验材料 细胞试剂、试剂盒 HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材 酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤 1. 培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %～90 %汇合单层培养细胞；
细胞同步化实验
实验材料 CHO 细胞仪器、耗材 完全培养基实验步骤 1. 用完全培养基培养 CHO 细胞，这样当细胞转入无异亮氨酸培养基培养时，细胞汇合率达 50%~60% 且处于对数生长期。2. 吸弃培养基，用预温的无异亮氨酸的培养基冲涮一次细胞，加入无异亮氨酸的培养基，37℃ 孵育 40~48 小时。3. 要
细胞同步化实验
异亮氨酸营养缺乏法收集G1期细胞 同步优于G1/S期 选择性剥离法进行有丝分裂期同步 离心洗脱法 实验材料
细胞同步化实验
异亮氨酸营养缺乏法收集G1期细胞 同步优于G1/S期 选择性剥离法进行有丝分裂期同步 离心洗脱法 实验材料
细胞同步化实验
实验材料细胞试剂、试剂盒诺考达唑仪器、耗材培养瓶试管实验步骤1. 往 175 cm2 规格的培养瓶中接种细胞，培养至汇合率达 60%~80%。2. 用力敲打培养瓶 10 次，然后吸去培养液，以去除松散贴壁的细胞，死细胞和细胞碎片。3. 加入 10 ml 含 0.05 mg/ml 诺考达唑的预温培养基
自由基对细胞的危害
（1）削弱细胞的抵抗力，使身体易受细菌和病菌感染；（2）产生破坏细胞的化学物质，形成致癌物质；（3）阻碍细胞的正常发展，干扰其复原功能，使细胞更新率低于枯萎率；（4）破坏体内的遗传基因（DNA）组织，扰乱细胞的运作及再生功能，造成基因突变，演变成癌症；（5）破坏细胞内的线粒体（能量储存体），造成氧化
乙酰胆碱受体显示细胞化学实验
实验材料 组织样品试剂、试剂盒 磷酸钾戊二醛KOH蔗糖焦锑酸钾锇酸实验步骤 1. 组织切成约 1 mm3 的小块，用 0.09 mol/L 磷酸钾（或草酸钾）-3％ 戊二醛（pH 7.3，用 0.1％～1％ KOH 调 pH）固定 4 h 以上，4℃。也有人推荐固定早期用微波照射，以加速固定
乙酰胆碱受体显示细胞化学实验
乙酰胆碱受体分布于神经肌肉接头等处，蛇毒素可与之紧密结合，并连接过氧化物酶，通过化学反应可在电镜下观察到乙酰胆碱受体分布。实验材料组织样品试剂、试剂盒磷酸钾戊二醛KOH蔗糖焦锑酸钾锇酸实验步骤1. 组织切成约 1 mm3 的小块，用 0.09 mol/L 磷酸钾（或草酸钾）-3％ 戊二醛（pH 7.
固定化酶的化学法制备方法
化学法包括结合法、交联法。结合法又分为离子结合法和共价结合法。是将酶通过化学键连接到天然的或合成的高分子载体上,使用偶联剂通过酶表面的基团将酶交联起来,而形成相对分子量更大、不溶性的固定化酶的方法.
培养细胞染色体显示法实验——传代培养细胞染色体显示法
实验方法原理培养细胞有来源易得、细胞分裂率高和制出标本清晰度高等优点，是制备染色体极好的对象。实验材料细胞试剂、试剂盒HanksNaHCO3培养基血清秋水仙素仪器、耗材酒精灯镊子培养瓶吸管离心管实验步骤1. 培养细胞取处于指数生长期、用较大瓶皿培养的、80 %～90 %汇合单层培养细胞；2. 加
免疫细胞化学法的简介
肽类与蛋白质种类繁多，均具有抗原性，当将人或动物的某种肽或蛋白质作为抗原注入另一种动物体内，则产生与该抗原相应的特异性抗体（免疫球蛋白）；将抗体从血清中提出后，结合上某种标记物，即成为标记抗体。用标记抗体与组织切片标本孵育，抗体则与细胞中相应抗原发生特异性结合，结合部位被标记物显示，则在显微镜下
免疫细胞化学法的分类
①直接法：用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合，操作方法简便，特异性高，但敏感性较差，此法可用于检定未知抗原；②间接法：先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合，然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合；第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体，然后再结合以标
热分解与自由基碰撞共存原子化
蒸气发生-原子荧光光谱法中采用L型开口式的低温石英炉原子化器,在炉管开口端由周围空气渗入形成氩氢火焰原子化；而氢化物-原子吸收光谱法采用T型石英管作原子化器，在管内原子化。因此两者的原子化机理有一定的差异。原子荧光光谱法中8种共价氢化物元素在石英炉原子化器不同预加热温度条件下对原子荧光强度的影响。试
枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备实验——化学法
枯草芽孢杆菌感受态细胞的制备可应用于：（1）建立枯草芽孢杆菌转化体系；（2）其基因改造；（3）提高枯草芽孢杆菌生产性能的相关研究。实验方法原理用SPI 培养基和 SPII 培养基结合EGTA进行转化。实验材料枯草芽孢杆菌168试剂、试剂盒SPI 培养基EGTASPII 培养基柠檬酸钠EGTA氢氧化钠
免疫组织化学法实验
实验方法原理 实验材料 在3〜5 cm培养皿上生长的单层细胞（培养皿越小所需的抗体就越少 但培养皿应适合显微镜下观察）试剂、试剂盒 VPBS 40℃2% (m V)高聚甲醛（PFA)固定液 4℃ 用于细胞表面抗原固定100%甲醇 -10〜-20℃ (置于冰箱的结冻室冷却较为理想）；或含0.1
免疫细胞化学法的技术分类
①直接法：用标记抗体与抗体中的相应抗原直接结合，操作方法简便，特异性高，但敏感性较差，此法可用于检定未知抗原；②间接法：先用未标记的具有特异性的第一抗体与样品中的相应抗原结合，然后再以标记的第二抗体与特异性的第一抗体结合；第二抗体是用第一抗体作为抗原注入另一动物体内诱导产生的抗体，然后再结合以标记物