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至今为止，抗原修复有许多种方法，在这些方法中，有的是根据抗体的要求来进行，有的是根据抗原的表达程度来进行，我们则对每种病例每项检测，都要求必须进行抗原修复，以达到抗原全面表达的*佳状态。 1. 真空负压抗原修复法： ① 切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇真空负压处理5分钟。 ③自来水洗，蒸馏水洗。 ④0.01M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0)，真空负压干燥箱预先调至95 ℃，真空负压处理10分钟。 ⑤待修复注降至室温的一，PBS洗3次，随后按选好的免疫组化染色方法进行染色。 2. 微波辐射抗原修复法： ①切片脱蜡至水。 ②0.3%H2O2甲醇处理10分钟。 ③自来水洗，蒸馏水洗。 ④ 0.01 M柠檬酸盐缓冲液(PH6.0)，于微波炉内微波辐射10分钟，如检测Er和Pr则需要20辐射分钟左右。&n......阅读全文
实验原理： 抗体和抗原之间的结合具有高度的特异性，免疫组织化学正是利用了这一原理。先将组织或细胞中的某种化学物质提取出来，以此作为抗原或半抗原，通过免疫动物后获得特异性的抗体，再以此抗体去探测组织或细胞中的同类的抗原物质。由于抗原与抗体的复合物是无色的，因此还必须借助于组织化学的方法将抗原
欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作，建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会（CCP）免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法，同时，发现和推广标准化的染色程序，改善和提高免疫组化实验的可靠性，使免疫组化技术更具标
免疫组化染色注意事项免疫组化染色方法已不是什么很难的问题，操作步骤简单也易掌握，但要染好免疫组化，其中方法的技巧将是每位操作者在实际工作中不断摸索和探讨的事，但最基本的应从以下方面加以注意：（1）去除内源酶及内源性生物素一般我们进行免疫组化标记的都是一些生物体组织，其中自身含有一定量的内源酶和内源性
免疫组化染色方法已不是什么很难的问题，操作步骤简单也易掌握，但要染好免疫组化，其中方法的技巧将是每位操作者在实际工作中不断摸索和探讨的事，但最基本的应从以下方面加以注意：（1） 去除内源酶及内源性生物素 一般我们进行免疫组化标记的都是一些生物体组织，其中自身含有一定量的内源酶和内源性生物素，而免疫组
尽管固定对于组织形态的保留是必不可少的，但这一过程对IHC/ICC检测也有不良影响。固定可能会改变蛋白的生化特性，如目的表位被掩盖，或不再与一抗结合。表位的掩盖可能是由氨基酸与表位的交联、表位附近无关肽段的交联、表位构象的改变或抗原静电荷的改变引起的。抗原修复指的是逆转表位掩盖和恢复表位-抗体结
三、免疫组化实验中的抗原修复1．酶消化：如胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白水解酶2．抗原热修复：高压法、微波法、水煮法众所周知，免疫组化染色中最关键的莫过于抗原修复，而绝大多数常用抗体的修复是通过加热来完成的，热抗原修复优于酶消化，更有效，染色结果更易一致，操作单一。3．修复时间：既要获得最强的染色结果，又
经甲醛固定的部分组织细胞，因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇，使免疫组化标记敏感性明显降低，因此在染色前，有些抗原需进行修复或暴露。抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法，常用胰蛋白酶及胃蛋白酶，配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和
8、脱蜡：免疫组化的脱蜡步骤与常规H&E脱蜡步骤相同，免疫组化实验室中脱蜡需与H&E常规脱蜡分离，以保证脱蜡彻底，否则可能导致染色结果的异常。三、免疫组化实验中的抗原修复1、酶消化：如胰蛋白酶、胃蛋白酶、蛋白水解酶2、抗原热修复：高压法、微波法、水煮法众所周知，免疫组化染色中最关键的
石蜡切片免疫组化染色步骤1、载玻片的处理： 抗原修复过程中，由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。为保证试验的正常进行，可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysin
实验概要掌握石蜡切片免疫组化染色实验中载玻片的处理，常用酶消化，抗原热修复及基本实验步骤。实验步骤1. 载玻片的处理 1) APES：现用现配。将洗净的玻片放入以1:50比例丙酮稀释的APES中，停留20~30秒钟，取出稍停片刻，再入纯丙酮溶液或蒸馏水中
1、载玻片的处理：抗原修复过程中,由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。这里选用ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂，对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下：（1）APES：现用现配。将洗净的玻片
1、载玻片的处理：抗原修复过程中，由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。为保证试验的正常进行，可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI- 9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂，对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下：1.1
1、载玻片的处理：抗原修复过程中，由于高温、高压、辐射等诸多因素的影响，极易造成脱片。为保证试验的正常进行，可选用我公司提供的ZLI-9001 APES、ZLI-9003 HistogripTM或ZLI-9005 Poly-L-Lysine等几种试剂，对已清洗的载玻片进行处理。具体方法如下：1.1
IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚？它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术，由于技术相对简单且直观，在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多；每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本；固定标本该用醇还是醛；如何选择最合适的一抗；抗
（一）免疫组化染色假阳性及其对策 1、消除内源酶的影响在涉及免疫过氧化酶的各种染色中，均用过氧化物酶来标记抗体，酶的作用是催化底物，使显色剂显色，正常组织中也含有一定量的过氧化物酶，其同样也能催化底物显色，而影响免疫组化染色的特异性，因此在加入标记酶前应设法将其灭活，以保证染色反应的特异
IHC/ICC/IF ,傻傻分不清楚？它们都是用于定位检测抗原表达的免疫检测技术，由于技术相对简单且直观，在科研和临床上都得到了大量使用。但是影响最终检测效果的变量非常多；每一个具体的检测都会遇到多个需要调整的变量。具体到选择何种方法来保存组织样本；固定标本该用醇还是醛；如何选择最合适的一抗；抗原修
（一）免疫组化染色假阳性及其对策 1、消除内源酶的影响在涉及免疫过氧化酶的各种染色中，均用过氧化物酶来标记抗体，酶的作用是催化底物，使显色剂显色，正常组织中也含有一定量的过氧化物酶，其同样也能催化底物显色，而影响免疫组化染色的特异性，因此在加入标
免疫组化染色方法 SP法1）脱蜡、水化；2）PBS洗2～3次各5分钟；3）3%H2O2（80%甲醇）滴加在TMA上，室温静置10分钟；4）PBS洗2～3次各5分钟； 5）抗原修复；6）PBS洗2～3次各5分钟；7）滴加正常山羊血清封闭液,室温20分钟。甩去多余液体。8）滴加Ⅰ抗50μl，室
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题，大体归纳起来，主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。
免疫组织化学方法成功与否关键在于抗原决定簇的保存和暴露.组织经甲醛固定.甲醛的醛基与抗原蛋白的氨基交联,使决定簇的构像改变.从而影响检测蛋白表达.要充分暴露抗原决定簇，通常用到抗原修复锅Antigen Retriever。强烈推荐EMS最具有竞争力的一款产品，适于甲醛固定的组织，经石蜡包埋
免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理，检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛，成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题，大体归纳起来，主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。现在
验材料新鲜组织试剂、试剂盒二甲苯酒精H2O2抗原修复液枸橼酸钠缓冲液石蜡福尔马林PBSDAB苏木素树胶丙酮打孔液柠檬酸钠APES仪器、耗材恒温摇床高压锅塑料切片架耐温玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰冻切片机载玻片实验步骤一．石蜡切片免疫组化染色实验步骤：1．石蜡切片脱蜡至水：（石蜡切片染色前应置60℃ 1
实验材料 新鲜组织试剂、试剂盒 二甲苯酒精H2O2抗原修复液枸橼酸钠缓冲液石蜡福尔马林PBSDAB苏木素树胶丙酮打孔液柠檬酸钠APES仪器、耗材 恒温摇床高压锅塑料切片架耐温玻璃容器-80℃冰箱恒冷冰冻切片机载玻片实验步骤 一．石蜡切片免疫组化染色实验步骤：1．石蜡切片脱蜡至水：（石蜡切片染色前应置
（6）结果判断免疫组化的结果判断有两种方法：一是对以检测结果阳性细胞指数来定性(如核抗原的标记)，判断方法是以一个规野中阳性细胞数不总细胞癿百分比，再取10个相同视野算取平均指数。另一种方法以染色阳性强度和阳性检出率相结合而定，一般阳性细胞数在0-25为阴性，25-50为十，50-75为十十，75以
如何随心所欲的做好免疫组化？免疫组化（Immunohistochemistry) 至今也有八十余年的历史了，从 1930 年免疫组化的理论被提出讨论，一直到 1941 年以带有荧光色素的抗体，成功地观察到组织中肺炎双球菌抗原的存在，至此之后不断对于方法改良创新，也就形成了我们实验中才使用的免
做过病理实验的人都知道，实验看似容易，但真想把它做好，还是需要花上很长一段时间去积累和摸索经验。我从事病理实验已有 6 年多了，在这段时间里，我做过许许多多病理相关实验，刚开始啥也不懂，一味按照网上操作流程来做，但做的结果往往并不是十分理想，最终结果未能达到预期的效果。经过一段时间的浏览和学习，在论
欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作，建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会（CCP）免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法，同时，发现和推广标准化的染色程序，改善和提高免疫组化实验的可靠性，使免疫组化技术更具标准化，
欧美国家相继开展了免疫组化质量控制工作，建立了一套比较完善的质量控制方法和程序。中国病理工作者委员会（CCP）免疫组化研究中心借鉴国外的先进经验并结合我国当前的实际情况开始探索一种适合我国免疫组化质控的方法，同时，发现和推广标准化的染色程序，改善和提高免疫组化实验的可靠性，使免疫组化技术更具标准化，
免疫组织化学（Immunohistochemistry，IHC）是利用抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂（荧光素、酶、金属离子、同位素）显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质），对其进行定位、定性及定量的一项技术。IHC的实验流程和方法总体不难，但做出漂亮的染色结果却不容易，
一、免疫组织化学(Immunohistochemistry,IHC)免疫组织化学是利用抗原抗体的特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究。免疫组织化学染色技术不仅有较高的敏感性