化学发光底物检测方法结果阳性的原因和处理办法
认为二抗及底物活性良好； Western Blot 系统需要进一步优化 优化抗原和抗体浓度的斑点杂交方法:斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度 对于一个给定的抗原,抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。抗原和抗体浓度可通过免疫印迹实验中使用不同浓度的抗原和抗体作用确定。另外,更快和更简单的方法是进行斑点印迹实验。以下是使用超敏感信号底物进行的斑点印迹的操作方法。 注:所有的抗体稀释度假定起始浓度为1 mg/mL。 1. 用TBS 和PBS 稀释的蛋白样品,好的稀释方法是由样品中的抗原稀释浓度决定的,但是由于抗原的浓度是未 知的, 所以有必要进行宽范围的稀释度的检测。SuperSignal West Pic 化学发光底物的检测灵敏度可达皮g 水平,所以样品的稀释范围可以从微克水平到皮克水平。如果要使用过多的抗原,结果会出现以下情况:非特异性条带、......阅读全文
化学发光底物检测方法结果阳性的原因和处理办法
认为二抗及底物活性良好； Western Blot 系统需要进一步优化 优化抗原和抗体浓度的斑点杂交方法:斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度 对于一个给定的抗原,抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。抗原和抗体浓度可通
化学发光底物检测方法结果阳性的原因和处理办法
认为二抗及底物活性良好； Western Blot 系统需要进一步优化 优化抗原和抗体浓度的斑点杂交方法:斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度 对于一个给定的抗原,抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。抗原和抗体浓度可通
化学发光底物检测方法结果阴性的原因和处理办法
更换其它二抗,再次进行检测;再次检测结果仍为阴性,证明底物丧失活性。
底物化学发光使用方法
1. 印迹膜制备 按常规方法完成SDS-PAGE和电转膜操作,适当的封闭非常重要。可以通过标记一抗或二抗的手段引入HRP,一般采用市售的HRP二抗交联物。仔细地淋洗对于降低背景非常重要,在与HRP交联物温育后,膜片更需仔细洗涤,所有步骤均在室温下完成。2. 化学发光试剂的配置 在使用前等量混合a液和
化学发光假阳性本底产生的原因分析
近期收到有小伙伴提问，关于如何解决发光试剂盒研发过程中的本底偏高和假阳性问题。解决问题最重要的是了解问题产生的原因，本微信平台分类汇总了化学发光试剂产生假阳性本底的原因，由于问题本身并没有很具体的描述，因此本文也只广泛的汇总，不包含具体的项目或者方法学方面的内容。希望对大家的工作有所帮助。抗原/抗体
化学发光假阳性本底产生的原因分析
近期收到有小伙伴提问，关于如何解决发光试剂盒研发过程中的本底偏高和假阳性问题。解决问题最重要的是了解问题产生的原因，本微信平台分类汇总了化学发光试剂产生假阳性本底的原因，由于问题本身并没有很具体的描述，因此本文也只广泛的汇总，不包含具体的项目或者方法学方面的内容。希望对大家的工作有所帮助。
化学发光底物（化学发光剂）
在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。 1、氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物，是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺（luminol，5＇-氨基-2，3-二氢-1，
分析真空泵高温的原因和处理办法
以下是对真空泵电机温度高的原因分析:1原因分析(1)电机功率大，工作电流大，发热量大。(2)风扇转速低，风压，风量小。(3)风扇叶片数较少，产生的风量小。(4)电动机附有灰尘、油污，降低了散热能力。(5)真空泵电机所 以下是对真空泵电机温度高的原因分析: 1原因分析 (1)电机
分析真空泵高温的原因和处理办法
分析真空泵高温的原因以下是对真空泵电机温度高的原因分析:1原因分析(1)电机功率大，工作电流大，发热量大。(2)风扇转速低，风压，风量小。(3)风扇叶片数较少，产生的风量小。(4)电动机附有灰尘、油污，降低了散热能力。(5)真空泵电机所以下是对真空泵电机温度高的原因分析:1原因分析(1)电机功率大
底物化学发光的用途
非放射性发光系统,用于检测固定在膜上的蛋白,其敏感性达1-5pg。用x光片可快速地获得永久的硬拷贝结果。所含独特的底物足以维持12小时以上的发光,便于反复曝光操作,免疫印迹膜经抗体脱卸处理后可供再次抗体探查使用。适用于痕量蛋白或核酸检测。
PCR假阳性的原因分析及解决办法
假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔，防止
PCR－反应出现假阳性结果原因
1 ) 引物设计不合适： 选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而，在进行PCR扩增时，扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短，容易出现假阳性。需重新设计引物。 2 ) 靶序列或扩增产物的交叉污染： 这种污染有两种原因： 一是整个基因组或大片段的交叉污染，导致假
基因扩增PCR的扩增结果假阳性的原因
出现的PCR扩增条带与目的靶序列条带一致,有时其条带更整齐,亮度更高。 引物设计不合适:选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性,因而在进行PCR扩增时,扩增出的PCR产物为非目的性的序列。靶序列太短或引物太短,容易出现假阳性。需重新设计引物。 靶序列或扩增产物的交叉污染:这种污染有两种原因:一是整个
什么是底物化学发光？
根过氧化酶使试剂中的发光物(luminol)氧化并发光,而试剂中含有增强剂这使得发光增强了1000倍。在免疫印迹中,将复杂的蛋白混合物经sds-page分离,并转移到固相膜上(如nc、pvdf)等,用于免疫学检测,经HRP标记的抗体与膜上的蛋白直接(标记一抗)或间接(标记二抗)反应。
底物化学发光操作注意
1. 试剂每个批号均独立优化,请不要混用或稀释试剂以免降低敏感性;2. 加入一抗后膜不能再干燥;3. 适当地封闭和洗涤膜片至关重要;4. 使用前配置化学发光试剂,配置足够覆盖膜片即可,弃去使用过的混合试剂;5. 使用干净取样头取用每种试剂;6. 第一张片子建议曝光1分钟,观察结果后判断最佳曝光时间可
热电偶的常见故障原因分析和处理办法
发生故障现象: A热电势比实际值小。 原因分析： (1)短路。 (2)热电偶接线盒内接线柱间短路。 (3)补偿导线因绝缘烧坏而短路。 (4)补偿导线与热电偶不匹配。 (5)补偿导线与热电偶极性接反。 (6)插入深度不够和安装位置不对。 (7)热电偶冷端温度过高。
热电偶的常见故障原因分析和处理办法
发生故障现象: A热电势比实际值小。 原因分析： (1)短路。 (2)热电偶接线盒内接线柱间短路。 (3)补偿导线因绝缘烧坏而短路。 (4)补偿导线与热电偶不匹配。 (5)补偿导线与热电偶极性接反。 (6)插入深度不够和安装位置不对。 (7)热电偶冷端温度过高。
底物因素对化学发光法检测促甲状腺激素的影响
在临床实验中，要求所有项目均应该严格按照标准化操作程序（SOP）进行操作，但实际工作中由于人为或外界因素，实验进程往往会受到干扰，对结果造成一定影响。促甲状腺激素（thyroid stimulating hormone，TSH）是判断甲状腺功能是否正常的首选指标，化学发光法因具有快速、准确、灵敏
ELISA假阳性结果和细胞假阴性结果
假阳性结果和假阴性结果1、标本的采集与保存ELISA试剂盒当标本采集保存不当产生溶血时，红细胞中的血红蛋白释放到血清中，血红蛋白具有过氧化物酶的性质，其通过吸附或“PP效应"（蛋白质间相互吸附的现象）结合后，可催化A、B液显色而造成假阳性标本采集保存不当致细菌污染，菌体中可能含有内源性HRP，会产生
金标法检测HBsAg假阳性和假阴性的原因
金标法假阴性原因1、检测时间短,金标法最适判读时间为15~30分钟,若时间太短就会发生一些弱阳性HBsAg标本出现假阴性。2、灵敏度较低，金标法>1ng/ml,而ELISA法
血培养阳性结果的处理与多级报告程序
培养阳性结果的处理: 传统手工法血培养应该每天至少检查一次，对48h~72h未生长的培养瓶至少应进行需氧传种培养一次。对培养瓶进行肉眼检查，注意下列几点提示有生长： 1. 血与肉汤混合物出现浑浊。 2. 在层上有絮状沉淀，某些链球菌在沉积的红细胞表面上，会有小的“棉球样”生长
使用担体处理原因和方法
常用的担体表面并非惰性，它具有不同程度的催化作用和吸附性（特别是固定液含量低时和分离极性物质时）造成峰拖尾和柱效下降，保留值改变等影响，因而需要预处理。现将一般处理方法简述如下： 1、酸洗法：用浓盐酸加热处理担体20－30分钟，然后用自来水冲洗至中性，再用甲醇漂洗，烘干备用。此法主要除去担体
ELISA检测方法灰区结果原因分析总结
ELISA 测定的阳性判断值, 通常是将大量阴性和阳性人群的测定数据进行统计分析后确定的, 其确定依据为判断结果的假阳性和假阴性率最低。在阳性判断值周围一定范围内之外的测定结果可归为可疑, 亦即ELISA 测定的“灰区”。“灰区”的大小可用统计学方法确定。测定结果处于“灰区”的样本,
乙肝ELISA检测中HBeAg和抗HBe双阳性原因分析
乙型肝炎病毒HBeAg阳性，表明病毒复制活跃、传染性强，与HBsAg同时阳性发生肝癌的危险系数增加60倍，抗-HBe阳性说明病毒复制减少，传染性弱。近年来，普遍使用ELISA一步法，在工作中遇到HBeAg和抗-HBe双阳性的少见模式，为了分析这一现象，笔者进行了研究，现报告如下。1 材料与方法 1.
核酸检测结果阴性正常还是阳性正常
一般阴性代表没有感染，正常。新型冠状病毒是一种新发现的病毒，核酸检测阴性指的就是在患者的呼吸道标本或者是血液标本中没有检测出来新型冠状病毒。一般情况下，间隔一天以上进行连续两次的核酸检测，如果都是阴性就说明患者没有感染新型冠状病毒。对于已经感染的患者，经过治疗后检测阴性，说明患者已经治愈了。新冠病毒
底物量对反应结果的影响
化学反应是化学学习的一个重要内容。物质间发生的化学反应往往错综复杂、变化万千。不少化学反应是需要在一定条件下发生的，缺少了反应条件，有的反应是不能发生的，或进行得很慢。反应物的量的不同对反应结果有影响。1、CO2气体通入NaOH溶液中。当n CO2/n NaOH≤1/2时，反应方程式为CO2+ 2N
底物量对反应结果的影响
化学反应是化学学习的一个重要内容。物质间发生的化学反应往往错综复杂、变化万千。不少化学反应是需要在一定条件下发生的，缺少了反应条件，有的反应是不能发生的，或进行得很慢。反应物的量的不同对反应结果有影响。1、CO2气体通入NaOH溶液中。当n CO2/n NaOH≤1/2时，反应方程式为CO2+ 2N
PCR仪PCR结果出现假阳性是什么原因？
假阳性假阳性是指出现的 PCR 扩增条带与目的靶序列条带一致，有时其条带更整齐，亮度更高。产生的原因有：①引物设计不合适：选择的扩增序列与非目的扩增序列有同源性，因而在进行 PCR 扩增时，扩增出的 PCR 产物为非目的序列；②靶序列太短或引物太短；③靶序列或扩增产物的交叉污染。解决方法有：操作轻柔
PCR无扩增产物的原因及处理办法
原因： 1、模板:含有抑制物，含量低 2、Buffer对样品不合适 3、引物设计不当或者发生降解 4、反应条件：退火温度太高，延伸时间太短对策： 1、纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量 2、更换Buffer或调整浓度 3、重新设计引物（避免
聚丙烯酰氨凝胶电泳凝胶异常的原因分析和处理办法
出现拖尾现象的原因主要是样品融解效果不佳或分离胶浓度过大引起的。此外可能是灌胶时分离胶过多导致浓缩胶很少，不能起到浓缩作用，没有把样品压成一条线。处理办法：加样前离心；选择适当的样品缓冲液，加适量样品促溶剂；电泳缓冲液时间过长，重新配制；降低凝胶浓度；灌胶时分离胶不要过多。出现纹理现象的原因主要是样