文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠

投稿人:郭晓冲 中国医科大学动物部 写给看文献的你们: 我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。 第一集,关于基因敲除小鼠。 基因敲除小鼠(Knockout Mice),人们使用复杂的方法使小鼠体内的某一个基因不表达,从而使小鼠呈现这个基因缺失的状态,可用于研究这个基因的功能。 但如果某个基因功能特别重要,这个基因缺失可能具有胚胎致死性,那我们就无法得到这种基因敲除的小鼠了,于是人们发明了条件性基因敲除技术。这一技术可以实现在特定的时间、特定的细胞或组织内使某个基因沉默。方法是首先在目的基因(就是打算敲除的那个基因)的两侧分别插入一段名为LoxP的DNA序列(LoxP序列是一段34bp的DNA序列,两端的13个碱基为回文序列,中间的8个碱基决定LoxP的方向。具体序列如下:......阅读全文

文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠

  投稿人:郭晓冲 中国医科大学动物部   写给看文献的你们:   我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。   第一集,关于基因敲除小鼠。   基因敲除小鼠(Knoc

文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠

  投稿人:郭晓冲 中国医科大学动物部   写给看文献的你们:   我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。   第一集,关于基因敲除小鼠。   基因敲除小鼠(Knoc

文献中遇到的实验动物知识:基因敲除小鼠

我在这里想写一些看文献时可能遇到的实验动物知识,希望对大家有帮助。为了便于理解,语言偏通俗,可能不够严谨。如果大家希望深入了解实验动物专业知识,欢迎选修实验动物学。第一集,关于基因敲除小鼠。基因敲除小鼠(Knockout Mice),人们使用复杂的方法使小鼠体内的某一个基因不表达,从而使小鼠呈现这个

基因敲除动物实验揭示不孕之谜

  有数据表明,中国平均每8对夫妇中就有一对面临不能自然受孕的问题,而不少采用试管婴儿技术的夫妻,胚胎仍无法正常发育,究竟是什么原因造成的呢?近日,美国《科学》杂志上发表了一篇来自浙江大学生命科学院范衡宇教授和中国科学院动物研究所孙青原研究员团队的论文。论文说,一个名为CRL4的蛋白质复合体对维持卵

Fgf21基因敲除小鼠

背景信息FGF家族成员具有广泛的促有丝分裂和细胞存活特性,并参与多种生物过程,包括胚胎发育、细胞生长、形态发生、组织修复、肿瘤生长和侵袭。成纤维细胞生长因子21(FGF21)是一种肝细胞因子——即由肝脏分泌的一种激素,通过下丘脑室旁核中的FGF21受体信号传导调节糖摄入和对甜食的偏好,并与伏隔核内多

基因敲除小鼠的原理和方法

1.利用基因同源重组进行基因敲除。基因敲除是80年代后半期应用DNA同源重组原理发展起来的。80年代初,胚胎干细胞(ES细胞)分离和体外培养的顺利奠定了基因敲除的技术基础。1985年,首次证实的哺乳动物细胞中同源重组的存在奠定了基因敲除的理论基础。到1987年,Thompsson首次建立了完整的ES

动物实验技术:转基因小鼠制备实验

1、 选取7~8周龄雌性小鼠,阴道口封闭,作为供体,下午3:00左右,每只小鼠腹腔注射PMSG(10 IU)。2、 47~48小时后,每只小鼠腹腔注射HCG(0.8 IU),并与正常公鼠合笼;另取数只适龄母鼠(2月龄以上)作为受体,阴道口潮红,与结扎公鼠合笼。3、第二天上午9:00前观察供体、受体,

基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用(二)

3. 2 D2 受体在阿片类诱导的运动增强效应实验中, D2 受体KO 小鼠对内源性和外源性阿片类物质诱导的运动增强效应与 WT 小鼠无显著性差异, 表明 D2 受体缺失未影响阿片诱导的运动增强效应。在药物身体依赖性实验中,D2 受体 KO 小鼠和 WT 小鼠的戒断症状没有明显差别,说明 D2

基因敲除小鼠在药物依赖性研究中的应用(一)

基因敲除(gene knockout ) 是 80年代初出现的一项新的基因工程技术, 是制备转基因动物的重要技术之一。利用该技术可以培育先天缺陷某一特定基因的动物, 以此研究该特定基因的生理功能或在疾病发生发展中的意义。近年来基因敲除小鼠在药物依赖性研究中也得到广泛的应用。在传统的药物依赖性

基因敲除的实验步骤

实验步骤构建重组基因载体绝大多数的基因敲除策略都是基于同源重组的机制,其基因载体包括载体骨架、靶基因同源序列和突变序列及选择性标记基因等非同源序列,其中同源序列是影响同源重组效率的关键因素。用电穿孔显微注射方法把重组DNA转入受体细胞(一般是胚胎干细胞)核内。同源重组基因重组时以载体的同源序列取代染

基因敲除的实验步骤

构建重组基因载体绝大多数的基因敲除策略都是基于同源重组的机制,其基因载体包括载体骨架、靶基因同源序列和突变序列及选择性标记基因等非同源序列,其中同源序列是影响同源重组效率的关键因素。用电穿孔显微注射方法把重组DNA转入受体细胞(一般是胚胎干细胞)核内。同源重组基因重组时以载体的同源序列取代染色体靶位

小鼠资源库应用Cas9技术获得世界首批基因敲除动物

   CRISPR/Cas系统是细菌进化形成的免疫防御机制。国家遗传工程小鼠资源库瞄准该系统,开发出CRISPR/Cas9技术用于基因组改造,实现了基因精确定点插入,且无需胚胎干细胞,无物种限制,直接注射受精卵,实验周期仅为传统方法的1/10,材料成本也大大降低。  目前,资源库已成功利用该技术获得

动物所大鼠基因敲除工作取得突破

  8月8日,Nature Biotechnology杂志在线发表了中国科学院动物研究所周琪研究员领导的生殖工程研究组的研究论文Simultaneous generation and germline transmission of multiple gene mutations in rat

基因敲除小鼠在抗体药物研发平台的应用

  “千鼠万抗”计划 (Project Integrum) 是百奥赛图抗体药物研发平台的重要组成部分。目标是利用3-5年时间,在全人抗体小鼠RenMab上,逐一对上千个潜在抗体药物靶点进行基因敲除,并利用这些基因敲除小鼠制备抗体的计划。其主要内容包括:   在RenMab上完成1000多个Ta

基因敲除小鼠在抗体药物研发平台的应用

 “千鼠万抗”计划 (Project Integrum) 是百奥赛图抗体药物研发平台的重要组成部分。目标是利用3-5年时间,在全人抗体小鼠RenMab上,逐一对上千个潜在抗体药物靶点进行基因敲除,并利用这些基因敲除小鼠制备抗体的计划。其主要内容包括: 在RenMab上完成1000多个Targets的

研究热点常用明星小鼠资料分享Fgf21基因敲除小鼠

  赛业生物CRISPR-AI敲除小鼠精子库推出两年多来,已推动2000+个课题组加速研究进展,帮助300+家企业在药物研发上争分夺秒。我们统计分析了最畅销的十种CRISPR-AI敲除小鼠品系,或许这反映了目前的一些研究热点。这些品系涵盖了代谢疾病、神经科学、免疫和炎症、肿瘤、m6A甲基化修饰及相关

研究热点常用明星小鼠资料分享Fgf21基因敲除小鼠

  赛业生物CRISPR-AI敲除小鼠精子库推出两年多来,已推动2000+个课题组加速研究进展,帮助300+家企业在药物研发上争分夺秒。我们统计分析了最畅销的十种CRISPR-AI敲除小鼠品系,或许这反映了目前的一些研究热点。这些品系涵盖了代谢疾病、神经科学、免疫和炎症、肿瘤、m6A甲基化修饰及相关

如何选择基因敲除动物模型制备技术?

动物模型是现代生命科学研究的重要工具,特别是基因工程小鼠和大鼠,在基因功能研究、人类生理病理机制研究及新药研发中起着不可替代的作用。近几年来,制 备动物模型的基因修饰技术层出不穷,这不仅包括传统ES打靶、TALEN、CRISPR/Cas9, 还有TetraOne基因敲除新技术。如此繁 多的技

一步生成条件性基因敲除小鼠ESC

  最近发展的基因组编辑工具,包括转录激活因子样效应物核酸酶(TALENs)和CRISPR/Cas9,使我们能够通过诱导双链断裂(DSBs)的非同源末端连接(NHEJ)修复,快速而有效的敲除靶向基因。然而,这种方法不能进行必需基因的功能研究,这类研究通常采用的策略是基于Cre-LoxP系统的条件性基

应用优化CRISPR技术建立基因完全敲除的小鼠及猴

  6月6日,《细胞研究》在线发表了一项成果,应用改进的“C-CRISPR”技术可以获得单基因或多基因功能完全敲除的小鼠及猴。这项研究由中国科学院上海生命科学研究院神经科学研究所、脑科学与智能技术卓越创新中心的杨辉研究组、熊志奇研究组以及神经所苏州非人灵长类研究平台孙强团队合作完成。该研究通过将多个

旅美华裔学者直接参与“基因敲除小鼠”试验

70岁的意大利裔美国人卡佩基等美英三位学者本月8号获得今年的诺贝尔生理学或医学奖。旅美华裔学者邓初夏当年曾是卡佩基科研团队的成员。日前他在接受本台驻美国记者采访时,谈到了自己参与“基因敲除小鼠”试验的感受。 1986年,邓初夏考入犹他大学研究生院,师从卡佩基,成为从事“基因敲除”试验的第一个研究

新一批敲除小鼠序列数据存入基因银行

美国得克萨斯州基因组医学研究所将其敲除小鼠库的超过275000个核苷酸序列信息存入了美国国立卫生研究院的基因银行。 以休斯敦为根据地的得克萨斯州基因组医学研究所于今年5月加入国际敲除小鼠协会。在美国国立卫生研究院号召在国际科学界广泛分享小鼠研究信息后,该研究所表示愿意向美国健康研究院提供基因序列

设计cas9条件性基因敲除小鼠

其关键是构建带有两个Loxp位点的小鼠,即flox(flanked by loxP)小鼠。今天我们就来详细介绍一下如何设计。共分三步:第一步,选择外显子。第二步,设计sgRNA。第三步,设计SSODN。听起来蛮简单的哈?下面我们详细讲讲。第一步,选择外显子。1. 尽量选择敲除所有转录本共用的外显子。

动物行为学实验方法文献综述

前言 人生活在世界中,有各种各样的行为。这些行为构成了我们生活的社会环境。动物也有很多行为,繁殖行为、觅食行为、趋避行为、战斗行为、利他行为等等。动物行为学就是研究动物行为的一门学科。通过学习前人对动物行为学的研究得出的规律,能够以观察、实验的方式了解动物的状态、需求等。作为一门经验性学科,实验方法

基因靶向的基因敲除

实验步骤构建重组基因载体绝大多数的基因敲除策略都是基于同源重组的机制,其基因载体包括载体骨架、靶基因同源序列和突变序列及选择性标记基因等非同源序列,其中同源序列是影响同源重组效率的关键因素。用电穿孔显微注射方法把重组DNA转入受体细胞(一般是胚胎干细胞)核内。同源重组基因重组时以载体的同源序列取代染

AAVTBGCre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用...

AAV-TBG-Cre/GOI在小鼠肝脏特异性基因表达或敲除中的应用与优势分析AAV-TBG-Cre/GOI系统简介:l AAV-TBG-Cre系统是整合了肝脏特异性TBG启动子和Cre重组酶的腺相关病毒载体。Ø TBG启动子是一种基于人甲状腺结合球蛋白(TBG)启动子和微球蛋白增强子的混合型启动子

实验动物科研中常见的小鼠种类

实验动物界谁对人类的贡献最大?我会投小鼠一票,众多科研领域中均离不开小鼠的贡献。向那些为 我们人类健康献身的小鼠致以最崇高的敬意!实验动物主要作为疾病动物模型使用,一般要求遗传背景明确或者来源清晰,主要分为近交系、封闭群等。今天我们一起聊聊那些常见的实验小鼠。免疫缺陷小鼠,最近很火的裸鼠不知谁把我们

动物实验之大小鼠固定篇

  相信经常与大鼠、小鼠打交道的老师都碰到过这样的情况:大鼠、小鼠不配合,导致我们无法进行相应的操作,比如注射,采血等,又比如被大鼠、小鼠咬住了,等到回过神来,发现大鼠或者小鼠已经重重的掉到地上或者实验台上,诸如此类的情况相信还有很多。这些都是我们自己和我们的大鼠、小鼠的本能反应,那如何操作能让我们

中国科学家实现灵长类动物基因定向敲除

  这是两只运用CRISPRA/Cas9技术成功实现基因靶向修饰的食蟹猴(1月10日摄)。   记者从云南省科技厅获悉,经过近一年的努力,中国科学家在云南昆明成功培育了多只被去除特定基因的猴子,实现了基因靶向修饰技术在灵长类动物身上的应用,并于近期在国际权威学术刊物发表了相关成果,将为人类遗传疾病

新技术能同时“敲除”动物体内不同基因

  据《自然》杂志20日报道,瑞士苏黎世联邦理工学院领导的研究团队开发出一种方法,可极大简化和加快对基因功能的研究:使用CRISPR-Cas技术,可同时在单个动物的不同细胞内敲除不同的基因,每个细胞被改变的基因不超过一个,从而能平行观察不同基因变化导致的细胞走向。  追踪疾病遗传原因的一种行之有效的