BAC/PAC文库的构建

BAC文库的构建 实验方法原理 BAC是一种装载DNA大片段的克隆载体系统,用于人、动物和植物基因组文库构建。BAC具有插入片段较大(几千个碱基至350kb)、嵌合率低、遗传稳定性好、易于操作等优点。BAC文库的构建是基因组较大的真核生物基因组研究的重要基础,可用于真核生物重要基因及全基因组物理作图、重要功能基因的定位克隆、基因结构及功能分析。 实验材料 EcoRⅠ消化的基因组DNA 载体DNA 电转化感受态细菌细胞 试剂、试剂盒 ......阅读全文

BAC/PAC-文库的构建

BAC (Bacterial Artificial Chromosome,细菌人工染色体)文库可用于:(1)全基因组测序;(2)构建物理图谱、染色体步查;(3)基因筛选;(4)基因图位克隆。实验方法原理BAC是一种装载DNA大片段的克隆载体系统,用于人、动物和植物基因组文库构建。BAC具有插入片段较

BAC/PAC-文库的构建

BAC文库的构建             实验方法原理 BAC是一种装载DNA大片段的克隆载体系统,用于人、动物和植物基因组文库构建。BAC具有插入片段较大(几千个碱基至350kb)

DNA-Isolation-From-BAC--PAC-Clones

DNA Isolation From BAC & PAC Clones  This is a rapid alkaline lysis miniprep method for isolating DNA from large PAC clones. It is a modifi

Large-Scale-Plasmid,-Cosmid,-BAC,-PAC,-and-Fosmid-DNA-Isolation

DNA Isolation by a Cleared Lysate Method Followed by Double Acetate Precipitation Version 3b - updated September 26, 1999The Most Recent Roe Lab Imple

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Once high molecular weight (HMW) DNA has been prepared it must somehow be fragmented and DNA in the desired size range isolated. In general, as the de

Construction-of-BAC-Libraries:SOLUTIONS-FOR-BAC-LIBRARY-CONSTRUCTION

SOLUTIONS FOR BAC LIBRARY CONSTRUCTION10X Homogenization Buffer (HB) stock: (1 liter)IngredientAmountFinal ConcentrationTrisma base12.1 g0.1 MKCl59.7

细菌人工染色体

The Construction of Bacterial Artificial Chromosome (BAC) Libraries (complete manuscript) (Clemson University Genomics Institute)  Construction of BAC

Protocol-for-Construction-of-BAC-Libraries

Protocol for Construction of BAC Libraries       The bacterial artificial chromosome cloning (BAC) system is emerging as the system of choice f

BAC-EndSequencing

BAC End-Sequencing (Diana Bocskai) For every 4 mls of culture, dissolve the BAC DNA pellet in 40 µl of water. for example: Usually each BAC is g

How-to-build-a-BAC-library

Introduction   The most important aspect  of our cloning  vectors is that they are based on   the E. coli F-factor   replicon. It allows for  strict 

BAC-DNA分离方法-Isolation-of-BAC-DNA-from-Largescale-Cultures

Isolation of BAC DNA from Large-scale CulturesJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourne, AustraliaDavid W. Russe

粘粒

Preparation of Cosmid DNAPreparation of Cosmid DNA from 50 ml Cultures (Donis Keller Lab)Cosmid vectors containing foreign DNA inserts are known to re

粘粒

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基因组DNA文库构建必备实验技巧

基因组DNA文库用途十分广泛,如用于人类及动植物基因组学研究,基因表达调控研究,分析、分离特定的基因片段等。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为四大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。一、分离基因组DNA(gDNA) 毫无

基因组DNA文库构建必备实验技巧1

基因组DNA文库用途十分广泛,如用于人类及动植物基因组学研究,基因表达调控研究,分析、分离特定的基因片段等。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为四大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。一、分离基因组DNA(gDNA) 毫无

BAC文库构建方法与技巧

  基因组DNA文库有十分广泛的用途,如用于分析、分离特定的基因片段,用以基因表达调控、人类及动植物基因组工程的研究。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为4大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。   一、分离基因组DNA

BAC文库构建方法与技巧

  基因组DNA文库有十分广泛的用途,如用于分析、分离特定的基因片段,用以基因表达调控、人类及动植物基因组工程的研究。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为4大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。   一、分离基因组DNA

BAC文库构建方法与技巧

基因组DNA文库有十分广泛的用途,如用于分析、分离特定的基因片段,用以基因表达调控、人类及动植物基因组工程的研究。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为4大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。一、分离基因组DNA(gDNA)

Construction-of-BAC-Libraries:Megabase-DNA-Isolation

Megabase DNA IsolationMegabase-size DNA isolation from plantsTo construct large insert DNA libraries in BAC and YAC vectors, methods must be developed

基因组DNA文库构建的基本流程

基因组  DNA文库有十分广泛的用途,如用于分析、分离特定的基因片段,用以基因表达调控、人类及动植物基因组工程的研究。通常情况下,基因组文库构建的基本流程可以归为4大步骤:分离基因组DNA、对基因组DNA作相关的处理、将基因组DNA片段连接入载体、将重组载体转入宿主细胞。 一、分离基因组DN

将大片段插入-DNA-导入哺乳动物细胞和胚胎实验2

基本方案2 将细菌人工染色体(BAC或PAC)引入到哺乳动物细胞和小鼠胚胎中实验材料纯化的 BAC DNA试剂、试剂盒RNase A原核的注射缓冲液透析缓冲液I乙醇小鼠胚胎哺乳动物细胞灭菌素仪器、耗材含有合适的抗生素的LB培养基Qiagen Midi-prep 试剂盒培养箱高速离心机高速离心管玻璃离

小量培养物中分离-BAC-DNA

            实验方法原理 小量 BAC DNA 是从 5 ml BAC 转化细胞培养物中制备的。DNA 的制备采用碱裂解法。BAC DNA 的产量可达 0.1~0.4  μg,足够用于限制酶切分析、PCR 或 Southern 印迹。

大量培养物中分离-BAC-DNA

BAC 重组子的精细分析,包括详细的限制酶切图谱、DNA 测序或亚克隆,所需 DNA 量都超过小量制备所能提供的量。本方案的制备流程适用于重组 BAC 的大规模培养物。500 ml BAC 转化菌的平均产量为 20~25 μg BAC DNA。还可用柱层析对 DNA 产物进一步纯化。本实验来源「分子

Screening-BAC-filters-with-nonradioactive-probes

(Protocol for a single high-density BAC colony filter (HDR filter) of 22 cmx22 cm) to be screened using Amersham''s ECL hybridization kit; thi

小量培养物中分离-BAC-DNA

实验方法原理 小量 BAC DNA 是从 5 ml BAC 转化细胞培养物中制备的。DNA 的制备采用碱裂解法。BAC DNA 的产量可达 0.1~0.4  μg,足够用于限制酶切分析、PCR 或 Southern 印迹。实验材料 限制性内切核酸酶大肠杆菌试剂、试剂盒 乙醇异丙醇DNA提取液碱性裂解

小量培养物中分离-BAC-DNA

小量 BAC DNA 是从 5 ml BAC 转化细胞培养物中制备的。DNA 的制备采用碱裂解法。BAC DNA 的产量可达 0.1~0.4  μg,足够用于限制酶切分析、PCR 或 Southern 印迹。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理小量 BAC DNA 是从 5

大量培养物中分离-BAC-DNA

            实验方法原理 BAC 重组子的精细分析,包括详细的限制酶切图谱、DNA 测序或亚克隆,所需 DNA 量都超过小量制备所能提供的量。本方案的制备流程适用于重组 BAC 的大规模培养物。500 ml BAC 转化菌的平均产量为 20~25 μ

大量培养物中分离-BAC-DNA

实验方法原理 BAC 重组子的精细分析,包括详细的限制酶切图谱、DNA 测序或亚克隆,所需 DNA 量都超过小量制备所能提供的量。本方案的制备流程适用于重组 BAC 的大规模培养物。500 ml BAC 转化菌的平均产量为 20~25 μg BAC DNA。还可用柱层析对 DNA 产物进一步

PAC集成电路的封装特点

PAC(pad array carrier)凸点陈列载体,BGA 的别称(见BGA)。