免疫组化试验抗体选择及常用染色方法

一、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)免疫组织化学是利用抗原抗体的特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组织化学染色技术不仅有较高的敏感性和特异性,其特点是将形态学改变与功能、代谢变化结合起来,直接在组织切片,细胞涂片或培养细胞爬片上定位一些蛋白质和多肽类物质的存在,并可精确到亚细胞结构水平,结合电子计算机图像分析系统或激光扫描共聚集显微术等技术,对被检物质进行定量分析。 免疫组化实验所用的组织和细胞标本有哪些? 实验所用主要为组织标本和细胞标本两大类,前者包括石蜡切片(病理大片和组织芯片)和冰冻切片,后者包括组织印片、细胞爬片和细胞涂片。其中石蜡切片是制作组织标本最常用、最基本的方法,对于组织形态保存好,且能作连续切片,有利于各种染色对照观察;还能长期存档,供回顾性研......阅读全文

免疫组化试验抗体选择及常用染色方法

一、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)免疫组织化学是利用抗原抗体的特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组织化学染色技术不仅有较高的敏感性

常用免疫组化染色方法

常用免疫组化染色方法,真空负压免疫荧光染色法染细胞培养片。1. 将细胞爬于载玻片或盖玻片的片子用生理盐水浸洗数次,彻底洗去蛋白液。2.纯丙酮固定5-10分钟。3.PBS浸洗3次,每次1分钟。4.加入选用的第一抗体孵育真空负压处理15分钟。5.PBS洗3次,每次2分钟。6.加入荧光抗体孵育真空负压处理

免疫组化实验中常用染色方法

根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素—抗生物素染色法最常用。

免疫组化抗体选择要点及流式抗体选择常识

一抗的选择要点1.选择单克隆还是多克隆抗体?由一种B细胞产生的单一特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就像导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种B细胞产生抗体,形成抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中,一般单克隆

双重染色抗体的选择

用未偶联一抗进行细胞培养物或组织切片的双重免疫染色要求一抗来源于不同物种并且二抗分别识别其中之一,二抗说明书应描述其与其它物种来源的免疫球蛋有否有交叉吸附。

常用免疫组化方法

目前几种常用免疫组化方法简单介绍1)免疫荧光方法是最早建立的免疫组织化学技术。它利用抗原抗体特异性结合的原理,先将已知抗体标上荧光素,以此作为探针检查细胞或组织内的相应抗原,在荧光显微镜下观察。当抗原抗体复合物中的荧光素受激发光的照射后即会发出一定波长的荧光,从而可确定组织中某种抗原的定位,进而还可

免疫组化中抗体选择要求

1、一抗选择要点 (1)选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆产生抗体,形成好几种单克隆抗体混杂物,称为多克隆抗体。在抗原抗体反应中,

免疫组化中抗体选择要求

  免疫组化中抗体选择要求   1、一抗选择要点   (1)选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆产生抗体,形成好几种单克隆抗

免疫组化中抗体选择要求

  免疫组化中抗体选择要求   1、一抗选择要点   (1)选择单克隆还是多克隆抗体。由一种克隆产生的特异性抗体叫做单克隆抗体,单克隆抗体能目标明确地与单一特异抗原决定簇结合,就象导弹精确地命中目标一样。另一方面,即使是同一个抗原决定簇,在机体内也可以由好几种克隆产生抗体,形成好几种单克隆抗

酶标记抗体免疫组化染色知识点

  (一)直接法:将酶直接标记在特异性抗体上,与组织细胞内相应的抗原进行特异性反应,形成抗原-抗体-酶复合物,最后用酶底物显色。直接法的优点在于操作简便及特异性强,缺点是敏感性低,制备的抗体种类有限。  (二)间接法:将酶标记在第二抗体上,先将第一抗体(特异性抗体)与相应的组织抗原结合,形成抗原抗体

免疫组化实验中常用的抗体是什么?

免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体,单克隆抗体是一个B淋巴细胞克隆分泌的抗体,应用细胞融合杂交瘤技术免疫动物制备。多克隆抗体是将纯化后的抗原直接免疫动物后,从动物血中所获得的免疫血清,是多个B淋巴细胞克隆所产生的抗体混合物。

石蜡切片免疫组化染色方法

1、载玻片的处理:抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂,对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下:1.1

免疫组化染色方法大汇总

免疫组化的方法很多,新方法层出不穷,如二步法,要不断更新,与时俱进。虽然这些方法各有其特色,但总的来说,只要应用恰当均可获得较为满意的结果。方法的选择并不是影响免疫组化结果的主要因素。问题在于一个单位应常规地、固定地使用一种方法,不宜交替使用不同的方法或经常更换方法。一旦选定一种方法,应务必使其标准

常用的免疫组化技术方法

根据生物技术实验总结我们知道,免疫组化技术就是用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,其又称之为免疫细胞化学技术。下面简单介绍几种常用的免疫组化技术方法,希望能够加深大家对免疫组化技术的了解。目前常用的几种免疫组化技术www.biovo

常用的涂片染色方法

(1)巴氏染色法:本法染色特点是细胞具有多色性颜色,色彩鲜艳多彩。涂片染色的透明性好,胞质颗粒分明,胞核结构清晰,如鳞状上皮过度角化细胞胞质呈橘黄色;角化细胞显粉红色;而角化前细胞显浅绿色或浅蓝色,适用于上皮细胞染色或观察阴道涂片中激素水平对上皮细胞的影响。此方法的缺点是染色程序比较复杂。(2)苏木

常用染色方法有哪些?

  根据标记物的不同分为免疫荧光法,免疫酶标法,亲和组织化学法,后者是以一种物质对某种组织成分具有高度亲合力为基础的检测方法。这种方法敏感性更高,有利于微量抗原(抗体)在细胞或亚细胞水平的定位,其中生物素——抗生物素染色法最常用。

细菌染色标本检查常用的染色方法

  细菌染色标本检查常用的染色方法是检验主管技师考试辅导的部分内容,以下是医学教育网对这块内容的整理,希望对考生有所帮助:  细菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脱色→复染)。  1.单染色法:用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色。细菌经单染色法处理后,可观察其形态、排列、

细菌染色标本检查常用的染色方法

  细菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脱色→复染)。  1.单染色法:用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色。细菌经单染色法处理后,可观察其形态、排列、大小及简单的结构,但不能显示各种细菌染色性的差异。  2.复染色法:用两种或两种以上的染料染色的方法,称为复染色法或鉴别染

免疫组化非特异性染色及控制方法

一、非特异性染色的识别常出现在组织边缘、胶原纤维及血浆渗出处,坏死组织及固定不良的组织中心处。表现为弥漫性,均匀性的背景染色。也可以是随机分布的阳性反应产物点、团或块状。二、非特异性染色的原因1. Ig与Fc受体结合多见于冰冻切片(特别是淋巴造血组织,淋巴细胞,单核细胞,组织细胞表面多),主要是和二

如何选择实验抗体(一抗的选择原理及方法)?

检测任何目的靶蛋白都有不止一种抗体可供选择,在同一个抗体公司,可能会有好几种,甚至好几十种;在不同的抗体公司,那就更多了。那怎样在琳琅满目的抗体中,选择自己实验需要的抗体呢?主要考虑如下几种因素:分析自己实验应用的实验方法是哪种?分析自己实验中标本的种属是哪种动物或人的?分析样本中的蛋白质的结构性质

常用的免疫组化技术方法介绍

   根据生物技术实验总结我们知道,免疫组化技术就是用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,其又称之为免疫细胞化学技术。下面简单介绍几种常用的免疫组化技术方法,希望能够加深大家对免疫组化技术的了解。    目前常用的几种免疫组化技术w

免疫组化的概念和常用方法

概念和常用方法介绍1、定义用标记的特异性抗体对组织切片或细胞标本中某些化学成分的分布和含量进行组织和细胞原位定性、定位或定量研究,这种技术称为免疫组织化学(immunohistochemistry)技术或免疫细胞化学(immunocytochemistry)技术。2、原理根据抗原抗体反应和化学显色原

常用HE染色试剂配制方法

 苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosin staining) ,简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。  一、苏木素  (1) Harris苏木素液  配方: labdd.com  苏木精1 g ;无水乙醇10 ml;蒸馏水200 ml;钾明矾20g;HgO 0.5 g  

常用HE染色试剂配制方法

苏木精—伊红染色法(hematoxylin-eosinstaining),简称HE染色法,石蜡切片技术里常用的染色法之一。 一、苏木素 (1)Harris苏木素液 配方:labdd.com 苏木精1g;无水乙醇10ml;蒸馏水200ml;钾明矾20g;HgO0.5g 先将苏木精溶于无水乙醇中,备

血细胞常用的染色方法

血细胞常用的染色方法是检验技师需要了解的知识,医学教育网搜索整理如下: 细胞涂片,在用普通光学显微镜观察之前需要固定和染色。固定是将细胞蛋白质和多糖等成分迅速交联凝固,以保持其原有结构不发生变化。染色的目的是使细胞的主要结构,如细胞质、细胞核、细胞器等染上不同的颜色,便于显微镜下观察。各种细胞涂片

微生物常用染色法及染色程序

微生物染色的基本原理,是借助物理因素和化学因素的作用而进行的。物理因素如细胞及细胞物质对染料的毛细现象、渗透、吸附作用等。化学因素则是根据细胞物质和染料的不同性质而发生地各种化学反应。酸性物质对于碱性染料较易吸附,且吸附作用稳固;同样,碱性物质对酸性染料较易于吸附。如酸性物质细胞核对于碱性染料就有化

免疫组化染色步骤

石蜡切片免疫组化染色步骤1、载玻片的处理:    抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响,极易造成脱片。为保证试验的正常进行,可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine 等几种试剂,对已清洗的载玻

细菌染色标本检查常用的染色方法是什么

  细菌染色的基本程序:涂片(干燥)→固定→染色(初染→媒染→脱色→复染)。  1.单染色法:用一种染料将细菌和周围物体染成同一种颜色。细菌经单染色法处理后,可观察其形态、排列、大小及简单的结构,但不能显示各种细菌染色性的差异。  2.复染色法:用两种或两种以上的染料染色的方法,称为复染色法或鉴别染

解析免疫组化染色出现无色片的原因及解决方法

良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节,每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果,因此,要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色

脱落细胞标本制作常用染色方法

1.HE染色 此法染色效果也好,只是胞质色彩不丰富,不能用于观察阴道涂片对雌激素水平测定。优点是操作简易,试剂易配制。2.巴氏染色 此法染色特点是细胞具有多色性,色彩丰富鲜艳,胞内结构清晰,染色效果好,是细胞病理学检查常用的方法,尤其是观察女性雌激素水平对阴道上皮细胞的影响。此法的缺点是操作程序复杂