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哺乳动物细胞基因突变试验

哺乳动物体外培养细胞的基因正向突变试验常用的测试系统有小鼠淋巴瘤L5178Y细胞,中国仓鼠肺V79细胞和卵巢CHO细胞的三个基因位点的突变,即次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、胸苷激酶(TK)及Na+/K+ATP酶(OUA)位点。HGRPT和Na+/K+ATP酶位点突变可用于上述三种细胞,OUA位点突变仅适用于CHO细胞,HGRPT和TK可分别使6-硫代鸟嘌呤(6-TG)转移上磷酸核糖及使5-溴脱氧尿苷磷酰化,它们的代谢产物可掺入DNA引起细胞死亡,因此正常细胞在含有这些硷基类似物的培养基中不能生长,在致突变物作用下此两个位点发生突变的细胞对这些硷基类似物具有抗药性,可以增殖成为克隆(细胞集落)。Na+/K+ATP酶是细胞膜上的Na+/K泵,鸟本苷可抑制此酶活性引起细胞死亡,当致突变物引起该位点突变后,Na+/K+ATP酶对鸟本苷的亲和力下降,而酶活性不变,故对培养基中的鸟本苷产生抗药性,并可增殖为克隆。......阅读全文

哺乳动物细胞基因突变试验

  哺乳动物体外培养细胞的基因正向突变试验常用的测试系统有小鼠淋巴瘤L5178Y细胞,中国仓鼠肺V79细胞和卵巢CHO细胞的三个基因位点的突变,即次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、胸苷激酶(TK)及Na+/K+ATP酶(OUA)位点。HGRPT和Na+/K+ATP酶位点突变可用于上述三种细胞,O

体外哺乳动物细胞染色体畸变试验方法!

在加入或不加入代谢活化系统的条件下,使培养的哺乳动物细胞暴露于受试样品中。用中期分裂象阻断剂(如秋水仙素)处理,使细胞停止在中期分裂象,随后收获细胞、制片、染色、分析染色体畸变。通过检测受试样品诱发体外培养的哺乳动物细胞染色体畸变的能力,从而评价受试样品的致突变性及其强度。 一、材料⒈受试样品固体受

体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变试验

- 中华仓鼠肺细胞染色体突变实验药物毒理体外经典实验。国家都有标准了就可以想象重要性了。自己做了一个PDF文件,方便大家收藏。中华人民共和国国家标准GB 15193.12一91体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变试验V79/HGPRT gene mutation test----------

哺乳动物细胞总RNA快速分离

            试剂、试剂盒 尤钙镁离子磷酸缓冲盐溶液 EDTA SDS 乙酸钠 水平衡的苯酚  乙醇 Tris-Cl

哺乳动物细胞总RNA的分离

实验概要 本实验介绍了从培养的单层哺乳动物细胞中分离RNA的实验程序,该程序同样适用于从悬浮培养的哺乳动物细胞中或从易于分散成单个细胞的哺乳动物组织中分离RNA。但不适用于从固体组织中提取RNA,因为用这种裂解细胞的方法(在SDS存在的条件下用蛋白酶K消化)去消化组织速度很慢,导致内源性RNA酶

哺乳动物细胞总RNA快速分离

试剂、试剂盒 尤钙镁离子磷酸缓冲盐溶液 EDTASDS 乙酸钠水平衡的苯酚 乙醇 Tris-Cl NaCL 实验步骤 一 材料与设备 1)尤钙镁离子磷酸缓冲盐溶液 (PBS)      2)10 mmol/L  EDTA (pH8.0 )      3)0.5% SDS  

哺乳动物细胞总RNA的分离

哺乳动物细胞总RNA的分离细胞的裂解提取步骤注意事项  这一从培养的单层哺乳动物细胞中分离RNA的实验程序系为Favaloro 等(1980)所介绍程序的改良。该程序同样适用于从悬浮培养的哺乳动物细胞中或从易于分散成单个细胞的哺乳动物组织中分离RNA。但不适用于从固体组织中提取RNA,因为用这种裂解

培养两栖动物细胞与哺乳动物细胞区别

1.培养两栖动物细胞与哺乳动物细胞区别在培养液上,也就是血浆的不同,其它的一样;2.培养两栖动物体细胞比哺乳动物细胞难养,原因在于两栖动物个体都较小,血浆制备较难;3.原代培养的话,两栖动物细胞用两栖动物的血浆,哺乳动物细胞用哺乳动物的血浆,(同物种个体上取下的血浆,最好自体上取下的)和其它营养物质

体外哺乳类细胞基因突变(HGPRT)试验原理及注意事项

体外哺乳动物细胞基因突变试验是利用培养的哺乳动物细胞作指示生物的体外遗传毒理学试验,可用于检测有化学物质诱导的基因突变,适用的细胞系包括小鼠淋巴瘤细胞(L5178Y),中国仓鼠肺细胞(V79),中国仓鼠卵巢细胞(CHO),人类淋巴母细胞(TK6)等。这些细胞系,常用的遗传学终点是检测胸苷激酶(TK)

哺乳动物细胞“变身”生物计算机

  《科学》杂志28日报道,波士顿大学合成生物学家威尔森·黄带领的团队提出一种方法,用基因工程方法编辑哺乳动物细胞DNA,从而进行复杂的计算,使这类细胞变成生物计算机。他们希望新的编程技术有助于癌症治疗、按需生长可以替换受损身体部位的组织等。   科学家尝试将细胞编辑工程从细菌扩展到哺乳动物细胞