化学发光底物检测方法结果阴性的原因和处理办法

更换其它二抗,再次进行检测;再次检测结果仍为阴性,证明底物丧失活性。......阅读全文

化学发光底物检测方法结果阴性的原因和处理办法

更换其它二抗,再次进行检测;再次检测结果仍为阴性,证明底物丧失活性。

化学发光底物检测方法结果阳性的原因和处理办法

  认为二抗及底物活性良好; Western Blot 系统需要进一步优化  优化抗原和抗体浓度的斑点杂交方法:斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度  对于一个给定的抗原,抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。抗原和抗体浓度可通

化学发光底物检测方法结果阳性的原因和处理办法

  认为二抗及底物活性良好; Western Blot 系统需要进一步优化  优化抗原和抗体浓度的斑点杂交方法:斑 点 杂 交 方 法——优 化 抗 原 和 抗 体 浓 度  对于一个给定的抗原,抗体浓度依赖的抗原和抗体本身。抗原和抗体的亲和力,以及一抗与二抗的特异反应都是不同的。抗原和抗体浓度可通

底物化学发光使用方法

1. 印迹膜制备 按常规方法完成SDS-PAGE和电转膜操作,适当的封闭非常重要。可以通过标记一抗或二抗的手段引入HRP,一般采用市售的HRP二抗交联物。仔细地淋洗对于降低背景非常重要,在与HRP交联物温育后,膜片更需仔细洗涤,所有步骤均在室温下完成。2. 化学发光试剂的配置 在使用前等量混合a液和

化学发光底物(化学发光剂)

在化学发光反应中参与能量转移并最终以发射光子的形式释放能量的化合物称为化学发光剂或发光底物。在发光免疫技术中常用的化学发光底物有以下几类。 1、氨基苯二酰肼类主要是鲁米诺及异鲁米诺衍生物,是最常用的一类化学发光剂。鲁米诺(luminol,5'-氨基-2,3-二氢-1,

PCR仪PCR检测结果出现假阴性是什么原因?

假阴性假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因:引物设计不合理,酶失活或酶量不足,模板量太少,退火温度不合适,循环次数过少,产物未及时电泳检测等。解决方法有:重新设计引物,增加酶量或调换酶,增加模板量,调整退火温度,增加循环次数,及时检测扩增产物,一般在 48h 以内进行。

PCR假阴性的原因分析及解决办法

假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因:引物设计不合理,酶失活或酶量不足,模板量太少,退火温度不合适,循环次数过少,产物未及时电泳检测等。解决方法有:重新设计引物,增加酶量或调换酶,增加模板量,调整退火温度,增加循环次数,及时检测扩增产物,一般在 48h 以内进行。

分析真空泵高温的原因和处理办法

 分析真空泵高温的原因以下是对真空泵电机温度高的原因分析:1原因分析(1)电机功率大,工作电流大,发热量大。(2)风扇转速低,风压,风量小。(3)风扇叶片数较少,产生的风量小。(4)电动机附有灰尘、油污,降低了散热能力。(5)真空泵电机所以下是对真空泵电机温度高的原因分析:1原因分析(1)电机功率大

分析真空泵高温的原因和处理办法

  以下是对真空泵电机温度高的原因分析:1原因分析(1)电机功率大,工作电流大,发热量大。(2)风扇转速低,风压,风量小。(3)风扇叶片数较少,产生的风量小。(4)电动机附有灰尘、油污,降低了散热能力。(5)真空泵电机所   以下是对真空泵电机温度高的原因分析:   1原因分析   (1)电机

底物化学发光的用途

非放射性发光系统,用于检测固定在膜上的蛋白,其敏感性达1-5pg。用x光片可快速地获得永久的硬拷贝结果。所含独特的底物足以维持12小时以上的发光,便于反复曝光操作,免疫印迹膜经抗体脱卸处理后可供再次抗体探查使用。适用于痕量蛋白或核酸检测。

ELISA假阳性结果和细胞假阴性结果

假阳性结果和假阴性结果1、标本的采集与保存ELISA试剂盒当标本采集保存不当产生溶血时,红细胞中的血红蛋白释放到血清中,血红蛋白具有过氧化物酶的性质,其通过吸附或“PP效应"(蛋白质间相互吸附的现象)结合后,可催化A、B液显色而造成假阳性标本采集保存不当致细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,会产生

金标法检测HBsAg假阳性和假阴性的原因

金标法假阴性原因1、检测时间短,金标法最适判读时间为15~30分钟,若时间太短就会发生一些弱阳性HBsAg标本出现假阴性。2、灵敏度较低,金标法>1ng/ml,而ELISA法

什么是底物化学发光?

根过氧化酶使试剂中的发光物(luminol)氧化并发光,而试剂中含有增强剂这使得发光增强了1000倍。在免疫印迹中,将复杂的蛋白混合物经sds-page分离,并转移到固相膜上(如nc、pvdf)等,用于免疫学检测,经HRP标记的抗体与膜上的蛋白直接(标记一抗)或间接(标记二抗)反应。

底物化学发光操作注意

1. 试剂每个批号均独立优化,请不要混用或稀释试剂以免降低敏感性;2. 加入一抗后膜不能再干燥;3. 适当地封闭和洗涤膜片至关重要;4. 使用前配置化学发光试剂,配置足够覆盖膜片即可,弃去使用过的混合试剂;5. 使用干净取样头取用每种试剂;6. 第一张片子建议曝光1分钟,观察结果后判断最佳曝光时间可

热电偶的常见故障原因分析和处理办法

发生故障现象:   A热电势比实际值小。   原因分析:   (1)短路。   (2)热电偶接线盒内接线柱间短路。   (3)补偿导线因绝缘烧坏而短路。   (4)补偿导线与热电偶不匹配。   (5)补偿导线与热电偶极性接反。   (6)插入深度不够和安装位置不对。   (7)热电偶冷端温度过高。 

热电偶的常见故障原因分析和处理办法

发生故障现象:   A热电势比实际值小。   原因分析:   (1)短路。   (2)热电偶接线盒内接线柱间短路。   (3)补偿导线因绝缘烧坏而短路。   (4)补偿导线与热电偶不匹配。   (5)补偿导线与热电偶极性接反。   (6)插入深度不够和安装位置不对。   (7)热电偶冷端温度过高。 

底物因素对化学发光法检测促甲状腺激素的影响

  在临床实验中,要求所有项目均应该严格按照标准化操作程序(SOP)进行操作,但实际工作中由于人为或外界因素,实验进程往往会受到干扰,对结果造成一定影响。促甲状腺激素(thyroid stimulating hormone,TSH)是判断甲状腺功能是否正常的首选指标,化学发光法因具有快速、准确、灵敏

核酸检测结果阴性正常还是阳性正常

一般阴性代表没有感染,正常。新型冠状病毒是一种新发现的病毒,核酸检测阴性指的就是在患者的呼吸道标本或者是血液标本中没有检测出来新型冠状病毒。一般情况下,间隔一天以上进行连续两次的核酸检测,如果都是阴性就说明患者没有感染新型冠状病毒。对于已经感染的患者,经过治疗后检测阴性,说明患者已经治愈了。新冠病毒

使用担体处理原因和方法

   常用的担体表面并非惰性,它具有不同程度的催化作用和吸附性(特别是固定液含量低时和分离极性物质时)造成峰拖尾和柱效下降,保留值改变等影响,因而需要预处理。现将一般处理方法简述如下:  1、酸洗法:用浓盐酸加热处理担体20-30分钟,然后用自来水冲洗至中性,再用甲醇漂洗,烘干备用。此法主要除去担体

血培养检测:-MRSA结果或可呈假阴性

     近日,美国食品与药品管理局(FDA)与Cepheid公司联合发布1级召回公告,宣布召回该公司在2008年10月21日~2010年6月21日期间生产和配发的用于GeneXpert Dx系统的Xpert耐甲氧西林金黄色葡萄球菌/金黄色葡萄球菌(MRSA/SA)血培养检测试剂盒。  本次召回产品

ELISA检测方法灰区结果原因分析总结

ELISA 测定的阳性判断值, 通常是将大量阴性和阳性人群的测定数据进行统计分析后确定的, 其确定依据为判断结果的假阳性和假阴性率最低。在阳性判断值周围一定范围内之外的测定结果可归为可疑, 亦即ELISA 测定的“灰区”。“灰区”的大小可用统计学方法确定。测定结果处于“灰区”的样本,

PCR假阴性的原因

假阴性是指不出现特异扩增带。可能原因:引物设计不合理,酶失活或酶量不足,模板量太少,退火温度不合适,循环次数过少,产物未及时电泳检测等。解决方法有:重新设计引物,增加酶量或调换酶,增加模板量,调整退火温度,增加循环次数,及时检测扩增产物,一般在 48h 以内进行。

PCR假阴性的原因

造成PCR假阴性的原因是复杂的,也是多样的。主要有: 1.PCR仪本身的质量问题。PCR仪设计原理上的差异和经常出现的质量问题(如:温控不准等)给临床带来了诸如非特异性扩增(假阳性)、扩增效率下降(假阴性)等问题. 2.离心机问题。离心机的质量或使用不正确,造成离心标本模板没有分离出来造成假阴性,窃

PCR反应出现假阴性结果无扩增条带原因分析

PCR 反应的关键环节有 : ① 模板核酸的制备; ② 引物的质量与特异性; ③ 酶的质量; ④ PCR循环条件; 寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究 , 可能出现的原因有以下几点: 1 ) 模板: ① 模板中含有杂蛋白质; ② 模板中含有Taq酶抑制剂; ③

底物量对反应结果的影响

化学反应是化学学习的一个重要内容。物质间发生的化学反应往往错综复杂、变化万千。不少化学反应是需要在一定条件下发生的,缺少了反应条件,有的反应是不能发生的,或进行得很慢。反应物的量的不同对反应结果有影响。1、CO2气体通入NaOH溶液中。当n CO2/n NaOH≤1/2时,反应方程式为CO2+ 2N

底物量对反应结果的影响

化学反应是化学学习的一个重要内容。物质间发生的化学反应往往错综复杂、变化万千。不少化学反应是需要在一定条件下发生的,缺少了反应条件,有的反应是不能发生的,或进行得很慢。反应物的量的不同对反应结果有影响。1、CO2气体通入NaOH溶液中。当n CO2/n NaOH≤1/2时,反应方程式为CO2+ 2N

新冠病毒核酸检测结果假阴性的再思考

近期专家及民众对2019-新型冠状病毒核酸阳性检出率低、咽拭子屡次阴性、核酸检测与临床诊断不吻合等问题提出各种观点或疑惑。回顾近三年我们对呼吸道感染患儿不同取材部位多种呼吸道病原体检出率的研究,供大家参考,希望对2019-新型冠状病毒核酸检测有所指导,对临床医生选择采样位置以及解读结果有所启示,对民

PCR无扩增产物的原因及处理办法

原因:    1、模板:含有抑制物,含量低    2、Buffer对样品不合适    3、引物设计不当或者发生降解    4、反应条件:退火温度太高,延伸时间太短对策:    1、纯化模板或者使用试剂盒提取模板DNA或加大模板的用量    2、更换Buffer或调整浓度    3、重新设计引物(避免

聚丙烯酰氨凝胶电泳凝胶异常的原因分析和处理办法

两边翘起中间凹下形成原因主要是由于凝胶的中间部分凝固不均匀所致,多出现于较厚的凝胶中。处理办法:待其充分凝固再作后续实验。两边向下中间鼓起形成原因主要出现在蛋白质垂直电泳槽中,一般是两板之间的底部间隙气泡未排除干净。处理办法:可在两板间加入适量缓冲液,以排除气泡。

定硫仪系统部件可能发生的故障及其原因和处理办法

  1、空气净化装置:包括一个流量计、三支玻璃管,一台气泵(电磁泵)及连接胶管。   A、流量计:其进、出气口由于和干燥管相连,可能被干燥管内的硅胶或氢氧化钠颗粒阻塞气路,而使显示流量不稳,或调不到规定流量;其内部如果进入液体或进入的粉尘与潮气结合,将给小浮子造成很大阻力,也造成流量不稳或无法调节