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叶绿体(chloroplast)分离

设备:Hitachi CF—7D2离心机,T5SS或T4SS或T7A转头50ml PP 离心管CP—MX ,CP—WX超速离心机,R28S转头,40ml PA管。(或其他品牌离心机,同类转头)溶液配置:A液:0.35M Sorbitol,(山梨醇),50mM Tris—HCL (PH8.0) 5mM EDTA-Na2 (使用前加入2-mercaptoethanol 及 BSA 终浓度0.1%(v/v)) B液:0.35M Sorbitol,50mM Tris—Hcl (PH8.0) 25mM EDTA—Na2C液:30%(w/w)蔗糖,50mM Tris-Hcl(PH8.0) 25mM EDTA—Na2D液:52%(w/w)蔗糖,50mM Tris-Hcl (PH8.0) 25mM EDTA—Na2 分离步骤:1.菠菜液40g+A液200ml,制成匀浆,过滤2.CF7D2或同类离心机2500RPM×15分,4℃,50mlPP管,......阅读全文

离体叶绿体的制备以及完整度的测定

实验概要分离方法一般有两种,一是酶消化方法,把叶片表皮撕去后,用纤维素酶和果胶酶消化细胞壁,得到原生质体,再把原生质体通过尼龙网小孔(孔径20μm),使原生质体破裂而释放出完整叶绿体,但此方法分离得到的叶绿体数量有限。另一种是用机械方法,先用捣碎机破碎叶片,再分步离心,可以大量制备叶绿体。这里主要介

叶绿体的制备及其对染料的还原

实验概要分离与纯化叶绿体的方法,了解细胞器的一般分离程序及叶绿体的光还原活性。实验原理细胞或组织和分离介质混匀,经破碎匀浆后用差速离心法,经几次不同转速可以获得不同的细胞器。离体的完整具有光合活性的叶绿体的制备就是采用这种方法。  被分离的离替叶绿体是否具有光合活性,可以用不同的方法来鉴定

叶绿体的分离与荧光观察

实验概要本实验介绍了叶绿体分离的基本原理及操作步骤。有助于了解叶绿体分离的一般原理和方法,并熟悉应用荧光显微镜方法观察叶绿体荧光现象。实验原理叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器,能发生特有的能量转换。利用低速离心机可以分离叶绿体,其分离在等渗溶液(0.35mol/L氯化钠或0.4mol/L蔗糖溶液)

叶绿体的分离与荧光观察

叶绿体足植物细胞所特有的能量转换细胞器,光合作川就是在叶绿体中进行的。由于具有这一重要功能,所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器,利用低速离心即可分离集中进行各种研究。实验目的一、通过植物细胞叶绿体的分离。了解细胞器分离的一般原理和方法。二.观

张立新团队发现相分离驱动叶绿体内蛋白分选的新机制

  高等植物的叶绿体是十亿年前蓝藻被真核生物吞噬后经内共生演化而来,共有3000个左右的蛋白,其中95%以上由核基因编码。核基因编码的叶绿体蛋白在细胞质中合成后,通过叶绿体内、外被膜和类囊体膜转运通道运输到叶绿体内的不同区域使叶绿体行使光合作用功能。因此,研究叶绿体蛋白跨膜运输方式对于探讨叶绿体的生

湖北大学,河南大学发Cell:叶绿体蛋白运输与分选机制

  光合作用是地球上最大规模地利用太阳能,把二氧化碳和水合成为有机物,并放出氧气的过程。叶绿体是植物光合作用场所。叶绿体是由光合细菌共生演变而来的,在光合作用及其他多种重要生理过程中发挥着关键性的作用。叶绿体具有半自主性,95%叶绿体蛋白是由核基因编码的,胞质合成为前体后,通过叶绿体外被膜和内被膜上

机械法分离叶绿体

一、原理研磨叶片得到的匀浆,经过滤、离心可制备叶绿体。叶绿体的被膜比较脆弱,分离叶绿体应在等渗的缓冲溶液中,0~4℃温度下进行。叶绿体活力会随着离体时间延长而不断下降,因此,分离工作尽可能在短时间内完成。二、仪器与用具冰箱;离心机;扭力天平;显微镜;pH计;研钵;量筒;移液管;离心管;脱脂纱布等。分

叶绿体的分离与荧光观察实验方法与步骤

叶绿体  足植物细胞所特有的能量转换细胞器,光合作川就是在叶绿体中进行的。由于具有这一重要功能,所以它一直是细胞生物学、遗传学和分子生物学的重要研究对象。叶绿体是植物细胞中较大的一种细胞器,利用低速离心即可分离集中进行各种研究。 实验目的 一、通过植物细胞叶绿体  的

科学家发现相分离驱动叶绿体内蛋白分选的新机制

  高等植物的叶绿体是十亿年前蓝藻被真核生物吞噬后经内共生演化而来,共有3000个左右的蛋白,其中95%以上由核基因编码。核基因编码的叶绿体蛋白在细胞质中合成后,通过叶绿体内、外被膜和类囊体膜转运通道运输到叶绿体内的不同区域使叶绿体行使光合作用功能。因此,研究叶绿体蛋白跨膜运输方式对于探讨叶绿体的生

植物细胞叶绿体DNA的分离纯化

实验方法原理本实验首先是制备植物新鲜组织匀浆、过滤,分离出完整的叶绿体,然后通过蔗糖密度梯度离心,把叶绿体与其他亚细胞结构分离开来。完整叶绿体经蛋白酶K酶解后,再通过酚-氯仿抽提获得高纯度的叶绿体DNA。实验材料植物新鲜幼嫩叶片试剂、试剂盒缓冲液A(提取缓冲液)缓冲液B(裂解缓冲液)TE缓冲液蔗糖溶

植物细胞线粒体DNA的提取

实验方法原理分离线粒体DNA和叶绿体DNA的原理是基本一致的。本方法首先是分离完整的细胞器,然后从细胞器中提取DNA。要获得高纯度的细胞器DNA,关键是要把所要的细胞器与其他亚细胞结构分离开来,这可以通过差速离心或梯度离心来完成。完整的细胞器经裂解后,可以通过CsCl离心或酚-氯仿抽提获得DNA。在

叶绿体色素的提取与分离

植物叶绿体色素主要有三类:1)叶绿素 2)类胡萝卜素 3)藻胆素。高等植物叶绿体中含有前两类,藻胆素仅存在于藻类植物中。实验方法原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(

从豌豆组织分离叶绿体实验

叶绿体分离实验材料叶子组织                                       &nb

从豌豆组织分离叶绿体实验

叶绿体分离             实验材料 叶子组织

叶绿体被膜完整性的测定

一、原理由于玻璃氰化钾不能透过被膜,故完整叶绿体在等渗介质中不能进行玻璃氰化钾光还原的Hill反应。而失去完整被膜的叶绿体,铁氰化钾可以进入类囊体进行Hill反应。根据这一原理,比较胀破与未胀破的叶绿体Hill反应速率,就可计算叶绿体被膜的完整度。二、仪器与用具氧电极测氧全套装置;烧杯;微量进样器;

叶绿体被膜完整性的测定

一、原理由于玻璃氰化钾不能透过被膜,故完整叶绿体在等渗介质中不能进行玻璃氰化钾光还原的Hill反应。而失去完整被膜的叶绿体,铁氰化钾可以进入类囊体进行Hill反应。根据这一原理,比较胀破与未胀破的叶绿体Hill反应速率,就可计算叶绿体被膜的完整度。二、仪器与用具氧电极测氧全套装置;烧杯;微量进样器;

叶绿体被膜完整度的测定

【原理】由于铁氰化钾不能透过被膜,故完整叶绿体在等渗介质中不能进行铁氰化钾光还原的Hill反应。而失去完整被膜的叶绿体,铁氰化钾可以进入类囊体进行Hill反应。根据这一原理,比较胀破与未胀破的叶绿体Hill反应速率,就可计算叶绿体被膜的完整度。【仪器与用具】氧电极测氧全套装置(见实验20);烧杯;微

强!中国学者用最短时间突破100篇CNS生命科学领域成果

  截止2020月7月27日,中国学者在Cell,Nature 及Science 发表了共计102项生命科学的研究成果,其中新冠肺炎领域占了近一半(共43篇)。iNature系统总结了这些研究成果:   按杂志来划分:Cell 发表了30篇,Nature 发表了45篇,

叶绿体色素的分离纸层析法实验

叶绿体色素中的各种色素化学结构不同,因而它们的物理化学性质如极性、吸收光谱、溶解度等也不同。叶绿素和类胡萝卜素是酯类化合物,不溶于水仅溶于已烷、石油醚等非极性溶剂中,可利用不同色素在各种有机溶剂中的分配系数以及在吸附剂上被吸附程度的不同而将叶绿体色素分离开。实验方法原理叶绿体色素中的各种色素化学结构

从豌豆组织分离叶绿体实验_叶绿体分离

实验材料叶子组织试剂、试剂盒PBF-Percoll 溶液山梨醇BSAHEPES-KOHEDTA仪器、耗材聚碳酸酯离心管实验步骤1. 制备 Percoll 梯度(1) 两个 50 ml 的聚碳酸酯离心管中分别加入 25 ml 50% 的 PBF-Percoll 溶液。50% PBF-Percoll0.

昆明植物所完成六种木本竹子叶绿体基因组全序列的测定

  竹亚科(Bambusoideae)隶属于禾本科(Poaceae),全世界共分布有一千余种。木本竹子因种类数目多,形态性状复杂多变及多年生一次性开花等原因而成为系统发育学研究难点。随着新一代测序技术的兴起,系统发育基因组学为解决这类困难类群的系统发育关系带来了曙光。  中国科学院昆明植物研究所李德

蛋白质组学在植物科学研究中的应用

1 植物群体遗传蛋白质组学 1.l 遗传多样性蛋白质研究基于基因组学的一些遗传标记,如RAPD(Random Amplified Polymorphic DNA)、RFLP(Restriction Fragment Length Polymorphism)、SSR(Simple Sequen

拟南芥叶绿体蛋白质组学分析实验

试剂、试剂盒HEPES-KOH                                       &

叶绿体的分离与荧光观察_等渗法

实验方法原理组织匀浆后悬浮在等渗介质中进行差速离心,是分离细胞器的常用方法。一个颗粒在离心场中的沉降速率取决于颗粒的大小、形状、密度、离心力及介质黏度等。同一离心场中,同一时间内,密度和大小不同的颗粒沉降速率不同。依次增加离心力和离心时间,就能使非均一的悬浮液中的颗粒按其大小、密度先后分批沉降在离心

叶绿体被膜完整性的测定

叶绿体被膜完整性的测定可用于:(1)促进光合作用的分子机理研究;(2)检测细胞活性。实验方法原理由于玻璃氰化钾不能透过被膜,故完整叶绿体在等渗介质中不能进行玻璃氰化钾光还原的Hill反应。而失去完整被膜的叶绿体,铁氰化钾可以进入类囊体进行Hill反应。根据这一原理,比较胀破与未胀破的叶绿体Hill反

细菌细胞的制备实验实验_将核糖体解离为大亚基/小亚基

实验材料核糖体试剂、试剂盒解离缓冲液贮存缓冲液实验步骤1. 通过将核糖体样品对解离缓冲液透析并用 7%~30% 的线性蔗糖梯度离心来将真细菌 70S 核糖体分离为 30S 和 50S 亚基。解离缓冲液:10 mmol/L Tris-HCl,pH 7.51 mmol/L MgOAc100 mmol/L

离心机相关的分离知识汇总

*章离心机及转子的分类:一.离心机的分类:国际上对离心机的分类方法有三种:按用途分、按转速分和按结构分。按用途分类:分为制备型离心机和制备分析离心机。制备型离心机:仅供分离浓缩,提纯试样的离心机。制备分析离心机:不但能分离浓缩、提纯试样,而且可以通过光学系统对试样的沉降过程进行观察、拍照、测量、数字

离心机及其转子的分类

一.离心机的分类:  国际上对离心机的分类方法有三种:按用途分、按转速分和按结构分。  按用途分类:分为制备型离心机和制备分析离心机。制备型离心机:仅供分离浓缩,提纯试样的离心机。制备分析离心机:不但能分离浓缩、提纯试样,而且可以通过光学系统对试样的沉降过程进行观察、拍照、测量、

离心机及转子的分类

  一.离心机的分类:   国际上对离心机的分类方法有三种:按用途分、按转速分和按结构分。   按用途分类:分为制备型离心机和制备分析离心机。   制备型离心机:仅供分离浓缩,提纯试样的离心机。   制备分析离心机:不但能分离浓缩、提纯试样,而且可以通过光学系统对试样的沉降

叶绿体色素的提取与分离

一、原理叶绿体中含有绿色素(包括叶绿素a和叶绿素b)和黄色素(包括胡萝卜素和叶黄素)两大类。它们与类囊体膜蛋白相结合成为色素蛋白复合体。它们的化学结构不同,所以它们的物化性质(如极性、吸收光谱)和在光合作用中的地位和作用也不一样。这两类色素是酯类化合物,都不溶于水,而溶于有机溶剂,故可用乙醇、丙醇等