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细胞凋亡实验

细胞凋亡(Apoptosis) 又称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death,PCD)是指细胞基因调控的一种自主性的自杀现象。即是在一定的生理或病理条件下,遵循自身的程序,自主结束生命的死亡方式。凋亡一词最早是由年澳大利亚组织病理学家John Kerr通过研究大鼠肝左叶细胞死亡时,于1972首先提出的。凋亡与坏死的形态特征不同,拿凋亡研究比较清楚的动物细胞来讲,坏死细胞首先表现为胞膜通透性增加,细胞外形发生不规变化;内质网扩张;核染色质不规则位移;线粒体及胞核肿胀;溶酶体破坏;胞膜破裂胞浆外溢;最后被巨噬细胞吞噬。细胞坏死常引起周围炎症反应。而凋亡细胞形态变化为:细胞变圆,与邻周细胞脱离;胞膜表面微绒毛减少或者消失;核质固缩(Condensation),边移(Margination);胞浆坚实(Compactness);细胞器集中(Squeeze);胞膜芽生(Bud);凋亡小体 (Apoptotic-b......阅读全文

热休克蛋白HSP对细胞凋亡的调节作用

细胞凋亡是生物发育过程中或在正常生理状态下清除衰老及受损细胞的一种普遍现象。细胞凋亡的发生受胞外或胞内的多种刺激源所诱导,其中热休克蛋白(热激蛋白)是细胞凋亡的调控因子之一。细胞是通过调节自身的防御系统来适应环境胁迫,并且根据胁迫程度的强弱,利用自身遗传机制或调控自身状态抵抗胁迫,或

热休克蛋白HSP对细胞凋亡的调节作用

  细胞凋亡是生物发育过程中或在正常生理状态下清除衰老及受损细胞的一种普遍现象。细胞凋亡的发生受胞外或胞内的多种刺激源所诱导,其中热休克蛋白(热激蛋白)是细胞凋亡的调控因子之一。细胞是通过调节自身的防御系统来适应环境胁迫,并且根据胁迫程度的强弱,利用自身遗传机制或调控自身状态抵抗胁迫,或主动诱发细胞

六种染色后光镜观察法检测肝癌细胞凋亡

作者:杨连君,司晓辉,王文亮,王文勇,赵一岭,方正清[摘  要] 目的:探讨简便易行的在光镜下通过形态学观察检测细胞凋亡的方法,并对其进行比较。方法:首先用6%的乙醇作用6 h诱导人肝细胞癌细胞系HCC9204细胞凋亡,然后进行未固定细胞的台盼蓝染色、吖啶橙/溴化乙啶(AO/EB)双染色,

细胞凋亡及其检测技术-1

细胞凋亡又称程序性细胞死亡(PCD),是细胞衰老自然死亡的主要方式之一,在机体中承担着重要的调控作用。它不仅在维持细胞群体数量的稳定、胚胎发育和免疫系统的克隆选择方面,而且在肿瘤发生、发展、抗肿瘤药物的治疗等方面具有十分重要的作用。细胞凋亡是由基因编程控制的细胞主动参与的自杀过程没事一种生理性调节机

检测细胞凋亡的实验方法比较-2

二、细胞凋亡的细胞化学测定细胞凋亡的细胞化学测定包括细胞表面(细胞膜)的结构和通透性改变的测定和细胞核DNA改变的测定。根据应用的范围,又可分为细胞群休和单个细胞测定两种,以下仅介绍其中几种较为常用的方法。碘化丙啶(propidium iodide,PI)检测早期死亡细胞膜通透性状态的不同是区分细胞

热休克蛋白HSP对细胞凋亡的调节作用(二)

C.起源于细胞核的凋亡信号及HSP的调控 细胞核内DNA的断裂是细胞凋亡的一种生化特征,是由于特异的核酸内切酶活化后将染色质切割成较短的DNA片段。但是,DNA的损伤也可能是一个细胞凋亡级联反应的早期信号转导事件,经研究认为:当DNA发生断裂后,组蛋白H1.2转运至细胞质,通过激活Bcl-2蛋白-B

热休克蛋白HSP对细胞凋亡的调节作用(一)

细胞凋亡是生物发育过程中或在正常生理状态下清除衰老及受损细胞的一种普遍现象。细胞凋亡的发生受胞外或胞内的多种刺激源所诱导,其中热休克蛋白(热激蛋白)是细胞凋亡的调控因子之一。细胞是通过调节自身的防御系统来适应环境胁迫,并且根据胁迫程度的强弱,利用自身遗传机制或调控自身状态抵抗胁迫,或主动诱发细胞死亡

细胞凋亡实验操作细则

一、实验目的: 1、掌屋凋亡细胞的形态特征 2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理 细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界,在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事

流式细胞仪之细胞凋亡检测的PI双染色法

流式细胞仪是检测悬浮的单细胞或微粒的信号分析技术,被誉为实验室的“CT”,可用于细胞凋亡检测 、细胞分选、单细胞内细胞因子表达分析等。这里简单介绍下流式细胞仪检测细胞凋亡的两种方法。第一部分 流式细胞仪 检测细胞凋亡:Heochst 33342/PI双染色法一、基本原理

细胞凋亡检测(Annexin-V-FITC 单染法)-2

2 荧光显微镜和共聚焦激光扫描显微镜一般以细胞核染色质的形态学改变为指标来评判细胞凋亡的进展情况。常用的DNA 特异性染料有:HO 33342 (Hoechst 33342),HO 33258 (Hoechst 33258), DAPI。三种染料与 DNA 的结合是非嵌入式的,主要结合在DNA 的A

细胞凋亡实验步骤及注意事项

一、实验目的1、掌屋凋亡细胞的形态特征 2、学会用荧光探针对细胞进行双标记来检测正常活细胞、凋亡细胞和坏死细胞的方法二、实验原理 细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界,在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序

凋亡细胞核DNA片段检测方法进展(一)

摘  要:当今生物学领域的研究一个热点之一是细胞凋亡。开展对细胞凋亡的研究,首先要解决是方法学问题。作者从凋亡细胞的特征性核DNA片段检测着手,阐述了多种凋亡细胞核DNA片段检测方法以及近年来的一些新进展。细胞凋亡(apoptosis)又称细胞凋谢或称程序性细胞死亡(Programmed

双氧水诱导肿瘤细胞凋亡——双氧水诱导法

实验材料Hela细胞系试剂、试剂盒DMEM培养基生理盐水台盼蓝染色液DAPI染料青霉素链霉素Rnase A硫酸亚铁仪器、耗材普通光学显微镜荧光显微镜载玻片盖玻片细胞培养瓶电泳仪高速离心机超净工作台二氧化碳培养箱恒温水浴锅细胞记数器1. 实验目的通过实验了解细胞凋亡的一般过程和形态特征,了解诱导细胞凋

Bcl-2与细胞凋亡

摘要 Bcl-2基因是一原癌基因,能抑制细胞凋亡。但近年研究发现,存在有Bcl-2敏感和不敏感的细胞凋亡现象。Bcl-2抑制细胞调亡的机制目前仍然不清,大多认为与Bcl-2的细胞内抗氧化作用及抑制钙离子的跨膜运动有关。最近,Reed提出Bcl-2具有离子通道蛋白和吸附/锚定蛋白的双重特性,并阐述

高内涵成像技术在网络集成式细胞内特征的......(二)

               图3 单细胞耗氧率动态代谢检测及分析 一步染色法检测细胞对药物的敏感性 应用ImageXpress®

Bcl-2与细胞凋亡

摘要 Bcl-2基因是一原癌基因,能抑制细胞凋亡。但近年研究发现,存在有Bcl-2敏感和不敏感的细胞凋亡现象。Bcl-2抑制细胞调亡的机制目前仍然不清,大多认为与Bcl-2的细胞内抗氧化作用及抑制钙离子的跨膜运动有关。最近,Reed提出Bcl-2具有离子通道蛋白和吸附/锚定蛋白的双重特性,并阐述

Annexin V 与细胞凋亡的不解之缘

细胞凋亡(Apoptosis)或程序性细胞死亡(Programmed Cell Death)是指细胞为了清除自身不需要的和失去功能细胞的一种高级调控过程。凋亡可以发生在细胞生长、衰老、免疫反应或者当细胞受到疾病和毒害因素的破坏,例如放射性药物和化学化疗等的过程中。凋亡细胞会产生诸

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变zui具特征性,主要包括以下几个方面:1. 细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色体荧光染料对凋亡细胞DNA可染性

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

实验方法原理 其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变最具特征性,主要包括以下几个方面: 1.  细胞核的改变 由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色

细胞凋亡检测(Annexin-V-FITC 单染法)-1

一、实验原理细胞凋亡或称程序性细胞死亡(Programmed Cell Death ,PCD)是细胞的生命现象之一,它在机体的胚胎发育、组织修复及自身反应性T淋巴细胞的清除等方面起着十分重要的作用。细胞凋亡调节的失控可导致临床各种疾病的发生。如老年性痴呆与神经细胞凋亡过度有关,自身免疫性疾病和肿

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法             实验方法原理

流式细胞仪检测细胞凋亡实验

PI单染色法 Heochst 33342/PI双染色法 Annexin V/PI双染色法             实验方法原理

流式细胞仪检测细胞凋亡――Heochst 33342/PI双染色法

基本原理  经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

利用PI单染色法进行流式细胞仪检测细胞凋亡

一、基本原理流式细胞仪检测细胞凋亡:PI单染色法其原理主要是根据细胞凋亡时在细胞、亚细胞和分子水平上所发生的特征性改变。这些改变包括细胞核的改变、细胞器的改变、细胞膜成分的改变和细胞形态的改变等,其中细胞核的改变zui具特征性,主要包括以下几个方面:1、细胞核的改变由于凋亡细胞核的改变,造成各种染色

流式细胞仪检测细胞凋亡——Heochst 33342/PI双染色法

基本原理  经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

流式细胞仪检测细胞凋亡实验——Heochst 33342/PI双染色法

实验方法原理流式细胞仪通常根据细胞膜完整性将细胞分为“活细胞”和“死细胞”,因此正常细胞和凋亡细胞归为活细胞。活细胞染料如Hoechst 33342能少许进入正常细胞膜而对细胞没有太大得细胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中要高,Hoechst 33342在凋亡细

流式细胞仪检测细胞凋亡实验-Heochst 33342/PI双染色法

实验方法原理流式细胞仪通常根据细胞膜完整性将细胞分为“活细胞”和“死细胞”,因此正常细胞和凋亡细胞归为活细胞。活细胞染料如Hoechst 33342能少许进入正常细胞膜而对细胞没有太大得细胞毒作用。Hoechst 33342在凋亡细胞中的荧光强度要比正常细胞中要高,Hoechst 33342在凋亡细

流式细胞仪检测细胞凋亡——Heochst 33342/PI双染色

基本原理  经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

流式细胞仪检测细胞凋亡(双染色法)

一、基本原理经固定的凋亡细胞其染色体荧光染料的DNA可染性性下降。细胞一经固定就不再是活细胞,而且细胞固定过程对细胞膜的通透性也有影响。因此发展了用“细胞活性”鉴定染料染色的流式细胞仪检测方法。这些方法细胞不经固定就直接用DNA染料染色,且染料的浓度要比固定细胞所用的浓度要低得多。流式细胞仪通常根据

细胞凋亡形态学检测与观察

hoechst33258染色,他们认为细胞发生凋亡时,染色质会固缩。 所以Hoechst染色时,细胞核会呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染。正常细胞核刺激后有致密浓染的凋亡细胞  AO-EB染色法:The image below shows human lymphoma cells