流式细胞仪荧光补偿调节方法

荧光补偿是指修正荧光光学信号在探测器之间相互渗漏并被数字化检测的过程。自单激光双色分析出现后,此过程变得十分重要。每种荧光素分子都具有自身的光谱发射范围。这些发射光谱之间存在相互叠加,在某些情况下此现象十分明显。 举例来说,如下图为FITC与PE荧光发射光谱的叠加情况。在一个双探测器系统中,可设计将FITC荧光从PE荧光中分离出来。检测荧光发射光时根据其波长和分布将选择其中一小部分进入探测器,这部分荧光可由不同的滤光片从全部发射光中选择特定波长范围的荧光来获得。这样FITC荧光由530nm的滤光片选择后送入探测器中;PE荧光则是由575nm滤光片来选择。但是有部分FITC荧光会出现在PE探测器中,这是因为它的发射光涵盖两个探测器滤片的过滤范围。这部分信号我们称之为荧光渗漏,因为它是由FITC荧光渗漏到PE探测器中的。 注意想要设计一组荧光滤片来只收集FITC或PE信号是不可能的;因为当同时使用这两种荧光染料时荧光叠加总是......阅读全文

线粒体荧光探针大全:TMRM,Mitotracker,JC1(3)

Mitochondrion-Selective Rhodamines and RosaminesRhodamine 123Rhodamine 123 (R302; FluoroPure Grade, R22420; Figure 12.22) is a cell-permeant, cationic

线粒体荧光探针大全:TMRM,Mitotracker,JC1(2)

MitoTracker Green FM ProbeMitochondria in cells stained with nanomolar concentrations of our patented MitoTracker Green FM dye (M7514) exhibit bright

线粒体荧光探针大全:TMRM,Mitotracker,JC1(5)

Monoclonal Antibodies Specific for Proteins in the Oxidative Phosphorylation SystemOxidative phosphorylation (OxPhos) activity occurs in the mitochond

线粒体荧光探针大全:TMRM,Mitotracker,JC1(6)

Pyruvate DehydrogenaseMolecular Probes has available a series of antibodies against the human pyruvate dehydrogenase (PDH) complex (Table 12.6), a lar

线粒体荧光探针大全:TMRM,Mitotracker,JC1(1)

线粒体荧光探针信息大全 (Probes for Mitochondria)包括各种常用探针,如JC-1,JC-9,TMRM,TMRE等Mitochondria are found in eukaryotic cells, where they make up as much as 10% of th

线粒体荧光探针大全:TMRM,Mitotracker,JC1(4)

Nonyl Acridine OrangeNonyl acridine orange (A1372) is well retained in the mitochondria of live HeLa cells for up to 10 days, making it a useful probe

JC1细胞试剂盒的使用方法

前面我们介绍过 JC-1 的检测原理( JC-1/FITC,让我们来个彩虹的约定! ) , JC-1 的试剂盒到手啦,但是该怎么操作呢?  MCE JC-1 Kit 资料 ● ●规格:1T, 1 mL (100 万细胞)用途:早期细胞凋亡检测设备:荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、荧光分光光度计或流式细

JC1分析线粒体膜电位的方法

Analysis of Mitochondrial Membrane Potentialwith the Sensitive Fluorescent Probe JC-1 Andrea Cossarizza and Stefano Salvioli Department of Biomedical

JC1分析线粒体膜电位的方法2

3. COMMENTARY3.1 Background information The technique of JC-1 staining has been developed with the intent to detect DY in intact, viable cells. For th

JC1分析线粒体膜电位的方法3

3.6 Key references1. Kroemer G., Zamzani N., Susin S.A. Mitochondrial control of apoptosis. Immunol. Today, 18: 44-51, 1997.2. Susin S.A., Zamzami N.,

细胞凋亡检测操作流程三JC1检测凋亡细胞线粒体膜电...

细胞凋亡检测操作流程三--JC-1检测凋亡细胞线粒体膜电位改变凋亡检测操作流程  三、JC-1检测凋亡细胞线粒体膜电位改变BD™ MitoScreen (JC-1)线粒体膜电位检测试剂盒(551302):组分描述JC-1(染料)4瓶,每瓶用于25个样本。冻干粉,使用前稀释至储存液(Stock Sol

跟着论文做实验:凋亡的多参数检测

  大家都知道,在细胞凋亡的早期,线粒体膜电位的下降是一个标志性的事件。而对于线粒体膜电位的检测,JC-1这种亲脂性阳离子染料是个很好的工具,也使用了很多年。  当线粒体膜电位较高时,JC-1聚集在线粒体的基质中,形成聚合物,产生红色荧光;而当线粒体膜电位较低时,JC-1不能聚集在线粒体的基质中,此

线粒体膜电位荧光探针Cell-Meter-线粒体膜电位(MMP)

人体的ATP有95%为线粒体所提供,合成的ATP通过线粒体内膜ADP/ATP载体与细胞质中的ADP交换进入细胞质,参与细胞的各种需能过程,因此线粒体与细胞维持正常功能密切相关。线粒体在呼吸氧化过程中,将所产生的能量以电化学势能储存于线粒体内膜,在内膜两侧造成质子及其他离子浓度的不对称分布而形成线粒体

细胞凋亡检测方法

细胞发生凋亡时,不同区域内(如细胞膜、细胞浆、线粒体、细胞核等)会发生不同的生理生化改变。因此,针对不同区域的细胞凋亡检测要采用不同的方法。1)Annexin V 凋亡检测原理:Annexin Ⅴ是一种分子量为35-36kD的Ca依赖性磷脂结合蛋白,正常细胞中,磷脂酰丝氨酸(phosphatidyl

Absin-细胞生物学常用试剂——细胞染料

IP(碘化丙啶)染色:是一种可对DNA染色的细胞核染色试剂,常用于细胞凋亡检测。碘化丙啶是一种核酸染料呈红色,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期的细胞和坏死细胞由于细胞通透性的增加,PI能够透过细胞膜而使细胞核染红,用PI 单一染色观测培养细胞,只能表示细胞的坏死情况,而不是凋亡。 Annexin

细胞凋亡检测实验——线粒体膜势能的检测

实验方法原理线粒体在细胞凋亡的过程中起着枢纽作用,多种细胞凋亡刺激因子均可诱导不同的细胞发生凋亡,而线粒体跨膜电位的下降,被认为是细胞凋亡级联反应过程中最早发生的事件,它发生在细胞核凋亡特征(染色质浓缩、DNA 断裂)出现之前,一旦线粒体DYmt 崩溃,则细胞凋亡不可逆转。 线粒体跨膜电位的存在,使

手把手教您给细胞染色

细胞凋亡、细胞计数都会用到细胞染色今天我们就聊聊:新手入门如何轻松搞定细胞染色,给你的细胞一个精致瑞丽的妆容?细胞骨架的荧光染色台 盼 蓝 染 色台盼蓝染色是细胞培养常见的实验,用于细胞计数,检测细胞活性。健康的正常细胞能够排斥台盼蓝,而死亡的细胞,膜的完整性丧失,通透性增加,细胞可被台盼蓝染成蓝色

细胞染色方法归纳

Hoechst染色hoechst可以穿过活细胞膜与细胞核结合 (主要为凋亡活细胞)在紫外光下将核染为蓝色. Hoechst染细胞核会影响共聚焦显微镜对该样本其他荧光的观察效果.hoechst有hoechest33342和hoechst33258两种  hoechsts33258,hoechs

流式细胞仪在实验室主要用于哪些检测

  流式可以检测的样本很多:  细胞表面的蛋白,通过荧光抗体直接标记  细胞内部的蛋白,细胞固定,通透后再用荧光抗体识别  细胞内部的DNA含量,细胞固定,通透后加DNA染料  细胞内部钙离子浓度,直接加钙离子浓度荧光染料染色  细胞内部线粒体膜电位,比如JC-1,罗丹明染料  使用微球阵列,可以同

多功能酶标仪测定荧光强度

  HSC-T6、Dulbeceo’s Modafied Eagle’s Medium(DMEM, Sigma);新生小牛血清(杭州四季青公司);Hoechst33258 (Sigma);MTT、JC-1和DMSO(Sigma);次氮基三乙酸铁(Fe-NTA, Sigma);其余为国产分析纯试剂。G

LSCM细胞亚微结构

细胞亚微结构(细胞器探针)一般的光学显微镜由于分辨率有限,在观察细胞器结构时受到一定的限制,而共聚焦激光扫描显微镜可获得较一般普通光学显微镜分辨率高的细胞内线粒体、高尔基复合体、内质网、溶酶体等细胞器图像,同时还可动态观察活细胞状态下细胞器的形态学变化情况,此外还可通过光学切片即断层扫描技术进行三维

日科学家研制基因编码“温度计”-可潜入细胞测温度

  如果你问一个生物学家,某个细胞下一步会做什么?他可能先要问你该细胞的电压、氧化性、pH值、渗透性、葡萄糖浓度等等,然后才可能据此预测它是正要发起一个动作电位,还是要进入有丝分裂,抑或正在走向凋亡。但如果你能轻松地得到亚细胞范围的温度曲线图,比如每个线粒体、中心粒甚至内质网区的温度,就像

日科学家研制基因编码“温度计”-可潜入细胞测温度

  如果你问一个生物学家,某个细胞下一步会做什么?他可能先要问你该细胞的电压、氧化性、pH值、渗透性、葡萄糖浓度等等,然后才可能据此预测它是正要发起一个动作电位,还是要进入有丝分裂,抑或正在走向凋亡。但如果你能轻松地得到亚细胞范围的温度曲线图,比如每个线粒体、中心粒甚至内质网区的温度,就像母亲给孩子

华东师范大学最新文章构建药物筛选模型

  来自华东师范大学生命科学学院,中国科学院上海药物研究所的研究人员建立了一种快速且高效地分析线粒体膜电位的高通量筛选模型,通过对线粒体染料JC-1浓度及孵育时间,待筛选化合物孵育时间等实验条件的优化, 确立了筛选条件,并在鱼藤酮,丙二酸,抗霉素等线粒体抑制剂中进行验证,这将为发现治疗代谢综合征

LN229人胶质瘤细胞凋亡和细胞焦亡的比较

细胞凋亡和细胞焦亡的比较1、概念(1)细胞焦亡(Pyroptosis)细胞焦亡是一种炎症程序性细胞死亡,由各种病理刺激引发,如中风、心脏病发作、癌症、微生物感染等。其它已知类型的程序性细胞死亡包括凋亡和坏死。    研究发现,细胞焦亡依赖于caspase-1,这从根本上将细胞焦亡与其它细胞死亡途径区

细胞凋亡检测方法简介

细胞凋亡是指细胞在生长到一定阶段及某些生理过程中,会受到多因素和机制的严格调控而进入死亡。这是一个动态的过程,会涉及一系列复杂的生化反应, 是一个需要酶参与的级联反应,同时也涉及不同基因的表达及调控、信号传导。其中有几项生理过程能被用来检测凋亡的发生,因此多参数分析法对于准确检测这一过程十分

细胞样本在流式细胞仪分选前需要进行哪些荧光标记?

细胞样本在流式细胞仪分选前进行的荧光标记取决于具体的实验目的和研究的细胞类型。以下是一些常见的荧光标记类型:细胞表面标志物标记:例如,用于区分不同免疫细胞亚群的 CD3、CD4、CD8、CD19 等标记。识别肿瘤细胞的特异性表面抗原,如 HER2 等。细胞内蛋白标记:如细胞因子(如 IFN-γ、IL

细胞凋亡检测解决方案

细胞凋亡与程序性死亡其实从严格的词学意义上来说,细胞程序性死亡(PCD)与细胞凋亡是有很大区别的。细胞程序性死亡的概念是1956年提出的,PCD是个功能性概念,描述在一个多细胞生物体中某些细胞死亡是个体发育中的一个预定的,并受到严格程序控制的正常组成部分。例如蝌蚪变成青蛙,其变丨态过程中尾部的消失伴

细胞凋亡与细胞焦亡区别在哪?

1、概念(1)细胞焦亡(Pyroptosis)细胞焦亡是一种炎症程序性细胞死亡,由各种病理刺激引发,如中风、心脏病发作、癌症、微生物感染等。其它已知类型的程序性细胞死亡包括凋亡和坏死。研究发现,细胞焦亡依赖于caspase-1,这从根本上将细胞焦亡与其它细胞死亡途径区分开来。由于caspase-1是

细胞凋亡的检测方法综述5

4、检测细胞膜成分变化的Annexin V 联合PI法原理:磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine, PS)正常位于细胞膜的内侧,但在细胞凋亡的早期,PS可从细胞膜的内侧翻转到细胞膜的表面,暴露在细胞外环境中(图3)。Annexin-V是一种分子量为35~36KD的Ca2+依赖性磷脂