免疫组化实验过程中的注意事项
如何随心所欲的做好免疫组化？免疫组化（Immunohistochemistry) 至今也有八十余年的历史了，从 1930 年免疫组化的理论被提出讨论，一直到 1941 年以带有荧光色素的抗体，成功地观察到组织中肺炎双球菌抗原的存在，至此之后不断对于方法改良创新，也就形成了我们实验中才使用的免疫组化这门技术，先来淡谈一下免疫组化为何八十几年来还是都是实验室中的重要的实验项目之一。人体的器官是由最小单位细胞所组成的，一般实验不论是从细胞研究蛋白或是基因，我们往往都会想知道通过最小单位的细胞放大到组织后，我们所研究的蛋白或是基因会是以何种方式的呈现在组织上呢？这时不论是研究蛋白 (免疫组化 Immunohistochemistry) 或是研究基因（原位杂交法 chromogenicin situ hybridization，CISH) 就不难理解这两门技术的重要性了。我们首先针对实验来进行讨论，一般做组化的同仁一定会遇......阅读全文
免疫组化实验过程中的注意事项
如何随心所欲的做好免疫组化？免疫组化（Immunohistochemistry) 至今也有八十余年的历史了，从 1930 年免疫组化的理论被提出讨论，一直到 1941 年以带有荧光色素的抗体，成功地观察到组织中肺炎双球菌抗原的存在，至此之后不断对于方法改良创新，也就形成了我们实验中才使用的免
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1．固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好
免疫组化实验过程中的要点和技巧
1．固定：最好用4%的多聚甲醛固定液。对于冰冻切片，甲醛固定有时比冰冻丙酮好；但对于不同的组织和抗原，可选用不同的固定液。 有时候商品化的抗体会有比较适合而推荐的固定液，请于购置前注意说明书。 Bouin S固定液：饱和苦味酸750ml，甲醛250ml，冰醋酸50ml，其对组织的穿透力较强，固定较好
免疫组化实验注意事项
当免疫组化染色没有出现预期结果时，应系统地查找原因，而每一次只能排除一种可能的原因。那么在做免疫组化实验注意事项有哪些呢？下面我们来详细了解一下： 对照/标本无染色 ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂，包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入，是否孵育
PCR实验过程中的注意事项
PCR产物的电泳检测时间 一般为48h以内,有些最好于当日电泳检测,大于48h后带型不规则甚至消失.PCR反应的关键环节有①模板核酸的制备,②引物的质量与特异性,③酶的质量及, ④PCR循环条件.寻找原因亦应针对上述环节进行分析研究.酶切分析：根据PCR产物中限制性内切酶的位点,用相应的酶切、电
双重免疫组化实验原理及注意事项
双重免疫组化是科研中的较好的一种免疫组化方法，其原理就是根据阳性表达部位和阳性表达区域不同所建立的一种直观的多色定位的染色方法。其标记的对象是两种或两种以上的细胞部位。主要标记部位如下： 1.膜+浆型 2.膜+核型 3.浆+核型 切不可膜+膜，核+核，以免影响效果和颜色重
双重免疫组化实验原理及注意事项
双重免疫组化是科研中的较好的一种免疫组化方法，其原理就是根据阳性表达部位和阳性表达区域不同所建立的一种直观的多色定位的染色方法。其标记的对象是两种或两种以上的细胞部位。主要标记部位如下： 1.膜+浆型 2.膜+核型 3.浆+核型 切不可膜+膜，核+核，以免影响效
免疫组化实验
实验方法原理 免疫组织化学又称免疫细胞化学，是指带显色剂标记的特异性抗体在组织细胞原位通过抗原抗体反应和组织化学的呈色反应，对相应抗原进行定性、定位、定量测定的一项新技术。它把免疫反应的特异性、组织化学的可见性巧妙地结合起来，借助显微镜(包括荧光显微镜、电子显微镜)的显像和放大作用，在细胞、亚细胞水
进口pcr管实验过程中的注意事项
一、进口pcr管实验过程中的注意事项： 实验操作注意事项尽管扩增序列的残留污染大部分是假阳性反应的原因，样品间的交叉污染也是原因之一，因此，不仅要在进行扩增反应是谨慎认真，在样品的收集、抽提和扩增的所有环节都应该注意。 1、戴一次性手套，若不小心溅上反应液，立即更换手套。 2、使用一次性吸
实验反应釜在化工实验过程中的注意事项
实验反应釜是化工行业中的常见设备，是专门用来作化学反应容器的设备，产品具有使用安全可靠、维护简便、适用范围广等特点。用户只有科学的操作才可以让他们保持良好的工作状态，那么它在使用时应该注意些什么呢？ ①在反应釜中做不同介质的反应，应首先查清介质对主体材料有无腐蚀。对瞬间反应剧烈，产生大量气
免疫组化实验原理
首先来谈一下免疫组织化学（IHC, Immunohistochemistry）、免疫细胞化学（ICC, Immunocytochemistry）和免疫荧光(IF, immunofluorescence technic )的共通之处和区别。 平常说的 免疫组化 就是用石蜡切片做的免疫组织
免疫组化的实验试剂及实验步骤
一、试剂（1）PBS缓冲液（pH7.2～7.4）：NaCl 137mmol/L，KCl 2.7mmol/L，Na2HPO4 4.3mmol/L， KH2PO4 1.4mmol/L。（2）0.01mol/L柠檬酸盐缓冲液（CB，pH6.0，1000ml）：柠檬酸三钠 3g，柠檬酸 0.4g。（3）0.
高压釜在实验室过程中的注意事项
下面就实验室使用高温高压反应釜必须注意的事项介绍如下： 1、高温高压釜要在指定的地点使用，并按照使用说明进行操作。 2、查明刻于主体容器上的试验压力、使用压力及zui高使用温度等条件，要在其容许的条件范围内进行使用。 3、压力计所使用的压力，zui好在其标明压力的1/2以内使用
免疫组化实验方法
一、免疫组化（Immunohistochemistry,IHC/ Immunocytochemistry, ICC）原理免疫组化是应用免疫学基本原理--抗原抗体反应，即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂 （荧光素、酶、金属离子、同位素） 显色来确定组织细胞内抗原（多肽和蛋白质
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP法 卵白素-生物素-过氧化物酶复合物（ABC）法 链霉亲和素—生物素—过氧化物酶复合物（SABC）法
石蜡切片免疫组化实验
实验方法原理 根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入底物显色。实验材料 石蜡切试剂、试剂盒 PBS柠檬酸盐缓冲液蒸馏水增强剂酶标抗鼠 兔聚合物苏木素酒精二甲苯树胶盐酸二氨基联苯胺仪器、耗材 烘箱微波盒塑料切片架显微镜胶头
石蜡切片免疫组化实验
即用型(Envision)快速酶免疫组化二步法免疫组化可应用于：（1）确定组织细胞内抗原 (多肽和蛋白质)，对其进行定位、定性及定量的研究；（2）诊断异常细胞，指导治疗。实验方法原理根据聚合酶技术把辣根过氧化物酶抗鼠或/和抗兔IgG分子结合在多聚酶上形成多聚物分子,其与待检的抗原特异性的结合后，加入
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组
在玻璃蒸馏装置实验过程中减压注意事项
玻璃蒸馏装置由蒸馏烧瓶、冷凝器、接受器、加热器组成，其中烧瓶颈口磨口瓶塞上连接有漏斗和旋塞阀，磨口瓶塞下部连接导液管，进行蒸馏分析试验时，化学试剂可经由漏斗、旋塞阀、磨口瓶塞、导液管进入烧瓶内试样的液面下，避免反应气体从颈口逸出，提高分析准确度，防止污染环境。 玻璃蒸馏装置即在刮板蒸发器的基础
简述实验室冻干机冻干过程中的注意事项
1、制冷系统二次启动，须在3分钟之后，这样有利于压机寿命； 2、如果托盘及外挂冻干瓶同时使用，先放托盘物料，待半小时后制冷温度为-50℃或-80℃、压力为30mTorr时再外挂冻干瓶，以免使挂瓶物料融化； 3、物料必须冻实，预冻温度最好在-30℃以下，冻干样品非水溶解物(如有机溶解物)或者为
免疫组化抗原修复注意事项
经甲醛固定的部分组织细胞，因固定过程中可能会形成醛键或羧甲基而封闭部分抗原决定簇，使免疫组化标记敏感性明显降低，因此在染色前，有些抗原需进行修复或暴露。抗原修复方法可分为化学方法和物理方法。化学方法是以酶消化方法，常用胰蛋白酶及胃蛋白酶，配制浓度与消化时间要适度。常用的物理方法有单纯加热、微波处理和
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策1
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策1
良好的免疫组化染色切片是正确判断染色结果的基础和前提。由于免疫组化染色过程中存在很多步骤或环节，每一个步骤或环节都可能影响到染色的最终结果，因此，要做好一张高质量的免疫组化切片并不是一件非常容易的事。需要病理技术员和病理医生密切配合、相互协调、共同努力才能保证做出合格的免疫组化切片。虽然免疫组化染色
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及其对策2
2、切片边缘着色切片边缘着色也是一种常见的现象，这种现象称为边缘效应。产生的原因：（1）组织边缘与玻片粘贴不牢，边缘组织松脱漂浮在液体，每次清洗不易将组织下面试剂洗尽所致。解决办法：制备优质的胶片（APES或多聚赖氨酸），切出尽量薄的组织切片，不厚于4微米，组织的前期处理应规范，尽量避免选用坏死较多
免疫组化染色过程中存在的问题、原因分析及对策2
3）、DAB变质和显色时间太长：DAB最好现用现配，如有沉渣应进行过滤后再用。配制好的DAB不应存放时间太长，因为在没有酶的情况下，过氧化氢也会游离出氧原子与DAB产生反应而降低DAB的效力，未用完的DAB存放在冰箱里几天后再用这种似乎节约的办法是不可取的。DAB的显色最好在显微镜下监控，达到理想的
石蜡切片免疫组化实验2
链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结SP法实验方法原理SP（streptavidin-perosidase）法，即链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连结法。SP法是最常使用的方法。试剂、试剂盒二甲苯酒精PBS双氧水枸橼酸缓冲液羊血清工作液辣根过氧化物酶链霉素卵白素苏木素DAB仪器、耗材冰箱显微镜烧杯玻璃缸
石蜡切片免疫组化实验4
实验方法原理SABC(Strept Avidin-Biotin Complex)法是一种显示组织和细胞中抗原分布的简便而敏感的免疫组化染色方法，是众多免疫组织化学方法的一种。SABC法：一抗+ 生物素标记二抗+ 滴加试剂SABC（链霉卵白素+ 辣根酶标记生物素）+ 辣根酶底物显色。目前常用的亲和素从