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流式细胞仪荧光补偿调节方法

荧光补偿是指修正荧光光学信号在探测器之间相互渗漏并被数字化检测的过程。自单激光双色分析出现后,此过程变得十分重要。每种荧光素分子都具有自身的光谱发射范围。这些发射光谱之间存在相互叠加,在某些情况下此现象十分明显。 举例来说,如下图为FITC与PE荧光发射光谱的叠加情况。在一个双探测器系统中,可设计将FITC荧光从PE荧光中分离出来。检测荧光发射光时根据其波长和分布将选择其中一小部分进入探测器,这部分荧光可由不同的滤光片从全部发射光中选择特定波长范围的荧光来获得。这样FITC荧光由530nm的滤光片选择后送入探测器中;PE荧光则是由575nm滤光片来选择。但是有部分FITC荧光会出现在PE探测器中,这是因为它的发射光涵盖两个探测器滤片的过滤范围。这部分信号我们称之为荧光渗漏,因为它是由FITC荧光渗漏到PE探测器中的。 注意想要设计一组荧光滤片来只收集FITC或PE信号是不可能的;因为当同时使用这两种荧光染料时荧光叠加总是......阅读全文

细胞凋亡检测操作流程三--JC-1检测凋亡细胞线粒体膜电...

细胞凋亡检测操作流程三--JC-1检测凋亡细胞线粒体膜电位改变凋亡检测操作流程  三、JC-1检测凋亡细胞线粒体膜电位改变BD™ MitoScreen (JC-1)线粒体膜电位检测试剂盒(551302):组分描述JC-1(染料)4瓶,每瓶用于25个样本。冻干粉,使用前稀释至储存液

跟着论文做实验:凋亡的多参数检测

  大家都知道,在细胞凋亡的早期,线粒体膜电位的下降是一个标志性的事件。而对于线粒体膜电位的检测,JC-1这种亲脂性阳离子染料是个很好的工具,也使用了很多年。  当线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,产生红色荧光;而当线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,此

JC-1分析线粒体膜电位的方法-2

3. COMMENTARY3.1 Background information The technique of JC-1 staining has been developed with the intent to detect DY in intact, viabl

线粒体荧光探针大全:TMRM,Mitotracker,JC-1(2)

MitoTracker Green FM ProbeMitochondria in cells stained with nanomolar concentrations of our patented MitoTracker Green FM dye (M7514) exhibit bright

JC-1分析线粒体膜电位的方法

Analysis of Mitochondrial Membrane Potentialwith the Sensitive Fluorescent Probe JC-1 Andrea Cossarizza and Stefano Salvioli Department of B

细胞染色方法归纳

Hoechst染色hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合 (主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258两种  hoechsts33258,h

多功能酶标仪测定荧光强度

  HSC-T6、Dulbeceo’s Modafied Eagle’s Medium(DMEM, Sigma);新生小牛血清(杭州四季青公司);Hoechst33258 (Sigma);MTT、JC-1和DMSO(Sigma);次氮基三乙酸铁(Fe-NTA, Sigma);其余为国产分析纯试剂。G

JC-1分析线粒体膜电位的方法-3

3.6 Key references1. Kroemer G., Zamzani N., Susin S.A. Mitochondrial control of apoptosis. Immunol. Today, 18: 44-51, 1997.2. Susin S.A., Z

细胞凋亡检测方法简介

细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分

细胞凋亡研究

前言:细胞凋亡是细胞程序性死亡中最具特征性的一种。它在生物发展,体内平衡,甚至在不同的疾病,例如:癌症,的发病机制都扮演着重要的角色。在过去的几十年里,科学家们对细胞凋亡进行了广泛的研究。细胞凋亡的过程中,细胞会有不同的形态变化。同时,细胞膜(plasma membrane),线粒体(mitocho

JC2000D1型接触角测量仪

JC2000D1型接触角测量仪标配组件1、usb数字CCD摄像头                1个2、连续变倍光学系统  &nb

DNA Ladder的测定方法是怎么一回事?

  不同细胞不同状态是有不同死法的,具体是细胞凋亡、坏死、还是程序性坏死,需要进一步排查分析来确定。而细胞凋亡是个复杂的过程,针对凋亡时期不同,检测的方法有所不同。那如何去确定哪条途径被触发,在哪个步骤被阻断,以及抑制剂是否能够抑制呢?下面介绍几种常用的测定方法。  一:细胞凋亡的形态学检测  发生

日科学家研制基因编码“温度计” 可潜入细胞测温度

  如果你问一个生物学家,某个细胞下一步会做什么?他可能先要问你该细胞的电压、氧化性、pH值、渗透性、葡萄糖浓度等等,然后才可能据此预测它是正要发起一个动作电位,还是要进入有丝分裂,抑或正在走向凋亡。但如果你能轻松地得到亚细胞范围的温度曲线图,比如每个线粒体、中心粒甚至内质网区的温度,就像母亲给孩子

日科学家研制基因编码“温度计” 可潜入细胞测温度

  如果你问一个生物学家,某个细胞下一步会做什么?他可能先要问你该细胞的电压、氧化性、pH值、渗透性、葡萄糖浓度等等,然后才可能据此预测它是正要发起一个动作电位,还是要进入有丝分裂,抑或正在走向凋亡。但如果你能轻松地得到亚细胞范围的温度曲线图,比如每个线粒体、中心粒甚至内质网区的温度,就像

常用的几种细胞凋亡检测方法详细步骤(二)

第三种 线粒体膜势能的检测 线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆

常用细胞凋亡检测方法(三)

三、线粒体膜势能的检测   线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位DYmt的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt崩溃,则细胞凋亡不可逆

细胞凋亡检测方法

  细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。一、细胞凋亡的形态学检测  根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞凋亡形态学检测方法。  1 光学显微镜和倒

检测细胞凋亡的实验方法比较-3

◆ 细胞坏死与细胞凋亡细胞凋亡与坏死是两种完全不同的细胞凋亡形式,根据死亡细胞在形态学、生物化学和分子生物学上的差别,可以将二者区别开来。细胞凋亡的检测方法有很多,下面介绍几种常用的测定方法。 一、细胞凋亡的形态学检测   根据凋亡细胞固有的形态特征,人们已经设计了许多不同的细胞

线粒体荧光探针大全:TMRM,Mitotracker,JC-1(1)

线粒体荧光探针信息大全 (Probes for Mitochondria)包括各种常用探针,如JC-1,JC-9,TMRM,TMRE等Mitochondria are found in eukaryotic cells, where they make up as much as 10% of th

华东师范大学最新文章构建药物筛选模型

  来自华东师范大学生命科学学院,中国科学院上海药物研究所的研究人员建立了一种快速且高效地分析线粒体膜电位的高通量筛选模型,通过对线粒体染料JC-1浓度及孵育时间,待筛选化合物孵育时间等实验条件的优化, 确立了筛选条件,并在鱼藤酮,丙二酸,抗霉素等线粒体抑制剂中进行验证,这将为发现治疗代谢综合征

细胞凋亡检测实验——线粒体膜势能的检测

实验方法原理线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA 断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt 崩溃,则细胞凋亡不可逆转。 线粒体跨膜电位

常用细胞凋亡检测方法(图)

一、细胞凋亡的形态学检测1、光学显微镜和倒置显微镜(1) 未染色细胞:凋亡细胞的体积变小、变形,细胞膜完整但出现发泡现象,细胞凋亡晚期可见凋亡小体。贴壁细胞出现皱缩、变圆、脱落。(2) 染色细胞:常用姬姆萨染色、瑞氏染色等。凋亡细胞的染色质浓缩、边缘化,核膜裂解、染色质分割成块状和凋亡小体等典型的凋

水泥胶砂电动抗折试验机检验标准规范

水泥胶砂电动抗折试验机技术要求:        3.1 示值        3.1.1 示值相对误差不超过±1%。  &

杂质蛋白鉴定与定量的完美结合—Hi3分析方法

液质数据中,不但含有蛋白药序列表达是否正确的肽图信息,其它杂质蛋白同样可以被挖掘出来。然而,单纯的杂质蛋白鉴定却又是不够远远的,其确切的含量信息同样至关重要。沃特世PLGS软件可以在肽图液质数据中,进一步鉴定其中的杂质蛋白,并其相对含量信息进行分析。 一、“顺便”完成的杂质蛋白鉴定与相对定量使用相应

大鼠卵巢颗粒细胞的原代培养与鉴定(二)

1.4 颗粒细胞鉴定1.4.1 HE染色 取生长旺盛的第4 d的细胞,用0.25%胰蛋白酶-0.02%EDTA消化后制成1×105/ml的细胞悬液,种植于已预置好小盖玻片的24孔培养板中,放人CO2 培养箱中,在37 ℃、5% CO2及完全饱和湿度条件下进行培养。当细胞生长至70%融合时取出

分子生物学检验技术的分析对象是什么?

分子生物学检验技术的分析对象是什么?:一、病原生物基因1.菌种鉴定2.确定病毒感染和病毒载量 3.病毒分型 4.细菌耐药监测和分子流行病学调查 二、基因变异1.致病基因2.线粒体基因3.肿瘤相关基因三、基因多态性1.基因定位和疾病相关性分析2.疾病诊断和遗传咨询3.多基因病的研究4.器官移植配型和个

全面解析糖化血红蛋白

全面解析糖化血红蛋白:资料链接: 随着糖尿病发病率的逐年攀升,糖尿病患者人群逐渐扩大,中国已成为继印度之后位居第二位的糖尿病国家。据WHO流行病学调查资料统计,按目前糖尿病的增长速率,到2025年全世界糖尿病人口将由1995年的1亿3000万达到3亿,其中发达国家将由5100万增长到7200万,增长

使用显微镜通过形态学检测细胞凋亡

使用显微镜通过形态学检测细胞凋亡     细胞凋亡的检测有定性或定量两类方法。定性可以通过形态学观察,包括光镜、电镜和荧光显微镜等,也可以通过琼脂糖电泳来检测特征性DNA梯形条带。定量研究的首选方法为流式细胞仪。原位末端标记法则既可用于定性,又可用于半定量。此

流式细胞仪高级技巧(Purdue)

Introduction   A. CossarizzaWorkshop SponsorsMethods in analysis of apoptosis and cell necrosis.  Z. Darzynkiewicz Commo

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 Introduction   A. CossarizzaWorkshop SponsorsMethods in analysis of apoptosis and cell necrosis.   Z. Darzynkiewic