免疫组化常见问题的处理

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。 对照/标本无染色 ①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。 ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。 ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,这一点是非常重要的。比如,如果一抗是兔来源的抗体,二抗一定要用抗兔的二抗来匹配;或一抗是小鼠的IgM一抗,二抗必须是山羊/兔抗小鼠的IgM(不是IgG)二抗。 ④检查抗体所使用的稀释度及稀释溶液。 ⑤检查抗体的有效期和保存条件,尤其是标记了酶或荧光素的抗体,现在大多数试剂公司的抗体均要求在4~8℃条件下保存,应避免反复冻融,试剂保存时一定要避免与挥发性有机溶剂同放一室,以免降低抗体的效价。 ⑥检查标本的储存条件,最好用已知阳性的标本来同时做阳性对照。 ⑦检查色原/底物溶液,......阅读全文

免疫组化常见问题的处理

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色①      确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。②      确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③      对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体

免疫组化常见问题的处理

   当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。   对照/标本无染色   ①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。   ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。   ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗

免疫组化常见问题的处理

  当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。  对照/标本无染色  ①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。  ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。  ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测

免疫组化常见问题的处理

 当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色    ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。    ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。    ③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以

免疫组化常见问题的处理

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,

免疫组化常见问题分析

1,石蜡切片在染色过程中出现脱片现象1)烤片时间不够,或温度不够,可以延长烤片时间和提高烤片温度;2)用含有多聚赖氨酸的玻片,可以购买到或这自己做;3)有些组织本身就容易掉片,如骨组织等,操作时冲PBS不要直接冲到组织上,冲到组织上方,让它流下冲洗组织;4)用高温修复时,温度骤冷也可能引起。2,边缘

免疫组化常见问题及对策

  免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理,检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛,成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题,大体归纳起来,主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。

免疫组化常见问题及对策

免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理,检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛,成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题,大体归纳起来,主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。现在

IHC免疫组化常见问题分析

  分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施:   常见问题一:所有切片呈阴性   原因分析:a.缓冲液内含叠氮化钠,抑制酶的活性;   b.染色未完全按照操作步骤进行;   c.漏加一种抗体或抗体失活;   d.复染或脱水剂使用不当;   e.底物中加入的过氧化氢少或失活。  

免疫组化技术要点与常见问题

在免疫组化过程中,为了更好的说明问题和查找原因,最好设置阳性对照片(已知的高表达相应抗原的组织)和阴性对照组织片(不加一抗但是加二抗系统/不加任何 抗体两组),所有操作过程应完全一致。 染色弱或者没有染色(按照先后顺序,先排除一些简单的原因):

免疫组化的经验总结(1)-常见问题

免疫组织化学的概念: 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。免疫组化实验所用的组织和细胞

免疫组化常见问题及其解决办法

1、 一抗从4度拿出后,为什么要进行37度复温?(1)一方面,防止切片从4度直接放入PBS易脱片;(2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。(3)

免疫组化常见问题及解决方法

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗

免疫组化实验防脱片的处理方法

脱片是免疫组织化学中经常遇到的问题(尤其是脑组织冰冻切片),一般来说脱片主要有以下几种原因:1. 组织固定、脱水、透明不充分2.组织切片过厚3.组织切片有折叠4.过度的热抗原修复(高压、微波、水煮)处理或抗原修复液的pH偏高5.操作过程中,冲洗方法不正确等在实际操作的过程中,除了要注意以上几点之外,

原子吸收常见问题处理

1、影响火焰原子吸收光谱仪灵敏度的因素有?  A、灯电流  火焰原子吸收光谱仪使用光源大都是空心阴极灯,空心阴极灯的灯电流大小决定着灯辐射强度。在一定范围内增大灯电流可以增大辐射强度,同时噪音也增大,但是仪器灵敏度降低。如果灯电流过大,会导致灯本身发生自蚀现象而缩短灯使用寿命;会放电不正常。相反,在

原子吸收常见问题处理

A、最好每次都做标准曲线,如果单次样品量比较多的话,在测试过程中还要加入标准点进行校正。B、如果每天有很多样品要测试,你就用QC来控制了,如果你控制的QC能过,那你也可以不用做标准曲线了。

涂层测厚仪常见问题处理

1.仪器开机没反应怎么办?答:首先检查一下电池是否装反;或考虑电池是否没电,如排除电池问题后仍然无法开机,即需要与厂家。 2.正常开机,但测试没反应?答:首先排除是否校了空零位,重新校零即可正常操作(操作见第九章)。 3.为什么在随机附带的校准试片上校准后,测量工件还是出现测值“不准”?答:影响测值

原子吸收常见问题处理

  原子吸收常见问题处理  1、为啥原子吸收仪器的灵敏度会突然下降了一半?  通常原子吸收分光光度计灵敏度下降的原因有:  A、元素灯能量下降,低于原始能量得2/3;  B、雾化器故障,雾化效果不好;  C、燃烧头污染;  D、检测器故障,多半是老化(但这种现象很少);  E、样品吸收管路堵塞(这种

原子吸收常见问题处理

原子吸收常见问题处理   1、为啥原子吸收仪器的灵敏度会突然下降了一半?   通常原子吸收分光光度计灵敏度下降的原因有:   A、元素灯能量下降,低于原始能量得2/3;   B、雾化器故障,雾化效果不好;   C、燃烧头污染;   D、检测器故障,

原子吸收常见问题处理

原子吸收常见问题处理  1、为啥原子吸收仪器的灵敏度会突然下降了一半?  通常原子吸收分光光度计灵敏度下降的原因有:  A、元素灯能量下降,低于原始能量得2/3;  B、雾化器故障,雾化效果不好;  C、燃烧头污染;  D、检测器故障,多半是老化(但这种现象很少);  E、样品吸收管路堵塞(这种现象

原子吸收常见问题处理

1、校正曲线为何会发生弯曲呢?原子吸收常见问题处理  光吸收的最简式A=KC,只适用于理想状态均匀稀薄的蒸汽原子,随着吸收层中原子浓度的增加,上述简化关系就不应用了。  在高浓度下,分子不成比例地分解;相对于稳定的原子温度,较高浓度下给出的自由原子比率较低。  (1)由于有不被吸收的辐射、杂散光的存

原子吸收常见问题处理

1、为啥原子吸收仪器的灵敏度会突然下降了一半?  通常原子吸收分光光度计灵敏度下降的原因有:  A、元素灯能量下降,低于原始能量得2/3;  B、雾化器故障,雾化效果不好;  C、燃烧头污染;  D、检测器故障,多半是老化(但这种现象很少);  E、样品吸收管路堵塞(这种现象经常导致灵敏度下降); 

真空采血管常见问题的处理

    推荐真空采血管由于其操作简便、干净安全、准确可靠,正为各医院普遍应用。但在临床使用过程中,时有各种问题发生,影响了标本的顺利采集。    1 溶 血     1.1 原因:真空管的负压相对较大,采血初始,血液流入管底速度快,红细胞相互撞击可致破裂,临床偶见溶血。    1.2 措施:采集血标

血清使用中常见问题的处理

1.保存血清最好的办法?我们建议血清应保存在-5℃至-20℃。若你一次无法用完一瓶,建议您无菌分装血清至恰当的灭菌容器内,再放回冷冻。2.如何解冻血清才不会使产品质量受损?我们建议您将血清从冷冻箱中取出后,先置于2-8℃冰箱中使之溶解,然后在室温下使之全溶。但必须注意的是,溶解过程中必须规则地摇晃均

螺杆泵的常见问题处理

  1.泵体剧烈振动或产生噪音:  产生原因:水泵安装不牢或水泵安装过高;电机滚珠轴承损坏;水泵主轴弯曲或与电机主轴不同心、不平行等。  处理方法:装稳水泵或降低水泵的安装高度;更换电机滚珠轴承;矫正弯曲的水泵主轴或调整好水泵与电机的相对位置。  2.传动轴或电机轴承过热:  产生原因:缺少润滑油或

恒温摇床常见问题处理方案

恒温摇床长时间运行的注意事项1. 仪器在使用中出现异常声音时,检查仪器是否不平,或是转轴故障。2. 实验出现摇瓶破损时,及时进行清理,避免发酵液体腐蚀摇床。3. 摇瓶放置应以摇床中心对称放置,勿随意放置。4. 照时装置在设备设置完之后,需要关闭。5. 设备处于工作状态时严禁把手或物体伸入容室壁内,以

恒温摇床常见问题处理方案

恒温摇床长时间运行的注意事项1. 仪器在使用中出现异常声音时,检查仪器是否不平,或是转轴故障。2. 实验出现摇瓶破损时,及时进行清理,避免发酵液体腐蚀摇床。3. 摇瓶放置应以摇床中心对称放置,勿随意放置。4. 照时装置在设备设置完之后,需要关闭。5. 设备处于工作状态时严禁把手或物体伸入容室壁内,以

浅谈几点血球计数的常见问题处理

一、计数偏高,这里指的是总体的偏高,不是针对特例,一个或者几个项目在一段时间内或者一批标本里面总是偏高,那么,首先分析标本人群的特殊性。例如,白细胞增高是不是发烧感染人群,血红蛋白增高是不是高原人群等等,排除这些就需要从试剂和仪器还有抗凝剂几个方面进行考虑,抗凝剂不好会造成分类和血小板的增高,严重的

分享水浴恒温摇床常见问题处理

  水浴恒温摇床时一款恒温培养箱,是一种培养、制备生物样品的生化仪器,是植物、生物、微生物、遗传病毒、医学、环保等科研、教育和生产部门作精密培养制备不可缺少的实验室设备。水浴摇床在使用过程中也会碰到一些常见的问题,下面上海岛韩来解答一下常见问题:        1、水循环以前使用都很正常,可现在发现

球磨机常见问题及处理方法参考

 球磨机的轴承位和轴承室,在重载低速、重载高速的高扭矩启动下以及在设备振动、径向冲击的作用下,轴承室或轴承位发生金属疲劳,产生*变型。  球磨机减速机/轴承室若出现磨损,该类问题传统方法难以现场修复解决,外协修复受部件材质和磨损尺寸的限制难以修复,通常采取更换新部件解决。  减速机不断在改进,配件更