免疫组化常见问题分析

1,石蜡切片在染色过程中出现脱片现象1)烤片时间不够,或温度不够,可以延长烤片时间和提高烤片温度;2)用含有多聚赖氨酸的玻片,可以购买到或这自己做;3)有些组织本身就容易掉片,如骨组织等,操作时冲PBS不要直接冲到组织上,冲到组织上方,让它流下冲洗组织;4)用高温修复时,温度骤冷也可能引起。2,边缘效应1)组织边缘与玻片粘贴不牢,边缘组织松脱漂浮在液体中,每次清洗不易将组织下面试剂洗尽所致. 解决办法:制备优质的胶片(APES或多聚赖氨酸),切出尽量薄的组织切片,不厚于4微米,组织的前期处理应规范,尽量避免选用坏死较多的组织;2)切片上滴加的试剂未充分覆盖组织,边缘的试剂容易首先变干,浓度较中心组织高而致染色深。解决办法:试剂要充分覆盖组织,应超出组织边缘2mm。用组化笔画圈时,为了避免油剂的影响,画圈应距组织边缘3-4mm。3,产生组织切片非特异性染色1)抗体孵育时间过长、抗体浓度高易增加背景着色。这可通过缩短一抗/二抗孵育时......阅读全文

免疫组化常见问题分析

1,石蜡切片在染色过程中出现脱片现象1)烤片时间不够,或温度不够,可以延长烤片时间和提高烤片温度;2)用含有多聚赖氨酸的玻片,可以购买到或这自己做;3)有些组织本身就容易掉片,如骨组织等,操作时冲PBS不要直接冲到组织上,冲到组织上方,让它流下冲洗组织;4)用高温修复时,温度骤冷也可能引起。2,边缘

IHC免疫组化常见问题分析

  分析一下免疫组化实验中一些常见的问题和解决措施:   常见问题一:所有切片呈阴性   原因分析:a.缓冲液内含叠氮化钠,抑制酶的活性;   b.染色未完全按照操作步骤进行;   c.漏加一种抗体或抗体失活;   d.复染或脱水剂使用不当;   e.底物中加入的过氧化氢少或失活。  

免疫组化常见问题的处理

   当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。   对照/标本无染色   ①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。   ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。   ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗

免疫组化常见问题的处理

  当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。  对照/标本无染色  ①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。  ②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。  ③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测

免疫组化常见问题的处理

 当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色    ① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。    ② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。    ③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以

免疫组化常见问题及对策

  免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理,检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛,成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题,大体归纳起来,主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。

免疫组化常见问题的处理

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色①确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。②确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗匹配,

免疫组化常见问题的处理

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色①      确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。②      确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③      对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体

免疫组化常见问题及对策

免疫组织化学是应用抗原和抗体结合的原理,检测细胞内多肽、蛋白质等大分子物质的分布。这种方法的特异性强、敏感度高、发展迅速、应用广泛,成为生物学和医学众多学科的重要研究手段。做免疫组化可能遇到许多问题,大体归纳起来,主要有非特异性着色﹑着色部位不对﹑假阳性﹑无阳性﹑阳性弱五大类以及其他一些小问题。现在

免疫组化技术要点与常见问题

在免疫组化过程中,为了更好的说明问题和查找原因,最好设置阳性对照片(已知的高表达相应抗原的组织)和阴性对照组织片(不加一抗但是加二抗系统/不加任何 抗体两组),所有操作过程应完全一致。 染色弱或者没有染色(按照先后顺序,先排除一些简单的原因):

免疫组化常见问题及其解决办法

1、 一抗从4度拿出后,为什么要进行37度复温?(1)一方面,防止切片从4度直接放入PBS易脱片;(2)另一方面,使抗原抗体结合更稳定。一般不需要,但对表达较弱的抗原可能有用,4度和37度时分子运动方式不同,前者分子碰撞机率和运动速度小于后者,后者结合更快,但敏感性也提高了并易造成非特异染色。(3)

免疫组化常见问题及解决方法

当免疫组化染色没有出现预期结果时,应系统地查找原因,而每一次只能排除一种可能的原因。对照/标本无染色① 确认是否忽略了应该加的某种试剂,包括一抗、二抗、三抗及底物等。② 确认所有的试剂是否按正确的顺序加入,是否孵育了足够的时间。③ 对照抗体的标签确认是否使用了正确的抗体,以及所用的检测系统是否和一抗

免疫组化的经验总结(1)-常见问题

免疫组织化学的概念: 免疫组化是利用抗原与抗体特异性结合的原理,通过化学反应使标记抗体的显色剂 (荧光素、酶、金属离子、同位素) 显色来确定组织细胞内抗原(多肽和蛋白质),对其进行定位、定性及定量的研究,称为免疫组织化学。免疫组化实验中常用的抗体为单克隆抗体和多克隆抗体。免疫组化实验所用的组织和细胞

免疫组化的判定分析

  从实验结果而言,免疫组化技术服务主要涉及抗体实验结果的描述与分析,图片的确定与选取,相关数据的提供,上述工作是免疫组化工作的重点内容,只有严格的实验设计,标准的实验操作,专业化的结果分析才能更好的满足客户的要求,这点对于形式为腹水,上清,培养液之类的抗体显得更为重要。关于上述服务内容应该在实验开

免疫组化结果如何分析?

(1)阳性着色细胞计数法。在40*光镜下,随机选择不重叠的10个视野,人工或机器计数阳性着色细胞,每组3~6张不同动物组织切片,然后进行组间比较即可。 (2)灰密度分析法。通过在不同组别和不同动物组织切片上选择相同区域、相同条件下用image j进行灰密度分析,然后进行统计分析即可。

水质分析常见问题

15、测总磷,洗衣液稀释100倍,加热后水样变黄色,对测量结果有没有影响?答:消解后如果水样没有颜色,则不干扰实验结果。水中有颜色的物质会在消解时被消解成无色的,不影响测量结果。16、连华5B-3F水质测定仪如何恢复出厂设置?答:仪器在关闭的状态,一手按住“校正”键,一手打开开关,待屏幕上显示“99

水质分析常见问题

08、请问BOD营养盐有黄色不溶物正常吗?答:正常,营养盐配好是淡黄色不完全溶解的溶液,用前需摇匀。09、请问N2试剂前一天配出来没什么问题,为什么放一天后变棕黄色变浑?答:N2试剂配好后应转移到聚乙烯瓶中密封、避光、低温储存。如果放到矿泉水瓶内,时间稍长会出现变质。如果未密封保存,空气中的有机气体

水质分析常见问题

11、请问定量器为什么吸不起来?答:定量器内有两个玻璃柱,吸液时弯头附近玻璃柱会将底部封死,溶液会吸上来;排液时下面玻璃柱会将底部封死让溶液从弯头排出。两个玻璃柱相当于两个单向阀。新定量器使用时吸不上来就是弯头附近玻璃柱底部没完全密封,可用手指轻弹几下或用洗耳球将溶液吸到弯头玻璃柱处就可以了。12、

水质分析常见问题

26、配总磷过硫酸钾,由于不好溶,加塞子水浴加热到了10秒左右,塞子不是很紧,过硫酸钾还能使用吗?答:如果进水不建议使用,可以做标准溶液试一试。过硫酸钾不好溶可以多搅拌或超声,不建议加热,控制不好温度过高后会导致过硫酸钾失效。另过硫酸钾最佳保存温度25-30℃,冷藏容易结晶。27、用3B做甲醛之前做

水质分析常见问题

19、含氯酸钠废水COD如何检测?答:含氯酸钠废水的COD检测水样的原水COD很高,用户使用了氯酸钠来处理,氯酸钠具有氧化性,能降低COD,但这种废水,使用正常方法无法检测,经过查找资料及连华技术人员的建议,我们进行了方法测试,找到解决方案。1)取2.5ml水样,加入4.8ml的E试剂,注意速度不要

水质分析常见问题

05、做总磷实验时,过硫酸钾结晶了,影响检测结果吗,该怎么解决?答:过硫酸钾配制时较难溶解,使用超声波帮助其溶解。如果没有超声波,尤其是冬季室温较低,可以加热使其溶解(温度不能超过60℃,否则过硫酸钾会分解),放冷后会有析出,因为溶液为过饱和,再加热溶解是可以使用的,不影响总磷的测定。06、请问在做

水质分析常见问题

13、请问做氨氮实验时,为什么加入N3试剂出现大量白色浑浊,加入N2试剂后下层红色上层青色不断有小气泡上升?答:钙镁离子高,应做絮凝沉淀预处理。水样带色或浑浊以及含其他一些干扰物质,影响氨氮的测定。因此,在分析时需做适当的处理。对较清洁的水,可采用絮凝沉淀发;对污染严重的水或工业废水,则用蒸馏法消除

水质分析常见问题

24、测定cod用密封管消解行不行?答:可以的,但是建议使用敞口管消解。密封消解时如果密封盖没有拧紧,在颠倒摇匀的时候,可能会让溶液洒出,导致测值结果不准,甚至可能会造成人身伤害;部分水样在消解时会释放大量的气体,此种水样不可密封消解,如水里的次氯酸根太高,消解时会释放出大量氯气,密封消解会导致消解

水质分析常见问题

水质分析常见问题水质分析又称水化学分析。即用化学和物理方法测定水中各种化学成分的含量。水质分析过程中常见的问题有哪些呢?01、BOD缓冲剂液化了还能用吗?答:BOD缓冲剂时间稍长后会出现液化的现象,这是正常情况,不影响使用。02、我们测氨氮,是以氮元素计还是以铵根离子计?答:氨氮是指水中以游离氨和铵

芯片常见问题分析

1 芯片实验和定量PCR的优劣比较?   基因表达谱芯片实验可以对大量基因一次性进行定量研究,定量PCR则对大量基因需逐一进行定量研究。 2 在芯片制作过程中的PCR原液是否可以为客户保存?   可以抽干冷冻保存一年。 3 可否用DNA和芯片杂交?   不可以,因为芯片上的样品是cDNA而真核基因D

水质分析常见问题

24、测定cod用密封管消解行不行?答:可以的,但是建议使用敞口管消解。密封消解时如果密封盖没有拧紧,在颠倒摇匀的时候,可能会让溶液洒出,导致测值结果不准,甚至可能会造成人身伤害;部分水样在消解时会释放大量的气体,此种水样不可密封消解,如水里的次氯酸根太高,消解时会释放出大量氯气,密封消解会导致消解

水质分析常见问题

21、BOD缓冲剂液化还能用吗?答:BOD缓冲剂时间稍长后会出现液化的现象,这是正常情况,不影响使用。22、仪器测总氮时空白和标液正常,测水样显示(9999)什么原因?答:仪器测标样没问题,仪器一般不会有问题,可能是水样浓度太高需要稀释,总氮直测范围0.05-10mg/L,275nm波长下的吸光度尽

eds分析常见问题

  Q1:能谱的缩写是EDS还是EDX?  开始的时候能谱的缩写有很多,比如EDS,EDX,EDAX等。ED就是Energy Dispersive,后面因为X-ray Analysis和Spectrum这几个词的不同用法,导致了缩写的不同。而且相应的汉译也有很多,比如能量色散谱,能量散射谱等等。不过

免疫组化的判定分析的介绍

  从实验结果而言,免疫组化技术服务主要涉及抗体实验结果的描述与分析,图片的确定与选取,相关数据的提供,上述工作是免疫组化工作的重点内容,只有严格的实验设计,标准的实验操作,专业化的结果分析才能更好的满足客户的要求,这点对于形式为腹水,上清,培养液之类的抗体显得更为重要。关于上述服务内容应该在实验开

免疫组化实验结果的分析和判断

⒈ 必须同时设对照染色。没有对照染色的免疫组化染色结果是不可信的。⒉抗原表达必须在特定部位。如LCA应定位在细胞膜上;CK应定位在细胞浆内;PCNA及p53蛋白应定位在细胞核内;EMA应定位在细胞膜上,等等。不在抗原所在部位的阳性着色,一概不能视为阳性。