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植物病毒RNA提取

大多植物病毒RNA为单链RNA,并且其极性与mRNA极性相同,植物病毒RNA提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。 一、材料 提纯TMV病毒液(10mg/ml)。 二、设备 冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,电泳仪,电泳槽。 三、试剂 TE-饱和酚:氯仿(1:1),氯仿,3M NaAc(pH5.2),乙醇(100%和70%),TE缓冲液,无RNA酶的双菌水。 四、操作步骤 1、取一eppendorf管加入提纯TMV(10mg/ml)400ml,再加入等体积酚/氯仿,盖紧管盖后用手充分振荡1分钟,4℃下12000g离心10分钟。 2、吸取水相于一新eppendorf管,再用酚/氯仿抽提,直至水相和有机相交界面无蛋白为止。 3、吸取水相于新eppendorf心管,加入等体积氯仿,用手倒置离心管数十秒,4℃下120......阅读全文

我国科学家建立植物负义链 RNA 病毒反向遗传学体系

  近日,美国《国家科学院院刊》在线发表了南京农业大学植物病毒学实验室教授陶小荣团队的最新研究成果。他们成功拯救出番茄斑萎病毒,在全球首次建立植物多分体负义链 RNA 病毒的反向遗传学体系,攻克了植物多分体负义链 RNA 病毒研究中的 “卡脖子” 难题。  论文通讯作者陶小荣介绍,负义链 RNA 病

分子生物学常用实验技术(page 2)

一、RNA 制备   模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人

mRNA提取、分离纯化

从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工等一系列问题。总之

分子实验方法4:RNA的提取和cDNA合成

第一节 概 述  从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工

先进科技 抢先体验

先进科技 抢先体验你还在为你的核酸提取发愁吗?你还在为你的科研经费发愁吗?东西越贵就一定越好吗?不!体验一下BioTeke给你带来的从核酸提取、PCR、RT-PCR到荧光定量的完美解决方案吧! ¤ 你知道如何保护样品的RNA不降解吗?已经有很多人在用了,如果你还不知道,赶快行动吧

RNA的提取和cDNA合成原理和实验方法

第一节 概 述   从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了

病毒RNA提取实验方法

实验概要本实验旨在掌握病毒RNA提取的实验方法,包括用异硫氰酸胍提取禽流感病毒RNA、TRIzol LS提取病毒RNA及Trizol法提禽流感病毒RNA。实验步骤1. 用异硫氰酸胍提取禽流感病毒RNA1) 取200ul样品数 阴性对照 阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管; 2) 加600u

RNA的提取和cDNA合成原理和实验方法(3)

第三节 植物病毒RNA 提取大多植物病毒RNA 为单链RNA ,并且其极性与mRNA 极性相同,植物病毒RNA 提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。一、材料提纯TMV病毒液(10mg/ml)。二、设备冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,电泳仪,电泳槽。三、试剂TE-饱和酚:氯仿(1:1),氯仿

2020年全球核酸提取仪市场情况及新品汇总

  分析测试百科网讯 2020年是不平凡的一年,新冠疫情的爆发导致全球活动受到阻碍。疫情不仅对人们的生活带来严重影响,同时也对分析检测行业带来了新的机遇。在全球新冠诊断标准中,核酸检测是公认的金标准,不仅检测速度快,准确率也能达到相关要求。  在核酸检测过程中,核酸提取作为其样品前处理过程,对最终分

病毒RNA提取实验

病毒RNA提取可以:(1)用于RNA病毒复制机制研究;(2)用于反向遗传学研究;(3)用于分子病毒学其他研究。实验方法原理大多植物病毒RNA 为单链RNA ,并且其极性与mRNA 极性相同,植物病毒RNA 提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。实验材料TMV病毒液试剂、试剂盒TE-饱和酚:氯

样品总RNA的提取

实验概要本实验介绍了样品总RNA的提取方法。完整RNA的提取和纯化,是进行RNA方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点,即:样品细胞或组织的有效破碎;有效地使核蛋白复合体变性;对内源RNA酶的

浙江大学最新评述:深度测序技术发掘植物病毒资源

  科学通报,中国科学C辑:生命科学,这两份期刊均是由中国科学院和国家自然科学基金委员会共同主办的,我国学术期刊中的知名品牌,被国内外各主要检索系统收录,如国内的《中国科学论文与引文数据库》(CSTPCD)、《中国科学引文数据库》(CSCD)等;美国的SCI、CA、EI,英国的SA,日本的《科技文献

总RNA的提取

 完整RNA的提取和纯化,是进行RNA方面的研究工作,如Nothern杂交、mRNA分离、RT-PCR、定量PCR、cDNA合成及体外翻译等的前提。所有RNA的提取过程中都有五个关键点,即1):样品细胞或组织的有效破碎;2),有效地使核蛋白复合体变性;3),对内源RNA酶的有效抑制;4)有

美科学家发现两种700年前的病毒序列并感染了活植物

  最近,美国血液系统研究所科学家在取自亚北极冰原的冰核中发现了封冻的驯鹿粪便,其中含有两种700年前的病毒序列。他们分离出一种病毒的部分RNA(核糖核酸)基因组和另一种DNA(脱氧核糖核酸)病毒的完整基因组,并用DNA病毒感染了活植物。相关论文发表在美国《国家科学院学报》上。  科学家对病毒的进化

病毒RNA提取实验

实验方法原理 大多植物病毒RNA 为单链RNA ,并且其极性与mRNA 极性相同,植物病毒RNA 提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。实验材料 TMV病毒液试剂、试剂盒 TE-饱和酚:氯仿氯仿NaAc乙醇TE缓冲液双菌水仪器、耗材 冷冻台式离心机低温真空干燥仪电泳仪电泳槽实验步骤 一、实验

植物病毒(plant viruses)RNA提取

   大多植物病毒RNA为单链RNA,并且其极性与mRNA极性相同,植物病毒RNA提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。   一、材料   提纯TMV病毒液(10mg/ml)。   二、设备   冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,电泳仪,电泳槽。   三

病毒RNA提取实验

TE-饱和酚/氯仿提取法             实验方法原理 大多植物病毒RNA 为单链RNA ,并且其极性与mRNA

纳米技术检测植物病毒研究取得新成果

  2009年2月10日,记者在北京检验检疫局《应用纳米磁珠技术检测重要植物病毒的研究》项目鉴定会上了解到,该项目在国际上首次建立了适用于黄瓜绿斑驳花叶病毒、南芥菜花叶病毒等5种重要植物病毒的纳米磁珠富集病毒和提取RNA方法,并创新性地将纳米磁珠的病毒核酸提取技术与普通RT-PCR、实时荧光RT-P

DNA提取仪应用领域

几乎在每个实验室,与生物分子相关的分离纯化工作都是十分重要,且必不可少的。但要对多个样品进行纯化还是相当困难的,不仅需要选择合适的纯化技术,而且工作量也特别大,很难满足当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取纯化系统是使用磁珠法技术,可同时操作1-32个样

核酸纯化仪应用领域/核酸纯化仪

几乎在每个实验室,与生物分子相关的分离纯化工作都是十分重要,且必不可少的。但要对多个样品进行纯化还是相当困难的,不仅需要选择合适的纯化技术,而且工作量也特别大,很难满足当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取纯化系统是使用磁珠法技术,可同时操作1-32个样

用化学常识解释转基因

  河南日报退休高级编辑,大河健康报退休总编,河南农大兼职教授,中国新闻奖获得者。  各位女士、各位先生:  大家好。大家都是经常来图书馆借书、看书的读者,如今喜欢看书的人真是难能可贵。看年龄,大家多数是60后、50后,少数是70后、40后。大家可能都不是生物专业的大学生,但是大家在中学阶段都学过化

核酸纯化仪 应用领域

几乎在每个实验室,与生物分子相关的分离纯化工作都是十分重要,且必不可少的。但要对多个样品进行纯化还是相当困难的,不仅需要选择合适的纯化技术,而且工作量也特别大,很难满足当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取纯化系统是使用磁珠法技术,可同时操作1-32个样品,

MCMV和SCMV复合侵染玉米引起玉米组织中siRNAs的积累

  RNA沉默是真核生物中调控基因表达的一种保守机制,它在植物生长发育和抗病毒中发挥着重要的作用。RNA病毒进入寄主植物细胞后,其复制中间复合体和单链基因组RNA的高级结构形成的双链RNA可以被寄主植物DCL蛋白识别,加工产生21-24-nt的初级来源于病毒的siRNA(vsiRNA)。初级vsiR

MCMV和SCMV复合侵染玉米引起玉米组织中siRNAs的积累

  背景介绍   RNA沉默是真核生物中调控基因表达的一种保守机制,它在植物生长发育和抗病毒中发挥着重要的作用。RNA病毒进入寄主植物细胞后,其复制中间复合体和单链基因组RNA的高级结构形成的双链RNA可以被寄主植物DCL蛋白识别,加工产生21-24-nt的初级来源于病毒的siRNA(vsiRNA

MCMV和SCMV复合侵染玉米引起玉米组织中siRNAs的积累

背景介绍RNA沉默是真核生物中调控基因表达的一种保守机制,它在植物生长发育和抗病毒中发挥着重要的作用。RNA病毒进入寄主植物细胞后,其复制中间复合体和单链基因组RNA的高级结构形成的双链RNA可以被寄主植物DCL蛋白识别,加工产生21-24-nt的初级来源于病毒的siRNA(vsiRNA)。初级vs

全自动磁珠提取纯化技术——Thermo Scientific kingfisher技术 一

技术原理:KingFisher系列产品是适于分离DNA/RNA、蛋白和细胞的全自动提取纯化系统,专为解决客户现在和未来的所有纯化问题而设计。创新的产品基于专利的KingFisher技术(专利号US 6447729, US 6448092),通过特制的磁棒吸附、转移和释放磁珠,从而实现磁珠/样

病毒RNA提取实验方法

1,用异硫氰酸胍提取提病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题):1.取 200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时,另取

常用的分子生物学基本技术

核酸分子杂交技术由于核酸分子杂交的高度特异性及检测方法的灵敏性,它已成为分子生物学中最常用的基本技术,被广泛应用于基因克隆的筛选,酶切图谱的制作,基因序列的定量和定性分析及基因突变的检测等。其基本原理是具有一定同源性的原条核酸单链在一定的条件下(适宜的温室度及离子强度等)可按碱基互补原成双链。杂交的

病毒RNA提取实验方法(protocol)

1,用异硫氰酸胍提取提禽流感病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题):1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时,

免疫增强药物及免疫增强疗法(一)

  免疫增强包括免疫刺激、过继免疫和免疫重建。免疫刺激疗法即应用免疫刺激剂激发免疫系统,而达到增强免疫功能的目的;过继免疫治疗即用同种异体的淋巴细胞输给受者,使受者的免疫功能得到补偿。免疫重建是通过胚胎肝或骨髓干细胞移植,用于治疗原发性和继发性免疫缺陷病。这些具有免疫增强作用的制剂称为免疫