化学发光底物（化学发光剂）
在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。 1、氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物，是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺（luminol，5＇-氨基-2，3-二氢-1，4-酞嗪二酮）的分子结构及化学反应式如下： 鲁米诺在免疫测定中既可用作标记物，也可用作过氧化物酶的底物。异鲁米诺衍生物ASEI和ABMI等也是常用的标记物。 2、吖啶酯（acridiniumester，AE）类类发光剂不需催化剂的存在，在有过氧化氢的稀碱溶液中即能发光。反应式如下： 电化学发光原理 上式反应迅速，在1～5s内即可完成；具有背景低、信比高的优点，其检测极限可达5×10-9mol，发光量与AE浓度呈良好的线性反应，是一类的标记物。 3、......阅读全文
化学发光底物（化学发光剂）
在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。 1、氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物，是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺（luminol，5＇-氨基-2，3-二氢-1，
底物化学发光的用途
非放射性发光系统,用于检测固定在膜上的蛋白,其敏感性达1-5pg。用x光片可快速地获得永久的硬拷贝结果。所含独特的底物足以维持12小时以上的发光,便于反复曝光操作,免疫印迹膜经抗体脱卸处理后可供再次抗体探查使用。适用于痕量蛋白或核酸检测。
什么是底物化学发光？
根过氧化酶使试剂中的发光物(luminol)氧化并发光,而试剂中含有增强剂这使得发光增强了1000倍。在免疫印迹中,将复杂的蛋白混合物经sds-page分离,并转移到固相膜上(如nc、pvdf)等,用于免疫学检测,经HRP标记的抗体与膜上的蛋白直接(标记一抗)或间接(标记二抗)反应。
底物化学发光操作注意
1. 试剂每个批号均独立优化,请不要混用或稀释试剂以免降低敏感性;2. 加入一抗后膜不能再干燥;3. 适当地封闭和洗涤膜片至关重要;4. 使用前配置化学发光试剂,配置足够覆盖膜片即可,弃去使用过的混合试剂;5. 使用干净取样头取用每种试剂;6. 第一张片子建议曝光1分钟,观察结果后判断最佳曝光时间可
底物化学发光使用方法
1. 印迹膜制备 按常规方法完成SDS-PAGE和电转膜操作,适当的封闭非常重要。可以通过标记一抗或二抗的手段引入HRP,一般采用市售的HRP二抗交联物。仔细地淋洗对于降低背景非常重要,在与HRP交联物温育后,膜片更需仔细洗涤,所有步骤均在室温下完成。2. 化学发光试剂的配置 在使用前等量混合a液和
化学发光剂必备条件
化学发光剂必须具备下列条件：①发光的量子产率高；②它的物理、化学特性要与被标记或测定的物质相匹配；③能与抗原或抗体形成稳定的偶联结合物；④其化学发光常是氧化反应的结果；⑤在所使用的浓度范围内对生物体没有毒性。
化学发光底物吖啶酯（DMAENHS)有哪些应用
化学发光及免疫分析、受体分析、核酸及多肽检测等研究。作为直接化学发光免疫分析的化学发光剂，用于抗原、抗体、蛋白质等的检测分析。检测分析过程中无需附加催化剂，DMAE-NHS在碱性介质中被H2O2氧化时，经过一个二氧化酮的中间体，产生电激发的N-甲基吖啶酮，其返回基态时，在430nm处释放光子。
化学发光底物吖啶酯（DMAENHS)有哪些应用
化学发光及免疫分析、受体分析、核酸及多肽检测等研究。作为直接化学发光免疫分析的化学发光剂，用于抗原、抗体、蛋白质等的检测分析。检测分析过程中无需附加催化剂，DMAE-NHS在碱性介质中被H2O2氧化时，经过一个二氧化酮的中间体，产生电激发的N-甲基吖啶酮，其返回基态时，在430nm处释放光子
化学发光底物吖啶酯（DMAENHS)有哪些应用
化学发光及免疫分析、受体分析、核酸及多肽检测等研究。作为直接化学发光免疫分析的化学发光剂，用于抗原、抗体、蛋白质等的检测分析。检测分析过程中无需附加催化剂，DMAE-NHS在碱性介质中被H2O2氧化时，经过一个二氧化酮的中间体，产生电激发的N-甲基吖啶酮，其返回基态时，在430nm处释放光子
化学发光剂必须具备哪些条件？
①发光的量子产率高；②它的物理、化学特性要与被标记或测定的物质相匹配；③能与抗原或抗体形成稳定的偶联结合物；④其化学发光常是氧化反应的结果；⑤在所使用的浓度范围内对生物体没有毒性。
直接化学发光常用的发光剂
吖啶酯和三联吡啶钌。吖啶酯是一类可用作化学发光标记物的化学物质，加入发光启动试剂后0.4s左右发射光强度达到最大，半衰期为0.9s左右。三联吡啶钌其标记物的发光原理是，一种在电极表面由电化学引发的特异性化学发光反应。
底物因素对化学发光法检测促甲状腺激素的影响
在临床实验中，要求所有项目均应该严格按照标准化操作程序（SOP）进行操作，但实际工作中由于人为或外界因素，实验进程往往会受到干扰，对结果造成一定影响。促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）是判断甲状腺功能是否正常的首选指标，化学发光法因具有快速、准确、灵敏
化学发光底物检测方法结果阳性的原因和处理办法
认为二抗及底物活性良好； Western Blot 系统需要进一步优化 优化抗原和抗体浓度的斑点杂交方法:斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度 对于一个给定的抗原,抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。抗原和抗体浓度可通
化学发光底物检测方法结果阴性的原因和处理办法
更换其它二抗,再次进行检测;再次检测结果仍为阴性,证明底物丧失活性。
化学发光底物检测方法结果阳性的原因和处理办法
认为二抗及底物活性良好； Western Blot 系统需要进一步优化 优化抗原和抗体浓度的斑点杂交方法:斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度 对于一个给定的抗原,抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。抗原和抗体浓度可通
化学发光法的发光剂及原理
化学发光是某种物质分子吸收化学能而产生的光辐射。任何一个化学发光反应都包括两个关键步骤，即化学激发和发光。因此，一个化学反应要成为发光反应，必须满足两个条件：第一：反应必须提供足够的能量（170 ～ 300KJ / mol），第二，这些化学能必须能被某种物质分子吸收而产生电子激发态，并且有足够的
蛋白质免疫印迹（Western－Blot－）底物化学发光－ECL－法
蛋白质免疫印迹（Western Blot ）可以：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA 相互作用后续分析。实验方法原理———底物化学发光 ECL 法Western 免疫印迹（Western B
化学发光原理
化学发光的原理是,激发态的分子经过结合、光解和重新结合的化学反应,能量从激发态转变到基态,从而发出光。关于化学发光检测原理，化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析仪器。在这种反应中,激发态的分子可以通过自发荧光,吸收光能,再释放出大量的可见光来实现发光。
化学发光仪器
化学发光分析仪是利用化学发光物质经催化剂的催化和氧化剂的氧化， 形成一个激发态的中间体， 当这种激发态中间体回到稳定的基态时， 同时发射出光子（hM）, 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。
化学发光仪器
电化学发光仪是用于检测人体内分泌激素的医学仪器。该仪器由日本日立公司生产出品，采用瑞士罗氏公司全套进口试剂，应用国际领先的电化学发光技术，检测多项内分泌激素。其特点是快速、微量、准确。为内分泌疾病的准确诊断、治疗提供重要依据。
化学发光特点
极高的灵敏度，荧光虫素（LH2）（luciferin）、荧光素酶（luciferase）和磷酸三腺苷（ATP）的化学反应可测定2×10-17 mol/L的ATP，可检测出一个细菌中的的ATP含量。 2.由于可以利用的化学发光反应较少，而且化学发光的光谱是由受激分子或原子决定的，一般来说也是由化学反应
化学发光技术
放射免疫分析法有很高的灵敏度，但存在着放射性防护和同位素污染等问题。近年来，许多非放射性同位素标记的免疫分析方法相继出现。其中，在化学发光反应及抗原-抗体特异性识别基础上建立起来的一种新的非放射免疫分析技术--化学发光免疫分析法，由于这种方法具有灵敏度高，特异性强，精密度好，线性范围宽，仪器设备简单
蛋白质免疫印迹（Western－Blot，WB－）——底物化学发光ECL法
蛋白质免疫印迹可应用于：（1）从蛋白质混合物中检出目标蛋白质；（2）定量或定性确定细胞或组织中蛋白质的表达情况；（3）用于蛋白质-蛋白质、蛋白质-DNA、蛋白质-RNA相互作用后续分析。实验方法原理Western免疫印迹，是将蛋白质转移到膜上，然后利用抗体进行检测的方法。对已知表达蛋白，可用相应抗体
化学发光定氮仪的化学发光技术解析
电化学发光是通过对电极施加一定的电压进行电化学反应而发光，通过测量化学发光光谱和强度来测定物质含量的一种痕量分析方法。它将电分析化学手段和化学发光方法相结合，具有独特的优点，如重现性和灵敏度进一步提高，在多种组份同时存在时，可施加不同波形、不同电压的信号进行选择性测量等，是潜在的分析手段之一。化
化学发光法和电化学发光哪个准确
化学发光法：其是利用化学反应产生的能量进行激发发光，其具有仪器简单、检测限低、线性范围宽等优点，在化学分析方面应用广泛。与荧光法相比，化学发光法不需要外来的光源，从而减少了光散射，降低了噪音信号的干扰，提高了检测的灵敏度，扩大了线性动态范围。其缺点是选择性差，会对一个系列的化合物做出反应，而不是针对
实验室分析仪器化学发光免疫分析仪的底物
HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二甲酰肼,lum ino l) ,或其衍生物如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。鲁米诺的氧化反应在碱性缓冲液中进行,在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) ,
凝胶/化学发光成像系统描绘化学发光检测线性
线性描述的是信号与分析检测物浓度范围之间的关系。理想的比例因子是常数；信号点与分析检测物是一条直线关系。标准曲线可以不是直线，如s形，仍是有用的。
凝胶/化学发光成像系统的化学发光检测方法概念
化学发光检测方法的简单性使得它的应用很简单并且完全可以自动化。但是它的灵敏度又是怎么样的呢？化学发光有如下两个内在的优势：1．绝大多数的样品没有“背景”信号，如它们自身不发光。2．化学发光的检测不是一个比例测试，这是与荧光和吸收或比色测试不同的。在荧光测试中，具有小的Stokes Shift的荧光基
化学发光免疫分析
化学发光免疫分析(chemiluminescence immunoassay,CLIA),是将具有高灵敏度的化学发光测定技术与高特异性的免疫反应相结合，用于各种抗原、半抗原、抗体、激素、酶、脂肪酸、维生素和药物等的检测分析技术。是继放免分析、酶免分析、荧光免疫分析和时间分辨荧光免疫分析之后发展起
化学发光酶标仪应用
1、报告基因检测 报告基因的检测是评价启动子调控效率和其中作用元件的有效方法.经常使用的还有双报告系统: 同时向细胞中转入两种报告基因，其中一种为待研究的启动子控制（荧火虫荧光素酶），另一种为不被处理所影响的启动子控制（海肾荧光素酶）作为内参，可消除系统误差.报告基因检测的优势:• 减小随机误差•