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文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠

投稿人:郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们: 我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。 第一集,关于基因敲除小鼠。 基因敲除小鼠(Knockout Mice),人们使用复杂的方法使小鼠体内的某一个基因不表达,从而使小鼠呈现这个基因缺失的状态,可用于研究这个基因的功能。 但如果某个基因功能特别重要,这个基因缺失可能具有胚胎致死性,那我们就无法得到这种基因敲除的小鼠了,于是人们发明了条件性基因敲除技术。这一技术可以实现在特定的时间、特定的细胞或组织内使某个基因沉默。方法是首先在目的基因(就是打算敲除的那个基因)的两侧分别插入一段名为LoxP的DNA序列(LoxP序列是一段34bp的DNA序列,两端的13个碱基为回文序列,中间的8个碱基决定LoxP的方向。具体序列如下:......阅读全文

文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠

  投稿人:郭晓冲 中国医科大学动物部   写给看文献的你们:   我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。   第一集,关于基因敲除小鼠。   基因敲除小鼠(Knoc

文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠

我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。第一集,关于基因敲除小鼠。基因敲除小鼠(Knockout Mice),人们使用复杂的方法使小鼠体内的某一个基因不表达,从而使小鼠呈现这个

文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠

  投稿人:郭晓冲 中国医科大学动物部   写给看文献的你们:   我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。   第一集,关于基因敲除小鼠。   基因敲除小鼠(Knoc

基因敲除动物实验揭示不孕之谜

  有数据表明,中国平均每8对夫妇中就有一对面临不能自然受孕的问题,而不少采用试管婴儿技术的夫妻,胚胎仍无法正常发育,究竟是什么原因造成的呢?近日,美国《科学》杂志上发表了一篇来自浙江大学生命科学院范衡宇教授和中国科学院动物研究所孙青原研究员团队的论文。论文说,一个名为CRL4的蛋白质复合体对维持卵

Fgf21基因敲除小鼠

背景信息FGF家族成员具有广泛的促有丝分裂和细胞存活特性,并参与多种生物过程,包括胚胎发育、细胞生长、形态发生、组织修复、肿瘤生长和侵袭。成纤维细胞生长因子21(FGF21)是一种肝细胞因子——即由肝脏分泌的一种激素,通过下丘脑室旁核中的FGF21受体信号传导调节糖摄入和对甜食的偏好,并与伏隔核内多

基因敲除小鼠的原理和方法

1.利用基因同源重组进行基因敲除。基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的顺利奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES

动物实验技术:转基因小鼠制备实验

1、 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。2、 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体,

基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用(二)

3. 2 D2 受体在阿片类诱导的运动增强效应实验中, D2 受体KO 小鼠对内源性和外源性阿片类物质诱导的运动增强效应与 WT 小鼠无显著性差异, 表明 D2 受体缺失未影响阿片诱导的运动增强效应。在药物身体依赖性实验中,D2 受体 KO 小鼠和 WT 小鼠的戒断症状没有明显差别,说明 D2

基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用(一)

基因敲除(gene knockout ) 是 80年代初出现的一项新的基因工程技术, 是制备转基因动物的重要技术之一。利用该技术可以培育先天缺陷某一特定基因的动物, 以此研究该特定基因的生理功能或在疾病发生发展中的意义。近年来基因敲除小鼠在药物依赖性研究中也得到广泛的应用。在传统的药物依赖性

基因敲除的实验步骤

构建重组基因载体绝大多数的基因敲除策略都是基于同源重组的机制,其基因载体包括载体骨架、靶基因同源序列和突变序列及选择性标记基因等非同源序列,其中同源序列是影响同源重组效率的关键因素。用电穿孔显微注射方法把重组DNA转入受体细胞(一般是胚胎干细胞)核内。同源重组基因重组时以载体的同源序列取代染色体靶位