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小鼠胚胎干细胞的培养

实验概要了解小鼠胚胎干细胞的培养方法。主要试剂1. 贮存液 DMEM(高糖) 胎牛血清 L-谷氨酰胺(200mM) MEM NEAA(10mM) HEPES(1M) β-巯基乙醇(55Mm) 转铁蛋白50mg/ml 胰岛素5mg/ml 亚硒酸钠300μM 黄体酮(20μM) 腐胺(100μM) PEST(P104U/ml S104μg/ml) 层粘连蛋白(100μg/ml) 纤维连接蛋白(250μg/ml ) 碱性rhFGF, (10μg/ml)2. 包被液的准备 多聚-L-赖氨酸,15μg/ml 把75ml多聚-L-赖氨酸和425ml 1×PBS混合。贮存在4℃。 纤维结合蛋白,1μg/ml 把0.5ml纤维结合蛋白和500ml 1×PBS混合。3. 冻存液 90%HS和10%DMSO4. 0.1%geltin溶液 培养基:1. ES 配制一20×不含DMEM,HS,LIF的溶液。分......阅读全文

干细胞实验技术入门

《Science》刚刚公布的十大科学突破中,占据首位就是细胞重新编程技术(iPS,induced pluripotent stem cells),这一才初初“面世”一年的干细胞 技术引发了生命科学研究领域的极大震动,引用《科学》杂志负责新闻的副主编Robert Coontz的话就是“这项研

挑战人类生殖: 用干细胞制造胚胎

  自去年10月开始,分子生物学家Katsuhiko Hayashi就陆陆续续收到了许多夫妻的邮件,这些夫妻大多人到中年,仍然在为了一件事情焦急:要一个孩子。其中有一位英国的更年期妇女,希望到他位于日本京都大学的实验室,在他的帮助下怀上孩子,她写道:“这是我唯一的愿望。”   这些请求开始于H

新型扩增多潜能干细胞的分离、培养和鉴定的实验方案

  小鼠胚胎发育从单个受精卵到8细胞早期具有全能性,即单个卵裂球具有分化为胚胎和胚外组织各种类型细胞的潜能。8细胞后期胚胎开始第一次谱系分离,外层的细胞形成滋养外胚层(TE),以后分化为胎盘的主要细胞成分,滋养层细胞;内在的细胞形成内细胞团(ICM),在囊胚阶段,内细胞团进一步分化为上胚层(epib

【盘点】2016年5月份生物谷推荐的干细胞研究

  即将过去的5月份,有哪些重大的干细胞研究或发现呢?生物谷小编梳理了一下这个月生物谷报道的干细胞方面的新闻,供大家阅读。  1. 重磅!日本科学家首次利用皮肤细胞恢复病人视力  日本研究人员报道了他们首次成功地将来自一名女性患者皮肤细胞经重编后产生的诱导性多能干细胞(induced pluripo

笹井芳树:培养皿中长出视网膜

视网膜  科学家已经可以诱导干细胞形成视网膜,这为很多眼疾患者带来希望。  在子宫里,一团相同的细胞分化成各种不同的模样,最终形成高度有序的结构,组装成人体的全副器官。这个过程依照内在的“生物学蓝图”有条不紊地进行,引导组织产生折叠、皱褶,精确形成适当的外形和大小。  科学家很熟悉这个由简单到复杂的

2012国家自然科学基金哪些干细胞项目资助金额最大

  国家自然科学基金委员会公布了2012年度面上项目、重点项目、重大国际(地区)合作研究项目、青年科学基金项目、地区科学基金项目、海外及港澳学者合作研究基金项目、科学仪器基础研究专款项目等方面的评审结果。有关评审结果将通知相关依托单位,其科研管理人员可登录科学基金网络信息系统(https:

克隆技术(十二)

应用前景奇妙的克隆克隆技术已展示出广阔的应用前景,概括起来大致有以下四个方面:(1)培育优良畜种和生产实验动物;(2)生产转基因动物;(3)生产人胚胎干细胞用于细胞和组织替代疗法;(4)复制濒危的动物物种,保存和传播动物物种资源。以下就生产转基因动物和胚胎干细胞作简要说明。克隆山羊转基因动物研究是动

如何高效培养人类多能干细胞

人类多能干细胞(hPSCs)因其拥有分化为机体所有类型细胞的能力,使得hPSCs成为研究发育机制以及疾病机理最常用的工具,同时在再生医学以及疾病治疗领域也有非常广泛应用。人类多能干细胞因其来源不同又可分为胚胎干细胞(Embryonic stem cell,ESCs)和诱导多能干细胞(induced

诱导性多能干细胞最新研究进展

  诱导性多能干细胞(iPS细胞)最初是日本科学家山中伸弥(Shinya Yamanaka)团队在2006年利用病毒载体将四个转录因子(Oct4, Sox2, Klf4 和c-Myc)的组合转入到小鼠胚胎或皮肤纤维母细胞中,使其重编程而得到的类似胚胎干细胞的一种细胞类型。这些ips细胞在形态、基因和

软凝胶基质代替硬培养皿成为干细胞培养新方法

  据美国每日科学网12月19日报道,美国研究人员发现,利用软凝胶基质代替硬培养皿来培养小鼠胚胎干细胞,无需添加昂贵的生长因子,便可让干细胞培养物长时间维持同质的多能状态。研究人员表示,这一技术在未来的再生医学中有着巨大的应用前景。相关论文发表在《公共科学图书馆·综合》杂志上。  

胚胎干细胞培养有新法 软凝胶基质代替硬培养皿

  据美国每日科学网12月19日报道,美国研究人员发现,利用软凝胶基质代替硬培养皿来培养小鼠胚胎干细胞,无需添加昂贵的生长因子,便可让干细胞培养物长时间维持同质的多能状态。研究人员表示,这一技术在未来的再生医学中有着巨大的应用前景。相关论文发表在《公共科学图书馆・综合》杂志上。  干

再生医学大事记

  12月8日,Nature刊出了一期关于再生医学的特刊。其中包括7篇综述,分别介绍了再生医学的历史性事件、3D打印技术、干细胞与神经再生、I型糖尿病的细胞治疗、再生医学相关政策、跨学科协作等相关问题。感兴趣的朋友们可以到Nature网站阅读全文。   正如Nature特刊主编Herb Brody所

2013年世界科技发展回顾 生物医学领域收获颇丰

美国  遗传学研究深入揭示、利用基因机制;细胞研究让多种细胞互换“身份”;再生医学造出多种器官组织。  田学科 (本报驻美国记者)在遗传学研究领域,杜克大学模仿人体细胞内复杂的基因调控过程,模拟出多种蛋白质如何通过复杂相互作用调控一个基因。  斯坦福大学设计出一种由DNA和RNA制成的生物晶体管——

刘伯宁:评全球首个胚胎干细胞药物

获准进入临床研究  实现组织器官的修复和再生是临床医学研究人员和生物学家多年来梦寐以求的事情。1996年,当英国科学家利用动物体细胞克隆技术制造出克隆羊“多莉”时,人们看到这一梦想实现的可能。但随后由于“体细胞克隆技术”备受争议,政策等因素的限制,“人的体细胞克隆技术”在近十余年进展缓慢。

用人体干细胞改造猪胚胎,产出人体器官

  通过把人源干细胞注入经过基因改造的猪胚胎,再将胚胎移殖到代孕母猪子宫内发育3~4周,科学家已经能够培育长着人体器官的猪胎。未来几十年,用动物胚胎生产人类器官或将成为现实,移植器官的来源将不再像今天这样匮乏。  每年,全球都有成千上万的人接受器官移植。虽然器官移植技术发展迅速,然而有限的捐献器官数

干细胞在医学领域的前景与忧思

  近日,美国Advanced Stem cell 公司首席科学家Robert Lanza成功利用胚胎干细胞改善两种老年衰替性眼病。而就在不到一个月前,日本神户理化研究所(RIKEN)发育生物学中心的眼科专家高桥雅,利用iPS细胞来治疗与年龄相关的视网膜退化疾病。干细胞在医学上的作用日益显现。  干

干细胞的分类和不同功能

干细胞(stem-cell)即为起源细胞,是指尚未发育成熟的细胞,它具有多分化潜能和自我复制的功能,在特定条件下,可以分化成不同的功能细胞,形成多种组织和器官。这是继药物治疗和手术治疗后有又一场医疗革命,被称之为医学上的奇迹。根据其分化潜能不同,可分为全能干细胞、多能干细胞、单能干细胞。1、全能干细

干细胞技术开创未来辅助生殖新局面

  日本研究人员使用顶尖技术在实验室中制造出了卵子和精子。而现在,科学家不得不决定如何安全且合乎道德地使用这些细胞。   从去年10月开始,分子生物学家Katsuhiko Hayashi已经收到了不少电子邮件,其中大多数是中年夫妻,他们都为一件事感到绝望:生育孩子。一位处于更年期的英国女人提出

合适的小鼠胚胎干细胞胞质分裂阻断微核试验CBMn分析

实验概要观察表明,加入细胞松弛素-B到小鼠胚胎干细胞(mESC)的培养诱导细胞凋亡作CBMn分析。另一方面,加入 cyt-B是(CBMn)技术的最关键的部分。因此,改变传统CBMn分析方法是必要的。在本实验中,我们试图解决这个问题。研究表明,CBMn可作为一个可靠的工具用于胚胎干细胞研究,特

小小干细胞如何在生物医学“兴风作浪”

干细胞研究是在上世纪90年代后期开始热起来的。自上世纪80年代中期以来,发育生物学家一直都在实验室使用人类胚胎癌(EC)细胞,但是对小鼠胚胎干细胞(ESCs)和胚胎生殖细胞的研究,已经让研究人员看到了希望:他们能够制备来自人类的多能干细胞,而不会有EC细胞的异常基因组。在新的千年之前,一些研究人员正

Cell Stem Cell十大热点文章(12月)

  《Cell Stem Cell》杂志是2007年Cell出版社新增两名新成员之一(另外一个杂志是Cell Host & Microbe),这一杂志内容涵盖了从最基本的细胞和发育机制到医疗软件临床应用等整个干细胞生物学研究内容。这一杂志特别关注胚胎干细胞、组织特异性和癌症干细胞的最新成

Nature:干细胞领域里程碑成果“大盘点”

  那是2011年秋季再寻常不过的一天,Madeline Lancaster忽然意识到自己培养出了一个大脑。在此之前的几个星期,她一直试图让人胚胎干细胞分化为玫瑰花环(rosettes)结构的神经干细胞。但她的细胞就是不肯贴上培养皿,发而形成了奇怪的乳白色球体。Lancaster经过仔细分析才发现,

干细胞分离研究获新突破

日本近年来在干细胞研究领域获得了多项举世瞩目的成就,如利用干细胞治疗猴子帕金森症、治耳聋等。现在,日本干细胞研究成果再填一项重要进展。日本理化研究所的研究人员近日宣布,他们成功分离出小鼠卵巢荚膜的干细胞。 生殖是关系到生物种群能否延续的重要生命活动,但围绕精子和卵子是怎样形成的依然有许多疑问。科学

干细胞领军人物Cell子刊重大突破

  日本神户理化学研究所进化生物学中心的干细胞生物学家Yoshiki Sasai近年来成为干细胞研究领域的领军人物。Sasai曾成功地将神经干细胞诱导生成精细结构,并利用干细胞培育出视杯、大脑皮层精细组织层和初级的生成激素的垂体。布鲁塞尔自由大学干细胞科学家Luc Leyns评价他的一系列论

干细胞领军人物Cell子刊重大突破

  日本神户理化学研究所进化生物学中心的干细胞生物学家Yoshiki Sasai近年来成为干细胞研究领域的领军人物。Sasai曾成功地将神经干细胞诱导生成精细结构,并利用干细胞培育出视杯、大脑皮层精细组织层和初级的生成激素的垂体。布鲁塞尔自由大学干细胞科学家Luc Leyns评价他的一系列论

基因敲除的原理与方法

基因敲除可以说是基因组 学、细胞分离培养以及转基因技术的组合。那么基因敲除的原理是什么呢? 基因敲除的方法有哪些呢?在此,做个小结,以供大家学习。一.概述:基因敲除是自80年代末以来发展起来的一种新型分子 生物学技术,是通过一定的途径使机体特定的基因失活或缺失的技术。通常意义上的基因敲除主要是应用D

IF:16.588|Laminins在细胞分化中的作用

近日,来自杜克-新加坡国立大学医学院的科学家在Trends in Cell Βiology(Impact Factor: 16.588)上发表了一篇综述文章,报道了细胞外基质层粘连蛋白(Laminins, LNs)在干细胞分化中的重要作用及最新应用进展。1.Laminin和干细胞微环境细胞内转录因子

实验室造出人造精子:没尾巴无法游动可量产

精子通常具有长长的尾巴,帮助它们游向卵子,但科学家制造出来的人工精子缺少这一特征精子通常具有长长的尾巴,帮助它们游向卵子,但科学家制造出来的人工精子缺少这一特征研究者利用人造精子成功培养出了半克隆小鼠。这些幼鼠都是雌性小鼠自然生产出来的。上图显示的是已经成年的半克隆小鼠科学家将精子放入没有细胞核的卵

突破性别枷锁!中科院首次实现哺乳动物孤雄生殖

  我们所在的这颗蓝色星球上,每个角落里似乎都有生命的存在。无论在进化树上处于哪个位置,维持种族的繁衍是所有生命体都要必须面对的头等大事。图片来源:www.photophoto.cn  最简单的生命体——病毒,需要借助宿主细胞进行扩增和繁殖;细菌和部分植物采用孢子繁殖,这是一种简单的无性生殖;蜜蜂和

人工胚胎高通量方式揭示早期胚胎的发育机制

   美国索尔克(SALK)生物学研究所Belmonte课题组、德克萨斯大学西南医学中心吴军课题组及北京大学第三医院于洋课题组等在Cell杂志发表题为“Generation of blastocyst-like structures from mouse embryonic and adult ce